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Research Article
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Erratum Notice
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Retraction Notice
The article Assisted Selection of Biomarkers by Linear Discriminant Analysis Effect Size (LEfSe) in Microbiome Data (10.3791/61715) has been retracted by the journal upon the authors' request due to a conflict regarding the data and methodology. View Retraction Notice
Eine Phase-Inversion-Co-Flow-Gerät zeigt um Monodisperse hochviskose Tröpfchen über 1 Pas zu erzeugen, die schwierig, in Tröpfchen Mikrofluidik zu verwirklichen ist.
Die Generation der Monodisperse Tropfen mit hoher Viskosität seit jeher eine Herausforderung in Tröpfchen Mikrofluidik. Hier zeigen wir ein Phase-Inversion Co-Flow Gerät um einheitlich hoher Viskosität Tröpfchen in eine niedrigviskose Flüssigkeit zu erzeugen. Das mikrofluidischen Kapillare Gerät hat eine gemeinsame Co-Flow-Struktur mit seinen Ausgang zu einem breiteren Schlauch anschließen. Längliche Tröpfchen der niedrigviskosen Flüssigkeit werden zunächst durch die hochviskose Flüssigkeit in der Co-Flow Struktur gekapselt. Wie die länglichen dünnflüssiges Tröpfchen durch den Ausgang die behandelt wird fließen, durch die niedrigviskose Flüssigkeit benetzt werden, wird Phase Inversion dann durch die Adhäsion der niedrigen Viskosität Tropfen an der Spitze der Ausfahrt induziert die Ergebnisse in die anschließende inverse Kapselung von hochviskosen Flüssigkeiten. Die Größe der resultierenden hochviskose Tröpfchen kann durch Ändern der Preis Verhältnis der niedrigviskosen Flüssigkeit, hochviskose Flüssigkeit. Wir zeigen einige typische Beispiele für die Erzeugung von hoher Viskosität Tröpfchen mit einer Viskosität bis 11,9 Pas, wie Glycerin, Honig, Stärke und Polymer-Lösung. Die Methode bietet einen einfachen und unkomplizierten Ansatz um Monodisperse hochviskose Tröpfchen erzeugen, die in einer Vielzahl von Tröpfchen-basierten Anwendungen wie Materialsynthese, Drug-Delivery, Zelle Assay, Bioengineering und Lebensmitteln verwendet werden dürfen Technik.
Die Generation der Tröpfchen wird eine Schlüsseltechnologie in einer Vielzahl von Anwendungen, z. B. Drug-Delivery, Materialsynthese, 3D Bioprinting, Zelle Assays und Food engineering1,2,3,4 , 5 , 6. Co fließen mikrofluidischen Geräte mit t-Kreuzung7,8,1,9, oder Fluss-Fokussierung10,11 Strukturen sind weit verbreitet, Monodisperse zu generieren einzigen Emulsion Tröpfchen. Auswahl von viskoser dauerphase erleichtert die Bildung von Tröpfchen12, und die Viskosität der kontinuierlichen und verteilten Flüssigkeiten sind häufig unter 0,1 Pas in Tröpfchen Mikrofluidik13. Jedoch kann in vielen Anwendungen die dispersen Phase eine Viskosität mehrere hundert Mal höher als die des Wassers, wie Glycerin14, Lösungen mit Nanopartikeln15, Proteine16oder Polymere17 haben , 18 , 19, es ist zwar schwierig, Monodisperse Tropfen direkt von hochviskosen Flüssigkeiten in einem Stall tropft Regime11 in mikrofluidischen Geräten, insbesondere für Flüssigkeiten mit einer Viskosität η > 1 Pa·s14 zu erreichen ,17,18,19. Darüber hinaus wurde berichteten13,18 , dass typische mikrofluidischen Methoden zur Tropfenbildung Flüssigkeiten mit relativ niedrigen Viskosität und moderate Grenzflächenspannung einheitliche Tröpfchen in einer stabilen tropfenden bilden erfordern Regime.
