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Methodenartikel

Nicht-invasive High-Throughput-Bestimmung der Schlafdauer bei Nagern

7.5K Aufrufe

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DOI:

10.3791/57420

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18. April 2018

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In diesem Artikel

Zusammenfassung

Wir beschreiben eine Hochdurchsatz-Methode zur Messung der Schlaf durch Activity based Überwachung Haus-Käfig. Diese Methode bietet Vorteile gegenüber herkömmlichen EEG-basierten Methoden. Es kann ist gut für die Bestimmung der gesamten Schlafdauer validiert und ein mächtiges Werkzeug, Schlaf in Nager-Modelle der menschlichen Krankheit zu überwachen.

Zusammenfassung

Traditionell wird Schlaf durch ein Elektroenzephalogramm (EEG) überwacht. EEG-Studien an Nagern erfordern chirurgische Implantation der Elektroden, gefolgt von einer langen Erholungsphase. Um eine EEG-Aufzeichnung durchzuführen, ist das Tier an einen Empfänger, erstellen eine unnatürliche Leine an der Kopf-Halterung verbunden. EEG-Überwachung ist zeitaufwendig, trägt ein Risiko für das Tier, und ist keine völlig natürliche Umgebung für die Messung des Schlafes. Alternative Methoden, um Schlaf, besonders in einer Hochdurchsatz-Mode erkennen würde stark Bereich der Schlafforschung vorrücken. Hier beschreiben wir eine validierte Methode zur Erkennung von Schlaf durch Activity based monitoring Haus-Käfig. Frühere Studien haben gezeigt, dass Schlaf über diese Methode bewertet ein hohes Maß an Übereinstimmung mit dem Schlaf durch traditionelle EEG-basierten Maßnahmen definiert hat. Während diese Methode für die Gesamt-Schlafdauer validiert ist, ist es wichtig zu beachten, dass die Schlafdauer Kampf durch ein EEG bewertet werden sollte, die bessere zeitliche Auflösung hat. Das EEG kann auch REM (REM) und non - REM-Schlaf, geben mehr Details über die genaue Art des Schlafes unterscheiden. Dennoch kann Activity based Schlaf Bestimmung mehrere Tage der ungestörten Schlaf analysieren und Schlaf als Reaktion auf ein akutes Ereignis (wie Stress) bewerten verwendet werden. Hier zeigen wir die Kraft dieses Systems, die Beantwortung von Mäusen täglich intraperitoneale Injektionen zu erkennen.

Einleitung

Schlaf hat wichtige Funktionen für die Wiederherstellung von Körper und Gehirn nach der täglichen Belastung der Wachheit1. Es hat sich gezeigt, dass Schlaf eine Rolle bei der Merkfähigkeit und allgemeine Gehirn Plastizität1 spielt. Das EEG ist der Goldstandard, Schlaf2zu erkennen. Bei Nagetieren erfordert EEG Überwachung chirurgische Implantation von Elektroden angebracht, um eine Kopf-Mount, woraufhin benötigt das Tier eine Zeit2wiederherstellen. Nach der Wiederherstellung das Tier ist an das Aufnahmegerät angeschlossen und erhält eine andere Periode der Gewöhnung

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Protokoll

Die Verfahren wurden durch die nationale Institut für geistige Gesundheit Animal Care and Use Committee genehmigt und durchgeführt in Übereinstimmung mit den nationalen Institute der Gesundheitsrichtlinien auf die Pflege und Nutzung von Tieren.

1. Einrichten schlafen Erkennungseinheiten

  1. Kaufen Sie die gewünschte Anzahl von Einheiten und Software.
  2. Folgen Sie den Anweisungen zum Einrichten der monitoring-Systeme.
    1. Richten Sie einen Detektor gegenüber einem Emitter. Stellen Sie sicher die Infrarot-Strahlen nach innen stehen und auf gleicher Höhe ausgerichtet sind.
    2. Verwenden Sie die mitgelieferten Schrauben....

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Ergebnisse

Um die Wirkung der täglichen Injektionen auf Schlaf und ob Tiere gewöhnen zu den Injektionen zu ermitteln, führten wir tägliche IP-Injektionen an 14 aufeinander folgenden Tagen um 09:00 (Licht-Zyklus begann um 06:00) und 12 1 KO C57Bl/6J Mäuse Schlafdauer erzielte. Wir nutzten ein Probanden Design, Injektion jedes Tier mit normalen Kochsalzlösung für 4 aufeinanderfolgende Tage (1-4 Tage) und dann 30 % Cyclodextrin für die folgenden zehn aufeinander folgenden Tagen (5-14 Tage). Cy.......

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Diskussion

Hier präsentieren wir Ihnen eine nicht-invasive, Hochdurchsatz-Methode zur Bestimmung der Schlafdauer basierend auf Aktivitätsüberwachung im Haus-Käfig. Diese Methode der Ermittlung des Gesamt-Schlafdauer wurde gegen EEG Studien3validiert. Activity based Überwachung Haus-Käfig ist einfach, nicht-invasive und für Bevölkerungsstudien in großer Zahl von Tieren. Es ist begrenzt, da es nicht ausführliche Informationen über den Schlaf (z. B. Kampf Dauer und Schlaf Schlafstadien) geben kann.

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Offenlegungen

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Danksagungen

Die Autoren möchten der NIH-Fellows-Redaktion für ihre redaktionelle Unterstützung anerkennen. Diese Forschung wurde durch das intramurale Forschungsprogramm des NIMH (ZIA MH00889) finanziert. RMS wurde auch durch eine FRAXA Postdoctoral Fellowship unterstützt.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Comprehensive Lab Animal Monitoring System (CLAMS)Columbus InstrumentsGeräte und Software zur Analyse der Schlafdauer
Captisol ForschungsqualitätCaptisolRC-0C7-100Captisol zum Auflösen hydrophober Verbindungen
30 G BD Nadel 1/2 ZollBD305106Nadel für Injektionen
BD EinwegspritzenFisher14-823-30Spritzen für Injektionen
B6.129P2-Fmr1tm1Cgr/JJackson Labs3025Fmr1 KO Mäuse
Super Mouse 750 Maus CageLab Products, Inc. Homecages für die Mäuse
SANI-Chips EinstreuPJ MurphysEinstreu für die Mäuse

Referenzen

  1. Picchioni, D., Reith, R. M., Nadel, J. L., Smith, C. B. Sleep, plasticity and the pathophysiology of neurodevelopmental disorders: the potential roles of protein synthesis and other cellular processes. Brain sciences. 4, 150-201 (2014).
  2. Ingvar, M. C., Maeder, P., Sokoloff, L., Smith, C. B.

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Nachdrucke und Genehmigungen

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