Hier präsentieren wir Ihnen ein Protokoll zur mündlichen Biofilmbildung auf Titan und Zirkonoxid Materialien für Zahnersatz Aufbauten, einschließlich der Analyse von Bakterienzellen Lebensfähigkeit und morphologische Eigenschaften zu bewerten. Der oralen Biofilm-Analyse dient eine in Situ -Modell mit mächtigen mikroskopiertechniken verbunden.
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Methodenartikel
Mündliche Biofilmbildung auf unterschiedlichen Materialien für Zahnimplantate
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Implantate und prothetischen Komponenten sind anfällig für bakterielle Kolonisation und Biofilmbildung. Die Verwendung von Materialien, die geringe mikrobielle Haftung bietet kann die Prävalenz und Fortschreiten der periimplantären Erkrankungen reduzieren. Angesichts der Mundmilieu Komplexität und oralen Biofilm Heterogenität, Mikroskopie, die Techniken benötigt werden, die eine Biofilm-Analyse der Oberflächen der Zähne und Dentalmaterialien aktivieren können. Dieser Artikel beschreibt eine Reihe von Protokollen für den Vergleich von mündlichen Biofilmbildung auf Titan und keramische Werkstoffe für prothetische Aufbauten sowie die Modalität in oralen Biofilmen Analysen auf morphologische und zellulärer Ebene umgesetzt. Das Modell in Situ , mündliche Biofilmbildung auf Titan und Zirkonoxid Materialien für Zahnersatz Widerlager zu bewerten, wie beschrieben in dieser Studie bietet eine befriedigende Erhaltung des Biofilms 48 h, so bekunden, methodische Angemessenheit. Multiphoton-Mikroskopie ermöglicht die Analyse eines Vertreters der Bereich des Biofilms auf der Testmaterialien gebildet. Darüber hinaus ermöglicht den Einsatz des Fluorophore und die Verarbeitung der Bilder multiphoton Mikroskopie mit die Analyse der bakteriellen Lebensfähigkeit in einer sehr heterogenen Bevölkerung von Mikroorganismen. Die Vorbereitung der biologischen Proben für Elektronenmikroskopie fördert die bauliche Erhaltung der Biofilm, Bilder mit guter Auflösung und keine Artefakte.
Einleitung
Bakterielle Biofilme sind komplex, funktionell und strukturell organisiert mikrobielle Gemeinschaften, gekennzeichnet durch eine Vielfalt an mikrobielle Spezies, die eine extrazelluläre, biologisch aktiven Polymer-Matrix1,2zu synthetisieren. Die bakterielle Adhäsion zu biotischen und abiotischen Oberflächen ist eine Formation von der erworbenen Häutchen, hauptsächlich bestehend aus Speichel Glykoproteine1,3,4vorangestellt. Schwache physikalisch-chemischen Wechselwirkungen zwischen Mikroorganismen und das Häutchen sind....
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Protokoll
Diese Studie wurde von der Institutional Review Board der School of Dentistry von Ribeirão Preto genehmigt, und die freiwilligen Teilnehmer unterzeichnete schriftliche Zustimmung (Prozess 2011.1.371.583).
1. die Biofilmbildung in Situ
-
Auswahl der Teilnehmer
- Wählen Sie anhand der folgenden Einschlusskriterien Patienten: ein gesunder Mensch mit einem vollständigen Gebiss und keine klinischen Anzeichen von Munderkrankungen.
- Patienten anhand der folgenden Ausschlusskriterien auszuschließen: Schwangerschaft, Stillzeit, Karies, Parodontitis oder Antibiotika-Behandlung in den letzten 3 Mona....
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Ergebnisse
Die Dichte Besiedlung des Biofilms nach 48 h in Situ Wachstum wurde in dieser Studie durch den Anteil des Bereichs auf den Titan und Zirkonoxid Datenträgern in Bezug auf die gescannten Gesamtfläche der Probe mit multiphoton Mikroskopie (kolonisierten vertreten. 26.64 mm2). Abbildung 2 stellt die bakterielle Besiedlung Dichte auf der Oberfläche die 3 geprüften Materialien. Eine höhere Dichte von Biofilm wurde beobachtet, auf den Oberflächen.......