Für dispergierte Phase mit einer Viskosität etwas größer als 0,1 Pas, gibt es mehrere mögliche Ansätze zur Erleichterung der Tropfenbildung mit typischen t-Kreuzung, Co-Flow oder Flow-Fokussierung mikrofluidischen Geräte: (1) Abnahme der Viskosität der dispersen Phase in eine flüchtige Lösungsmittel11,20verdünnen; (2) verringern Sie das Verhältnis verteilt, kontinuierliche Viskosität durch die Erhöhung der Viskosität der kontinuierlichen Phase1,11; (3) verringern Sie die Durchflussmenge der dispersen Phase auf einen extrem niedrigen Wert, wobei ein hoher kontinuierlicher zerstreut Flow Rate Verhältnis 14,19. Diese Ansätze sind jedoch nicht für Flüssigkeiten mit viel höherer Viskosität, praktisch, wie sie die Produktionsrate deutlich senken werden, während dramatisch erhöhen den Verbrauch das flüchtige Lösungsmittel oder die kontinuierliche Phase. Darüber hinaus wurde berichtet, dass einige hohe Viskosität Polymerlösungen mit η > 1 Pa·s noch nicht in Tröpfchen mit17,19genannten Ansätze brechen oben.
Es gibt auch mehrere verbesserte Designs von mikrofluidischen Geräten, die eine dritte Phase der Flüssigkeit in das System einzuführen, die die Erzeugung von hoher Viskosität Tröpfchen erleichtert. Innovationen gehören: Bläschen eingeführt, um eine sprühvolumen Fadenabschneiden in Tröpfchen21, eine nicht mischbaren Geschäftsplanungen Flüssigkeit mit moderaten Viskosität, als die mittlere Phase zwischen der Dipsersed-Phase und der kontinuierlichen Phase18, eingeführt und Mikroreaktoren eingeführt, um hochviskose Tröpfchen aus zwei dünnflüssigen Vorstufen21,22,23zu generieren. Jedoch wie ein flüssiger beteiligt ist, das System wird immer komplizierter und die Geräte funktionieren in der Regel in einem viel engeren Fluss Regime als die typische Geräte zur Erzeugung von einzelnen Emulsion Tröpfchen.
Monodisperse generieren, die Tropfen direkt aus eine hochviskose Flüssigkeit mit η > 1 Pa·s, Oberfläche-kontrollierten Phase-Inversion Methoden wurden untersucht,24. Wie die Generation von dünnflüssigen Tröpfchen viel einfacher als die von hoher Viskosität Tröpfchen12, längliche dünnflüssiges Tröpfchen in einer kontinuierlichen Phase hoher Viskosität entstehen zunächst mit einer typischen Co-Flow-Struktur, und dann sind Due abgewrackt zur Veränderung der Oberfläche Benetzbarkeit flussabwärts der Co-Flow Struktur. Das freigegebene dünnflüssiges Fluid kapselt umgekehrt die nachgelagerte hochviskose Flüssigkeit in Tröpfchen so dass Phase Inversion abgeschlossen ist. Nach der Phase Inversion Mechanismus können Monodisperse hochviskose Tröpfchen erzeugt werden, basierend auf einem typischen Co-Flow-Gerät während die Ausfahrt von der Co-Flow-Gerät behandelt, um durch die niedrigviskose Flüssigkeit benetzt werden und dann mit einem größeren Rohr24 verbunden ist ,25.
(1) Herstellung einer Phase Inversion Co-Flow Kapillare Vorrichtung für die Generierung von wässrigen, hochviskose Tröpfchen mit einem Durchmesser von ca. 500 μm zu beobachten.
Hinweis: Das Quadrat Außenrohr verwendet hier ist für Bilder der Generierung der hochviskosen Tröpfchen. Besteht keine Notwendigkeit, Bilder zu nehmen, kann eine vereinfachte Version des Geräts entsprechend Protokoll Schritt 2 gebildet werden.
