Ein Abonnement von JoVE ist erforderlich, um diesen Inhalt anzuzeigen. Melden Sie sich an oder beginnen Sie noch heute mit einer kostenlosen Testphase.

Methodenartikel

Induktion eines nephrotischen Syndroms bei Mäusen durch retrobulbären Injektion von Doxorubicin und Verhinderung von Volume Retention von verzögerter Freisetzung Aprotinin

8.1K Aufrufe

⸱

DOI:

10.3791/57642

⸱

6. Mai 2018

 , 
1Department of Internal Medicine, Division of Endocrinology, Diabetology, Vascular Disease, Nephrology and Clinical Chemistry, University Hospital Tübingen, 2Institute of Diabetes Research and Metabolic Diseases (IDM) of the Helmholtz Center Munich, University Tübingen, 3German Center for Diabetes Research (DZD), University Tübingen

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Hier beschreiben wir die Induktion eines experimentellen nephrotischen Syndroms bei 129S1/SvImJ Mäusen durch schnelle retrobulbären Injektion von Doxorubicin. Wir behandeln auch Nephrotisches Mäuse mit verzögerter Freisetzung Pellets mit Aprotinin um Harn Serin-Protease-Aktivität hemmen und verhindern, dass Natrium-Retention.

Zusammenfassung

Nephrotisches Syndrom ist die extremste Manifestation des proteinuric Nierenerkrankung und zeichnet sich durch schwere Proteinurie, Hypoalbuminämie und Ödem durch Natrium-Retention und Hyperlipidämie. Zur Untersuchung der Pathophysiologie dieses Syndroms anhand Nagetier, die Modelle entwickelt wurden der Injektion von giftigen Substanzen wie Doxorubicin hemolytic Schaden. Bei Mäusen sind nur wenige Stämme anfällig für dieses Modell. In Wildtyp-129S1/SvImJ-Mäuse induziert die Gabe von Doxorubicin durch schnelle intravenöse Injektion, dem retrobulbären Sinus experimentelle Nephrotisches Syndrom, bietet die Symptome von Krankheiten einschließlich Natrium-Retention und Ödem. Nach dem Einsetzen der Proteinurie erhöht Mäuse Ausstellung Harn Serin-Protease-Aktivität, die zur Aktivierung des epithelialen Natrium-Kanal (ENaC) und Natrium-Retention führt. Pharmakologische Hemmung der Harn Serin Proteasen durch die Behandlung mit verzögerter Freisetzung Aprotinin hebt ENaC Aktivierung und verhindert, dass Natrium-Retention. Dieses Modell ist ideal, um die Pathophysiologie der Proteasuria, dhstudieren., die Ausscheidung von aktiven Serin-Proteasen, die ENaC Aktivierung durch Proteolyse von der γ-Untereinheit verursachen. Dies kann als der primäre Mechanismus der ENaC Aktivierung und Natrium-Retention in proteinuric Nierenerkrankung betrachtet werden.

Einleitung

Nephrotisches Syndrom ist gekennzeichnet durch schwere Proteinurie, Hypoalbuminämie, Ödeme und Hyperlipidämie und als die extremste Manifestation des proteinuric Nierenerkrankung angesehen werden kann. Bei Nagetieren kann experimentelle Nephrotisches Syndrom durch einmalige Injektion von Anthrazyklinen oder Puromycin führt zu hemolytic Schäden und ähnelt menschlichen minimale Änderung Krankheit und fokal segmentale Glomerulosklerose (FSGS)1induziert werden. Nach seiner Erstbeschreibung im Jahr 1955 von Frenk Et Al. 2, Puromycin Nukleosid Nephrose (PAN) bei Ratten ist ein Standardmodell zu untersuchen, die Pathophysiologie des Nephrotischen Syndroms in zahlreichen Studien3,4,5,6geworden. Bei Mäusen kann das entsprechende Modell von Anthrazyklin Doxorubicin7induziert werden. Allerdings gibt es eine starke Belastung-Abhängigkeit, die durch mindestens zwei genetische Loci8genetisch determiniert ist. Darüber hinaus gibt es Unterschiede in der proteinuric Reaktion und Kurs des Nephrotischen Syndroms9,10. Mit 129S1/SvImJ Mäusen und schnelle intravenöse Injektion von Doxorubicin über den retrobulbären Sinus, erreichen Proteinurie Antworten Werte, die ausreichen, um die typischen Merkmale eines nephrotischen Syndroms, insbesondere Volume Retention zeichnet sich durch induzieren Aszites und beinahe natriumfrei Urin7. Natrium-Retention im experimentellen Nephrotisches Syndrom hat vermutlich das Ergebnis der Aktivierung des epithelialen Natrium-Kanal (ENaC) in den distalen Röhrchen durch akzessorisch gefilterte Serin Proteasen wie Plasmin verursacht Proteolyse von der γ-Untereinheit4 ,11,12. Vor kurzem wurde dieses Konzept Nephrotisches Mäusen bewiesen die aus proteolytischen ENaC-Aktivierung und Natrium-Retention durch Behandlung mit Serin Protease-Inhibitor Aprotinin geschützt waren, die ebenso wirksam wie die ENaC Blocker Amilorid13war. Um kontinuierliche Lieferung an der distalen Röhrchen zu gewährleisten, wurde Aprotinin über subkutan implantierten verzögerter Freisetzung Pellets verabreicht. Zukünftige Studien sind verpflichtet die Serin-Proteasen zu identifizieren, die verantwortlich für die proteolytische Aktivierung der ENaC in Nephrotisches Syndrom sind die vermutlich die menschliche Situation parallel. Zu diesem Zweck ist Doxorubicin-induzierte Nephrotisches Syndrom ein wertvolles Modell, das auf gentechnisch veränderte Mäuse erweitert oder in Wildtyp Mäusen verwendet werden kann. Seine Vorteile sind niedrige Kosten für das Medikament, geringere Komplexität des Managements und der guten Reproduzierbarkeit14.

