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Methodenartikel

Ein vielseitiges Modell schwer Tick Befall an Kaninchen, Labor

11.2K Aufrufe

DOI:

10.3791/57994

6. Oktober 2018

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Wir haben eine einfache und vielseitige System um harten Zecken ernähren sich von Labor Kaninchen entwickelt. Unsere nicht mühsam Protokoll leicht zugängliche Materialien verwendet und kann je nach den Anforderungen der verschiedenen experimentellen Einstellungen angepasst werden. Die Methode ermöglicht die komfortable Überwachung bzw. Stichprobe von Zecken während der gesamten Dauer der Fütterung.

Zusammenfassung

Der Einsatz von lebenden Tieren in der Zecke Forschung ist entscheidend für eine Vielzahl von experimentellen Zwecken, einschließlich der Wartung der harten Tick Kolonien im Labor. In Zecken alle Entwicklungsstadien (außer Ei) sind Hematophagous und erwerben eine Blutmahlzeit, wenn ihre Wirbeltier Wirte zugeordnet ist unerlässlich für den erfolgreichen Abschluss ihres Lebenszyklus. Hier zeigen wir Ihnen eine einfache Methode, die leicht öffenbare Kapseln verwendet für die Fütterung von harten Zecken auf Kaninchen. Die Vorteile der vorgeschlagenen Methode sind seine Einfachheit, kurzer Dauer und vor allem vielseitige Anpassung an die Bedürfnisse der spezifischen experimentellen Anforderungen. Die Methode ermöglicht die Verwendung von mehreren Industrie-und Handelskammern (verschiedene Größen) auf das gleiche Tier, das Fütterung mehrerer Phasen oder verschiedenen Versuchsgruppen senken die insgesamt tierische Anforderung erlaubt. Nicht reizend und leicht zugänglichen Materialien minimiert Beschwerden an die Tiere, die leicht erholt von einem Experiment und angeboten für Annahme oder wiederverwendet werden können wenn das ethische Protokoll erlaubt.

Einleitung

Die harten Zecken (Ixodidae) sind bekannt als langsame Fütterung Arthropoden und aufsetzbar auf einem Host für mehrere Tage oder Wochen, je nach Tierart und Entwicklungs-Stufe1. Diese obligatorische Hematophagous Arthropoden sind Vektoren einer Vielzahl pathogener Erreger, wie Bakterien, Protozoen und Viren, und so stellen eine erhebliche Gefahr für Mensch und Tier1. Wenn Tick Biologie studieren oder Bewertung neuer Methoden, die Einrichtung eines effektiven Häckchens Fütterungssystem ist entscheidend, um effektiv die Experimente zu entwerfen und erreichen die Ziel(e) der Studie. Vor kurzem mehrere künstliche Tick Fütter....

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Protokoll

Hinweis: In dieser Studie Kaninchen waren gepflegt in standardkäfige mit Lebensmitteln und Wasser angeboten Ad Libitum an die französische Agentur für Food, Umwelt- und Arbeitsschutz & Sicherheit (ANSES) akkreditiert Tierhaltungen in Maisons-Alfort, Frankreich. Tiere wurden zweimal täglich durch zwei erfahrene Techniker für abnorme Hautreaktionen, gesundheitliche Probleme oder Komplikationen beobachtet. Die Versuchsraum wurde gesichert durch die Gestaltung des Innenraum des Einganges mit doppelseitigem Klebeband um versehentliche Entweichen von Zecken zu vermeiden. Die Methode funktioniert am besten, wenn zwei Menschen als Team arbeiten, aber es möglich ist, ....

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Ergebnisse

Hier schlagen wir zum ersten Mal eine detaillierte Schritt-für-Schritt-Methode der harten Tick Fütterung aus EVA-Schaum Kapseln angewendet um eine rasierte Kaninchen Rücken, abgedeckt durch eine Jacke (Abbildung 1 und Abbildung 2). Dieses Protokoll eignet sich für verschiedene Arten von Experimenten, wenn unterschiedliche Tick Gruppen auf demselben Host erforderlich sind und können auch für massenhafte Aufzucht v.......