2. machen Sie eine Phase-Inversion, Co-Flow Kapillare Gerät zur Herstellung von wässriger hochviskose Tröpfchen mit einem Durchmesser von ca. 500 μm.
Hinweis: Das Gerät hier ist eine vereinfachte Version des Geräts im Protokoll Schritt 1.
3. machen Sie Phase-Inversion Co Flow Kapillar-Gerät für die Beobachtung der Generierung von wässrigen hochviskose Tröpfchen mit einem Durchmesser von ca. 200 μm.
Hinweis: Das Gerät hier ist eine kleinere Version des Geräts des Protokolls Schritt 1, um kleinere Tröpfchen zu machen.
4. beobachten die Generation von Glycerin Tröpfchen in flüssiges Paraffin
Hinweis: Für die Aufnahme der Abbildungen in Zahlen 1 b - D, verwenden Sie das Gerät im Protokoll Schritt 1 vorbereitet; Verwenden Sie für die Aufnahme von Bildern in Abbildung 3dargestellt das Gerät im Protokoll Schritt 3 vorbereitet.
(5) generieren und sammeln die Tropfen Glycerin in flüssigem Paraffin mit dem vereinfachten Gerät in Schritt 2 erstellt.
Hinweis: Dies ist für die Aufnahme von Bildern der Glycerin Tropfen erzeugt unter verschiedenen Flow Rate Verhältnis von Qo/Qw, und die Messung der entsprechenden Größe Variation der Tröpfchen für die Datenpunkte in Abbildung 2.
6 erzeugen Sie andere hochviskose Tröpfchen in flüssigem Paraffin mit dem Phase-Inversion-Co-Flow-Gerät.
Hinweis: Dies ist für die Bilder in Abbildung 4. Alle in den Experimenten verwendeten dünnflüssiges Öl-Phase ist die gleiche wie im Protokoll Schritt 4.1.2 verwendet.
Eine mikrofluidischen Kapillare Gerät mit einer Phase-Inversion, Co-Flow Struktur wurde entwickelt, um Monodisperse wässrigen hochviskose Tröpfchen, erzeugen, wie in Figur 1Adargestellt. In Abbildung 1, war die hochviskosen wässrige Phase Glycerin hat eine Viskosität ηw = 1,4 Pas; dünnflüssiges Öl-Phase wurde flüssiges Paraffin, hat eine Viskosität ηo = 0,029 Pas; die Oberflächenspannung zwischen den beiden Phasen war γ = 27,7 mN/m. In der mittleren Röhre können längliche Öltröpfchen von Glycerin in einem gut kontrollierten tropfenden Modus9,13, gekapselt werden weil die Viskosität von Glycerin viel höher als die von flüssigem Paraffin und die Kapillaren Zahlen, Ca ist , der beiden Phasen sind so niedrig wie 10-4- 10-2, wo Ca = ηU/γ, U = Q/A ist die durchschnittliche Geschwindigkeit der Flüssigkeit, und A ist die Fläche des Kreuzes Abschnitt des Kanals. Als die längliche Öltröpfchen aus der Ausfahrt der mittleren Röhre in einen breiteren Außenrohr floss, wie in Abbildung 1 bgezeigt, die Öltröpfchen brach an der hydrophoben Spitze der mittleren Röhre und umgekehrt gekapselt nachgelagerte GAP von Glycerin, so dass hoher Viskosität Glycerin Tropfen wurden erhalten, wie in Abbildung 1dargestellt. Solange die Tropfengröße und die Distanz zwischen jeden zwei angrenzenden Öltröpfchen unverändert gehalten werden, werden die gebildeten Glycerins Tröpfchen Monodisperse24,25. Die Bilder in Abbildung 1 b-C wurden mit dem Gerät von Schritt 1 und folgende experimentelle Protokoll Schritt 4 erhalten. Die Glycerin-Tröpfchen erzeugt bei Qo = 30 uL/min und Qw = 10 uL/min sind in Abbildung 1, wobei die Tropfen hatte einen Durchmesser von 521 μm und den Variationskoeffizienten (CV) dargestellt, der die Tropfengröße, definiert als die Standardabweichung dividiert durch die durchschnittliche Tröpfchengröße war CV = 0,9 %, was darauf hindeutet, die Tröpfchen waren monodispers.