In diesem Artikel zeigen wir die Induktion der experimentellen Nephrotisches Syndrom durch schnelle intravenöse Injektion von Doxorubicin, des retrobulbären Sinus und Implantation von retard-Pellets mit Aprotinin um Harn Serin Protease hemmen Aktivität mit einem chromogenen Assay gemessen.

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Protokoll

Alle Methoden wurden nach der nationalen Institute der Gesundheit Guide für die Pflege und Verwendung von Labortieren und das deutsche Recht für das Wohlergehen der Tiere durchgeführt, und sie wurden von den lokalen Behörden (Regierungspräsidium Tübingen) genehmigt.

1. Induktion von experimentellen Nephrotisches Syndrom von Doxorubicin Einspritzung des retrobulbären Sinus

  1. Bereiten Sie eine 0,5 mL Spritze mit einer montierten 30G Kanüle durch die Markierung der Stop-Stellung des Kolbens.
  2. Injektionsvolumen von Doxorubicin für männliche (7,25 µL/g Körpergewicht (bw) gleich 14,5 µg/g bw Doxorubicin) und weiblichen Mäusen (6.9 µL/g bw gleich 13,8 µg/g bw Doxorubicin) entsprechend dem Körpergewicht von morgens zu berechnen.
    Hinweis: Die angegebene Dosis eignet sich für die Induktion eines nephrotischen Syndroms. Geringfügige Änderungen in der Dosierung führen zu einem entscheidenden verschiedene Nephropathie reicht von milden chronischen Nierenerkrankung mit nur kleinen Änderungen in glomeruläre Filtrationsrate (12,6 µg/g bw Doxorubicin) zu akuten Nierenversagens Scheitern (15,4 µg/g bw Doxorubicin)7, 15.
  3. Den berechneten Betrag von Doxorubicin Lösung (2 µg/µL) in einem 37 ° C warmen Raum warm.
    Achtung: Doxorubicin ist schädlich, wenn geschluckt und können Krebs verursachen. Immer tragen Sie Handschuhe, wenn mit Doxorubicin arbeiten und vermeiden Sie jeden Kontakt mit der Haut.
  4. Vorausfüllen von der Spritze mit Doxorubicin Lösung bis der Markierungspunkt und die Waage auf NULL gesetzt. Füllen Sie die Spritze mit der Einspritzmenge und überprüfen Sie die Lautstärke durch Wiegen der Spritze.
  5. Betäuben Sie die Maus mit 5 Vol % Isofluran mit einem Vaporizer und Sauerstoff-Flow von 2 L/min tief.
    1. Verwenden Sie die Salbe nicht auf die Augen vor der Injektion. Der Bediener braucht einen klaren Blick auf die Augenhöhle für eine sichere und erfolgreiche retrobulbären Injektion durchführen.
    2. Bewertung des Anästhesie durch Pedal Reflex und ggf. Narkose Lieferung vor Beginn der Injektion.
  6. Platzieren Sie den Mauszeiger rechts seitlich liegen, mit dem Rücken, mit Blick auf den Körper des Fahrers und den Kopf mit Blick auf die Hand des Bedieners Injektion.
    Hinweis: Das Verfahren ist für Rechtshänder, beschrieben, für Linkshänder, die Durchführung der Injektion mit der linken Hand es einfacher ist, die Position und Injektion umgekehrt rechts nach links.
  7. Ragen Sie sorgfältig die Maus linken Augapfel aus der Augenhöhle durch sanften Druck auf die Haut, dorsalen und ventralen für das Auge.
  8. Punktion des linken retrobulbären Sinus vom inneren Augenwinkel (mediale palpebrale Kommissur). Vermeiden Sie den Kontakt mit dem Mouse´s Augapfel.
  9. Leicht kippen Sie die Spritze und injizieren Sie gesamten Datenträgers in einem Rutsch zu. Stellen Sie sicher, dass die Lautstärke ohne Widerstand und ohne irgendwelche Anzeichen von Extravasation wie Exopthalmus oder Leckage aus der Einstichstelle injiziert wird.
  10. Da Doxorubicin eine hochgiftige Substanz ist, überprüfen Sie Wohlbefinden mindestens einmal täglich mit einem Notenblatt nach Morton und Griffiths Et al. 16 und Zahlen besondere Aufmerksamkeit auf die Injektionsstelle. Wenn keine Anzeichen einer Extravasation Exopthalmus mögen, beeinträchtigt Augenlid Schließung oder irgendwelche Anzeichen von Nekrose wie Schwellungen oder Haut Läsionen auftreten nach der Injektion oder in den folgenden Tagen sollte die Maus eingeschläfert werden.