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Diskussion

Der wichtigste Schritt in diesem gesamten Protokoll soll die Kapsel fest auf die rasierte Haut kleben. Aus diesem Grund ist konstanter Druck für mindestens 3 Minuten kritisch, besonders an den Ecken. Wenn die Zecken in die Kapsel zu impfen, ist es wichtig, diese anzuwenden tief in die gegenüberliegende Ecke vom offenen zum Zecke während der Versiegelung zu vermeiden. Bei der Planung der Experimente ist darauf zu achten, dass die Jacke um Schäden zu vermeiden, Kauen oder kratzen die Kapseln abgedeckt sind. Stellen Sie sic.......

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Offenlegungen

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Danksagungen

Wir anerkennen die technische Unterstützung von Evelyne Le Naour, Französisch nationalen Institut für landwirtschaftliche Forschung (INRA), Alain Bernier (INRA) und Océane Le Bidel (ANSES). Consuelo Almazán wurde durch ein Stipendium aus dem Labor of Excellence, Integrative Biology of Emerging Infectious Diseases (LabEx IBEID), Pasteur-Institut unterstützt. Die Hasen und Schafe wurden von ANSES gekauft. Teil dieser Arbeit wurde von der National Institutes of Health Grant RO1AI090062, Y. Park finanziert. Dr. Jeffrey L. Blair ist anerkannt für die Überprüfung der Handschrift.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Neuseeländische Kaninchen (2,5-3,5 kg)Charles River Stamm Code 571
Rambouillet SchafLokaler Anbieter - zeckenfreier BauernhofWeiblich 6 Monate alt
EVA-Schaum 5 mm dick  Cosplay ShopEVA-PE451kg (950mm x 450mm)10 mm PE45 kg Schaumstoff aus dem Cosplay Shop kann für die große erwachsene Zeckenart verwendet werden
Schaumstoffplatte 9" X 12" 6 mm-WeißAmazonFOAMSHT6-206 mm-EVA Schaumstoff kann über Amazon bestellt werden als Alternative zu dem Schaumstoff aus dem Cosplay Shop
Volle Länge Kaninchenjacken Harvard Apparatus, Inc. 620077- mittel, 6270078 - groß 
Ungiftiger Latexkleber  TränenflickerStoff & Leder Kleber
Schlauchförmig Baumwolle orthopädisch glatt rechtsBSN Medical9076 (12-15 cm breit)
Moskitonetz Loisirs CreatifsSehr feines Filter-Nylon-Mesh-GewebeJedes Moskitonetz oder Vorhangmaterial mit einer Maschenöffnung von weniger als 50 μm; m geeignet ist.
Leukoplast BSN medical S.A.SLF 72361-02
Klebeband mit KlettverschlussAIEX StoreAIEX 39,37 Fuß/12m Klettband mit selbstklebender Klebebandrolle, 20 mm Breite, weiße FarbeFullfiled by Amazon
Schnell trocknender Kleber  Fixtout Sekundenkleber

Referenzen

  1. Sonenshine, D. E., Roe, M. Ticks, People and Animals. Biology of Ticks, Vol I. , Oxford University Press. (2014).
  2. Kröber, T., Guerin, P. M. In vitro feeding assays for hard ticks. Trends in Parasitology. 23 (9), 445-449 (2007).
  3. Bonnet, S., Jouglin, M., Malandrin, L., Becker, C., Agoulon, A., L'hostis, M., Chauvin, A.

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Nachdrucke und Genehmigungen

Tags

EVA-SchaumkapselZeckenfütterungsmethodeWirt-Vektor-InteraktionZeckenlebenszyklusProtokoll zur TiererholungMehrkammer-SystemKapselbefestigungstechnikZeckensammlungsmethode