Die Größe der Tröpfchen hoher Viskosität kann durch Veränderung der Flow Rate Verhältnisse Qo/Qw mit einem festen Qw. Eine Reihe von typischen experimentellen Ergebnisse aus den Experimenten nach Protokoll Schritt 5 mit dem Gerät des Protokolls Schritt 2, ist in Abbildung 2dargestellt. Als Qwurdew behoben, die Tropfengröße sank mit der Zunahme der Qo. Weitere Erhöhung des Flow Rate Verhältnisses kann Ertrag kleinere Tröpfchen, aber der Volumenanteil der Tröpfchen entsprechend und es gesunken wäre hätte einen dramatischen Anstieg der gesamtgegenkraft und inneren Druck im Inneren der Geräte. Daher war die Tropfengröße innerhalb des Bereichs der Flow Rate Ratio in Abbildung 2, vergleichbar mit der Innendurchmesser der mittleren Röhre.
Die Tropfengröße kann weiter verringert werden, wenn ein Gerät mit kleineren Röhren verwendet wird. Die typischen experimentellen Ergebnisse nach Protokoll Schritt 4 mit dem Gerät von Protokoll Schritt 3, sind in Abbildung 3, wo das mittlere Rohr eine I.D hatte gezeigt = 200 μm.
Das gleiche Gerät aus Protokoll Schritt 2 kann monodispersen Tropfen aus verschiedenen hochviskose Flüssigkeiten zu generieren die Viskositäten höher als Glycerin verwendet werden. Typische Ergebnisse von monodispersen Tropfen Honig (11 Pas), Stärkelösung (8,5 Pas) und Polymerlösung (2,5 Pas) sind in Abbildung 4dargestellt. Die Vorbereitung der Flüssigkeiten in Abbildung 4 wird im Protokoll Schritt 6 beschrieben.

Abbildung 1: Generation hochviskose Glycerin Tropfen in dünnflüssigen Paraffinöl mit Phase-Inversion Co-Flow Gerät. (A) schematische Darstellung der Phase-Inversion-Co-Flow-Geräte. (B) die Beobachtung der Generation der Glycerin Tropfen von Öl-in-Glycerin Slug fließen in das mittlere Rohr, die einzelne Glycerin-in-Öl-Emulsion im äußeren Rohr. (C) Zeit Sequenz Bilder des Phase-Inversion-Prozesses. (D) die monodispersen Glycerin Tropfen und die Größenverteilung der Tropfen. Der mittlere Durchmesser der Tröpfchen ist 521 μm und CV = 0,9 %. Nachdruck mit freundlicher Genehmigung von [24]. Copyright 2017 American Chemical Society. Der Maßstabsbalken sind 500 μm. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

Abbildung 2: Variation von der Tröpfchengröße mit der Änderung der Flow Rate Ratio QO/QW zwar QW = 2 μl/min Für jeden Datenpunkt 30 Tropfen werden gemessen, und der mittlere Durchmesser wird berichtet. Da die Fehlerbalken der Standardabweichung kleiner als das Symbol in der Handlung sind, werden sie hier nicht angezeigt. Nachdruck mit freundlicher Genehmigung von [24]. Copyright 2017 American Chemical Society. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

Abbildung 3: kleinere Glycerin Tröpfchen erzeugt aus dem Gerät mit dem mittleren Rohr I.D. = 200 µm. (A) die Beobachtung der Generation von Glycerin Tröpfchen in die äußere Röhre des Geräts. (B) die resultierende Monodisperse Glycerin Tröpfchen mit einem mittleren Durchmesser von 212 μm und CV = 1,9 %. Nachdruck mit freundlicher Genehmigung von [24]. Copyright 2017 American Chemical Society. Der Maßstabsbalken sind 200 μm. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

Abbildung 4: typische Beispiele für hochviskose Tröpfchen aus verschiedenen Lösungen generiert. Nachdruck mit freundlicher Genehmigung von [24]. Copyright 2017 American Chemical Society. (A) Honig Tröpfchen mit einem mittleren Durchmesser von 612 μm und CV = 0,7 %. (B) Stärke Tröpfchen mit einem mittleren Durchmesser von 600 μm und CV = 0,9 %, (C) PVA-124 Polymer Tröpfchen mit einem mittleren Durchmesser von 773 μm und CV = 0,7 %. Alle Maßstabsleisten sind 1,0 mm. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.