2. Implantation von retard-Pellets mit Aprotinin

  1. Pellets mit der gewünschten Dosis pro Tag und Freigabe Dauer im Voraus zu bestellen. Im Falle von Aprotinin wählen Sie eine Dosis von 1 mg pro Tag über 10 Tage freigegeben werden.
    Hinweis: In dieser Studie die Aprotinin Pellets enthalten eine Dosis von 10 mg.
    1. Speichern Sie die Pellets unter trockenen Bedingungen und vermeiden Sie jede Exposition gegenüber Feuchtigkeit.
  2. Bereiten Sie erforderliche Elemente für die Chirurgie, einschließlich Haar Schere, Haut Vorbereitung Schere, Skalpell, chirurgische Pinzette, zwei Paare von Gewebe Pinzette, Nadelhalter und 15 cm Monofile Faden nicht resorbierbaren vor.
    1. Sterilisieren Sie die Instrumente mit einem Wärme-Sterilisator für 5 min. bei 240 ° C. Vor der Verwendung der Instrumente, für 5 min warten Sie, bis sie Zimmertemperatur erreicht.
      1. Vermeiden Sie den Kontakt von sterilisierten Instrument Tipps unsterilen Oberflächen.
      2. Hautverbrennungen zu vermeiden, indem Sie heiße Instrumente.
  3. Betäuben Sie Maus mit Isofluran 5 Vol-% gefolgt von 1,5 vol% mit einem Vaporizer und Sauerstoff Flow von 2 L/min.
  4. Platzieren Sie den Mauszeiger in Bauchlage auf einem wärmenden Gerät, bedeckt mit einer Schicht aus Gaze zur Vermeidung von thermischer Verletzungen zur Maus. Oberflächentemperatur beträgt ca. 37 ° C.
  5. Schützen Sie die Augen mit Salbe.
  6. Entfernen Sie die Haare in der Mitte zurück in eine Fläche von etwa 0,5 cm2 mit einer Schere oder einem haarschneidegerät und Desinfizieren Sie die unbehaarte Haut mit einem Desinfektionsmittel für hautdesinfektion geeignet. Entfernen Sie so weniger Haare wie möglich, so es immer schwieriger für die Maus bleibt, um die Wunde zu erreichen und Thread später endet und Körpertemperatur zu halten.
  7. Einzuschneiden Sie die unbehaarte Haut mit einem Skalpell in Cranio-Caudale Richtung in einer Länge von etwa 5 mm. Vorbereiten einer linken seitlichen Tasche von ca. 1 cm tief in das subkutane Bindegewebe mit einer stumpfen Zubereitung.
    1. Bewertung des Anästhesie durch Pedal Reflex und ggf. Narkose Lieferung vor Beginn der Operation.
  8. Einsetzen Sie eine 10-Tage-Version Pellet in bereit linken seitlichen Beutels Pinzette steril Gewebe. Lassen Sie die Kugel an der Unterseite des Beutels in eine planare Position.
    1. Vermeiden Sie jeden Kontakt des Pellet-Flüssigkeit und Feuchtigkeit bis in die vorbereitete Tasche platziert.
  9. Schließen Sie die Haut mit 2-3 Fäden. Lassen Sie nur sehr kurze Fadenenden machen es schwieriger für die Maus, um die Nähte durch nagen zu öffnen.
  10. Legen Sie die Mäuse einzeln, postoperative Stress zu reduzieren und Öffnen der Nähte durch nagen zu verhindern. Halten Sie die Maustaste im Blick, bis es nach der Narkose ausreichend Bewusstsein wiedererlangt hat.
    Hinweis: Es gibt keine Notwendigkeit für die postoperative Schmerztherapie da dieser Eingriff ohne irgendwelche Anzeichen von Unbehagen oder Schmerzen gut vertragen wird. Alternativ empfehlen wir topische Analgetika, z. B. einen Tropfen Bupivacain auf den Einschnitt vor der Schließung, die bis zu 8 h Analgesie bieten würde.