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Diskussion
In dieser Studie beschriebene Protokoll wurde entwickelt, um die Biofilmbildung auf Titan und Zirkonoxid Materialien für prothetische Aufbauten, einschließlich der Analyse der Bakterienzelle Lebensfähigkeit und morphologische Eigenschaften zu bewerten. Um dies zu erreichen, wurde eine in Situ -Modell der Biofilmbildung entwickelt, bestehend aus einer intraoralen Geräts in der Lage, Proben von der Testmaterialien unterzubringen und halten sie die dynamische Mundmilieu für 48 h ausgesetzt. Das Gerät wurde als bequ.......
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Offenlegungen
Die Autoren haben nichts preisgeben.
Danksagungen
Die Autoren danken José Augusto Maulin Mikroskopie Multiuser Laboratory (School of Medicine der Ribeirão Preto), für seine großzügige Unterstützung bei der EDS und SEM Analysen und Hermano Teixeira Machado für seine großzügige technische Hilfe bei der video-Ausgabe.
....Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Hydrogum 5 | Zhermack Dental | C302070 | |
| Durone IV | Dentsply | 17130500002 | |
| NiCr Draht | Morelli | 55.01.070 | |
| JET autopolymerisierendes Acrylglas | Clá ssico | ||
| Zahnwachs | Clá ssico | ||
| Druckbehälter | Essencedental | ||
| Schleifpapiere Körnung 600 | NORTON | T216 | |
| Schleifpapiere 1200 Körnung | NORTON | T401 | |
| Schleifpapiere 2000 Körnung | NORTON | T402 | |
| Metallographische Poliermaschine | Arotec | ||
| Isopropylalkohol | SIGMA-ALDRICH | W292907 | |
| Schmelzklebstoff | TECSIL | PAH M20017 | |
| Filmtracer LIVE/DEAD Biofilm Viability Kit | Invitrogen | L10316 | |
| Pipettenspitzen, 10 & Mikro; L | KASVI | K8-10 | |
| Pipettenspitzen, 1.000 & Mikro; L | KASVI | K8-1000B | |
| 24-Well-Platte | KASVI | K12-024 | |
| Glasbodenschale | Thermo Scientific | 150680 | |
| AxioObserver inverses Mikroskop | ZEISS | ||
| Chameleon Vision II Laser | Kohärentes | ||
| Objektiv EC Plan-Neofluar 40x/1.30 Öl DIC | ZEISS | 440452-9903-000 | |
| SDD-Sensoren - X-Max 20mm² | Oxford Instruments | ||
| Glutaraldehyd-Lösung | SIGMA-ALDRICH | G5882 | |
| Natriumcacodylat-Puffer | SIGMA-ALDRICH | 97068 | |
| Osmiumtetroxid | SIGMA-ALDRICH | 201030 | |
| Na2HPO4 | SIGMA-ALDRICH | S9638 | Wird zur Herstellung von phosphatgepufferter Kochsalzlösung |
| verwendet KH2PO4 | SIGMA-ALDRICH | P9791 | |
| NaCl | MERK | 1.06404 | |
| Kcl | SIGMA-ALDRICH | P9333 | |
| Ethanol absolut für die Analyse EMSURE | MERK | 1.00983 | |
| CPD 030 Critical Point Dryer | BAL-TEC | ||
| JSM-6610 Serie Rasterelektronenmikroskop | JEOL | ||
| SCD 050 Sputter Coater | BAL-TEC |
Referenzen
- Do, T., Devine, D., Marsh, P. D. Oral biofilms: molecular analysis, challenges, and future prospects in dental diagnostics. Clinical, Cosmetic and Investigational Dentistry. 5, 11-19 (2013).
- Samaranayake, L., Matsubara, V. H.
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Nachdrucke und Genehmigungen