Die Autoren haben nichts preisgeben.
Eine Phase-Inversion-Co-Flow-Gerät zeigt um Monodisperse hochviskose Tröpfchen über 1 Pas zu erzeugen, die schwierig, in Tröpfchen Mikrofluidik zu verwirklichen ist.
Diese Arbeit wurde von der National Natural Science Foundation of China (Nr. 51420105006 und 51322501) unterstützt. Wir danken Daniel für seine hilfreiche Diskussion über die hohe Viskosität-Ideen.
| VitroTubes Glasröhre | VitroCom | 8240 | Square - Miniatur Hohlglasröhre, I.D.=0.4mm, OD=0.8mm |
| VitroTubes Glasröhre | VitroCom | CV2033 | Rund - Miniatur Hohlglasröhre, I.D.=0.2mm, O.D.=0.33mm |
| VitroTubes Glasröhre | VitroCom | CV1017 | Rund - Miniatur Hohlglasröhre, I.D.=0.1mm, O.D.=0.17mm |
| VitroTubes Glasröhre | VitroCom | Q14606 | Quadratisch - Miniatur-Hohlglasröhre, ID = 1,05 mm + 0,1 / -0, OD = 1,5 mm |
| Standard-Glaskapillaren | WPI | 1B100-6 | Rund - Glasröhre, ID = 0,58 mm, AD = 1,00 mm |
| Glycerin | Sinopharm Chemisches Reagenz Beijing | 10010618 | |
| Paraffin Liquid | Sinopharm Chemisches Reagenz Beijing | 30139828 | |
| Poly(vinylalkohol), PVA-124 | Sinopharm Chemisches Reagenz Beijing | 30153084 | |
| Span 80 | Sigma-Aldrich | 85548 | |
| Stärke | Sigma-Aldrich | S9765 | |
| Trichlor(octadecyl)silan | Sigma-Aldrich | 104817 | |
| Toluidinblau O | Sigma-Aldrich | T3260 | |
| Honig | Mönchspfefferhonig, häufig Lebensmittel, das im Supermarkt | ||
| DEVCON 5 Minute Epoxy | ITW | Epoxidkleber | |
| Blunt Tip Edelstahl Dosiernadeln (Luer Lock) | Suzhou Lanbo Nadel, China | LTA820050 | 20G x 1/2" |
| Wolfram/Hartmetall-Anreißer | Ullman | 1830 | Zum Schneiden von Glasröhren |
| Objektträger | Segel Marke | 7101 | 76,2 mm x 25,4 mm, Dicke 1 - 1,2 mm |
| Polyethylenschlauch | Scientific Commodities | BB31695-PE/5 | I.D. = 0,86 mm, O.D. = 1,32 mm |
| Spritzenpumpen | Längere Pumpe, China | LSP01-1A | 3 Pumpen für die Experimente benötigt |