3. Bewertung für Modell Induktion, Zeichen des Nephrotischen Syndroms und Wohlbefinden

  1. Sammeln Sie Morgenurin (08:00) in einer Reaktion Tasse (1,5 mL) täglich ab dem Tag der Injektion durch das Massieren der Blase.
    1. Proteinurie mithilfe von Bradford Protein Assay zu messen und zu Kreatinin normalisieren.
      Hinweis: Für die Induktion eines nephrotischen Syndroms, Proteinurie sollte eine Schwelle von 120 mg/mg Kreatinin zwischen 7. und 10. Tag nach der Injektion von Doxorubicin erreichen.
  2. Suchen Sie nach der Entwicklung von Aszites. Suchen Sie nach Erhöhung der Bauch Umfang oder überhängende Flanken.
  3. Wiegen Sie die Maus, die Lebensmittel-Pellets und die Trinkflasche am Morgen (08:00) jeden Tag.
  4. Überprüfen Sie Wohlbefinden mindestens einmal täglich mit einem Notenblatt nach Morton und Griffiths Et Al. 16

4. Messung der Harn Serin Protease mit einem chromogenen Assay

  1. Bereiten Sie Substrat funktionierende Lösung durch Zugabe von 15 mL sterile Phosphat gepufferte Kochsalzlösung (PBS), eine Flasche von 25 mg lyophilisiert chromogenen Substrat S-2251, mit einer Konzentration von 2 mM. Auflösen von Aprotinin in PBS, eine Aprotinin-Lösung mit einer Konzentration von 2 mg/mL zu erhalten.
    1. Speichern von vorbereiteten Lösungen bei-20 ° C. Dies verlangsamt deutlich den Auto-Abbau von S-2251. Verwenden Sie alte Lösungen nicht mit einem starken Gelbton.
  2. Verwendung frisch zubereitet oder Substrat Arbeitslösung aufgetaut und in einer Wärmekammer 37 ° C warm.
  3. Urinproben bei Raumtemperatur Auftauen.
    1. Verhindern, dass Protease-Abbau durch wiederholtes Auftauen und Einfrieren zu vermeiden. Speichern von Urinproben bei-20 ° C.
  4. Verwenden Sie eine 96 Microwell-Platte für photometrische Messung geeignet. Fügen Sie 3 µL des unverdünnten Urin in jedem der zwei Brunnen hinzu und 50 µL Substratlösung arbeiten mit 3 µL PBS oder Aprotinin-Lösung in die Vertiefungen. Die Platte mit einer Versiegelung Platte abdecken.
  5. Inkubieren Sie die überdachte Microwell-Platte für 60 min in einer Wärmekammer 37 ° C.
  6. Messung die optische Dichte von jedem Bohrloch bei 450 nm mit einer Mikrotestplatte Reader.
  7. Nehmen Sie den Unterschied zwischen der OD ohne Aprotinin und mit Aprotinin als Harn Aprotinin-Sensitive Serin-Protease-Aktivität.
    Hinweis: Messung einer gekoppelten Probe mit und ohne Aprotinin erhöht Spezifität des Assays, da das Substrat auch durch andere Proteasen gespalten werden könnte, die keine pathophysiologische Rolle spielen.

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Ergebnisse

Nach der Induktion der Isoflurane Narkose wurde Doxorubicin rasch über den linken retrobulbären Sinus injiziert. Das gesamte Volumen von 7,25 µL/g bw injiziert wurde, ohne jeden Widerstand und Extravasation beweisen intravenöse Lage der Kanüle korrigieren. Die Maus schnell von Narkose erholt und hatte keine Wertminderung an jenem Tag und danach. Insbesondere gab es keine Anzeichen einer Beschädigung am linken Auge. Nach Doxorubicin Einspritzung, Nahrung und Flüssigkeit Einnahme sank in de...

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Diskussion

Hier zeigen wir, dass Doxorubicin Injektion mittels retrobulbären Sinus Injektion experimentelle Nephrotisches Syndrom bei 129S1/SvImJ Mäusen mit Proteinurie, Natrium-Retention, Hypoalbumenia und Hyperlipidämie induziert. Allerdings gibt es zwei kritische Fragen, die bei der Verwendung dieses Musters berücksichtigt werden müssen. Erstens die Modell-Induktion ist streng dosisabhängig und Abweichungen von Doxorubicin Dosis so klein wie 0,3 µg/g beeinflussen die Reaktion der Mäuse15. Wenn Sie mit ein...

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Offenlegungen

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Danksagungen

Diese Studie wurde unterstützt durch ein Stipendium der Deutschen Forschungsgemeinschaft (DFG, AR 1092/2-1).

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
supplies
BD Micro FINE + U-40 (0,30 mm x 8 mm)BD Deutschland GmbH, Heidelberg, GermanyPZN: 07468060Spritze
ETHILON*II (5/0, 16 mm, 3/8c, 45 cm)Johnson& Johnson Medical GmbH, Ethicon Deutschland, Norderstedt, Deutschland)EH7823Hsuture
NameCompanyKatalognummerComments
reagents>
aprotinin (6000 KIU/mg)LOXO, Heidelberg, DeutschlandCAS 9087-70-1
Bepanthen, Augen- und NasensalbeBayer Vital GmbH, Leverkusen, DeutschlandPZN: 1578681Salbe
Chromogenix S-2251HAEMOCHROM DIAGNOSTICA GmbH, Essen, Deutschland82 0332 39chromogenes Substrat
Doxorubicin (2,0 & Mikro; g/µ L)Cell Pharm, Bad Vilbel, DeutschlandCAS 25316-40-9Doxorubicin
Isofluran CP (1 mL/mL)CP-Pharma, Burgdorf, DeutschlandCAS 26675-46-7Isofluran-Pellets
mit matrixgesteuerter verzögerter Freisetzung (kundenspezifisch)Innovative Research of America, Sarasota, FLX-999Pellet
NameCompanyKatalognummerKommentare
equipment
ELx808 Absorbance Mikroplate ReaderBioTek, Bad Friedrichshall, DeutschlandELx808Mikroplatten-Reader
MICROSTERIL - 436B.M.S., Trescore Balneario, ItalienGAL/436Sterilisator
Hybridisierungsofen/ ShakerGE Healthcare UK Limited, Amersham LIFE SCIENCE, Little Chalfont, UKRPN 2511Wärmekammer
Thermo MAT Pro 10 W, 15x25 cm, Lucky ReptileImport Export Peter Hoch GmbH, Waldkirch, Deutschland61201Maus-Erwärmungsgerät

Referenzen

  1. Lee, V. W., Harris, D. C. Adriamycin nephropathy: a model of focal segmental glomerulosclerosis. Nephrology (Carlton). 16 (1), 30-38 (2011).
  2. Frenk, S., Antonowicz, I., Craig, J. M., Metcoff, J. Experimental nephrotic syndrome induced in rats by aminonucleoside; renal lesions and body electrolyte composition. Proc Soc Exp Biol Med. 89 (3), 424-427 (1955).
  3. Ichikawa, I., et al. Role for intrarenal mechanisms in the impaired salt excretion of experimental nephrotic syndrome. J Clin Invest. 71, (1983).
  4. Deschenes, G., Wittner, M., Stefano, A., Jounier, S., Doucet, A. Collecting duct is a site of sodium retention in PAN nephrosis: a rationale for amiloride therapy. J Am Soc Nephrol. 12 (3), 598-601 (2001).
  5. Lourdel, S., et al. Hyperaldosteronemia and activation of the epithelial sodium channel are not required for sodium retention in puromycin-induced nephrosis. J Am Soc Nephrol. 16 (12), 3642-3650 (2005).
  6. Seigneux, S., Kim, S. W., Hemmingsen, S. C., Frokiaer, J., Nielsen, S. Increased expression but not targeting of ENaC in adrenalectomized rats with PAN-induced nephrotic syndrome. Am J Physiol Renal Physiol. 291 (1), F208-F217 (2006).
  7. Artunc, F., et al. Serum- and glucocorticoid-inducible kinase 1 in doxorubicin-induced nephrotic syndrome. Am J Physiol Renal Physiol. 295 (6), F1624-F1634 (2008).
  8. Zheng, Z., et al. A Mendelian locus on chromosome 16 determines susceptibility to doxorubicin nephropathy in the mouse. Proc Natl Acad Sci U S A. 102 (7), 2502-2507 (2005).
  9. Kimura, M., et al. Interstrain differences in murine daunomycin-induced nephrosis. Nephron. 63 (2), 193-198 (1993).
  10. Wang, Y., Wang, Y. P., Tay, Y. C., Harris, D. C. Progressive adriamycin nephropathy in mice: sequence of histologic and immunohistochemical events. Kidney Int. 58 (4), 1797-1804 (2000).
  11. Svenningsen, P., et al. Plasmin in nephrotic urine activates the epithelial sodium channel. Journal of the American Society of Nephrology : JASN. 20 (2), 299-310 (2009).
  12. Passero, C. J., Hughey, R. P., Kleyman, T. R. New role for plasmin in sodium homeostasis. Curr Opin Nephrol Hypertens. 19 (1), 13-19 (2010).
  13. Bohnert, B. N., et al. Aprotinin prevents proteolytic epithelial sodium channel (ENaC) activation and volume retention in nephrotic syndrome. Kidney Int. 93 (1), 159-172 (2018).
  14. Pippin, J. W., et al. Inducible rodent models of acquired podocyte diseases. Am J Physiol Renal Physiol. 296 (2), F213-F229 (2009).
  15. Bohnert, B. N., et al. Impact of phosphorus restriction and vitamin D-substitution on secondary hyperparathyroidism in a proteinuric mouse model. Kidney Blood Press Res. 40 (2), 153-165 (2015).
  16. Morton, D. B., Griffiths, P. H. Guidelines on the recognition of pain, distress and discomfort in experimental animals and an hypothesis for assessment. Vet Rec. 116 (16), 431-436 (1985).
  17. Beath, S. M., et al. Plasma aprotinin concentrations during cardiac surgery: full- versus half-dose regimens. Anesth Analg. 91 (2), 257-264 (2000).
  18. Kanter, P. M., et al. Preclinical toxicology study of liposome encapsulated doxorubicin (TLC D-99): comparison with doxorubicin and empty liposomes in mice and dogs. In Vivo. 7 (1), 85-95 (1993).
  19. Ma, L. J., Fogo, A. B. Model of robust induction of glomerulosclerosis in mice: importance of genetic background. Kidney Int. 64 (1), 350-355 (2003).
  20. Kren, S., Hostetter, T. H. The course of the remnant kidney model in mice. Kidney Int. 56 (1), 333-337 (1999).
  21. Mizuno-Horikawa, Y., Mizuno, S., Tamura, S., Kurosawa, T. Advanced glomerulosclerosis is reversible in nephrotic mice. Biochem Biophys Res Commun. 284 (3), 707-713 (2001).
  22. Friberger, P. Chromogenic peptide substrates. Their use for the assay of factors in the fibrinolytic and the plasma kallikrein-kinin systems. Scand J Clin Lab Invest Suppl. 162, 1-298 (1982).
  23. Haerteis, S., et al. Plasma kallikrein activates the epithelial sodium channel in vitro but is not essential for volume retention in nephrotic mice. Acta Physiologica. , (2018).
  24. Schork, A., et al. Association of Plasminuria with Overhydration in Patients with CKD. Clin J Am Soc Nephrol. 11 (5), 761-769 (2016).

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Nachdrucke und Genehmigungen

Weitere Artikel entdecken

Doxorubicin-Injektionretrobulbärer Sinusurinäre Serinproteaseepithelialer NatriumkanalProteasurie-AssayNatriumretentionMausmodellchronische Nierenerkrankung
Induktion eines nephrotischen Syndroms bei Mäusen durch retrobulbären Injektion von Doxorubicin und Verhinderung von Volume Retention von verzögerter Freisetzung Aprotinin
Kontaktieren Sie uns
Der Bibliothek empfehlen

Datenschutz

Nutzungsbedingungen

Richtlinien

Urheberrecht © 2026 MyJoVE Corporation. Alle Rechte vorbehalten.