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Methodenartikel

Einsatz von unter Druck stehenden Heißwasserextraktion (PHWE), Naturstoffchemie im Grundstudium Labor zu erkunden

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DOI:

10.3791/58195

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7. November 2018

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1School of Natural Sciences - Chemistry, University of Tasmania, 2School of Chemistry, The University of Sydney

* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Hier beschäftigen wir eine heißes Wasser unter Druck (PHWE) Extraktionsmethode, die was eine unveränderte Haushalts Espressomaschine nutzt um Studenten Naturstoffchemie im Labor näher zu bringen. Zwei Experimente werden vorgestellt: PHWE Eugenol und Acetyleugenol aus Nelken und PHWE Seselin und (+)-Epoxysuberosin von der australischen Pflanze Correa Reflexa.

Zusammenfassung

Eine neu entwickelte Hot-Druckwasser-Extraktion (PHWE)-Methode, die nutzt eine unveränderte Haushalts Espressomaschine um Naturprodukte Forschung zu erleichtern hat auch Anwendungen als wirksame Lehrmittel gefunden. Insbesondere wurde diese Technik zur zweiten und dritten Jahr Studenten Aspekte der Naturstoffchemie im Labor vorstellen. In diesem Bericht werden zwei Experimente vorgestellt: das PHWE Eugenol und Acetyleugenol aus Nelken und PHWE Seselin und (+)-Epoxysuberosin von der australischen endemische Pflanzenarten Correa Reflexa. Durch den Einsatz von PHWE in diesen Experimenten, erhielt die rohen Nelke-Extrakt, Eugenol und Acetyleugenol, bereichert in 4-9 % w/w aus Nelken vom zweiten Jahr Studenten und Seselin und (+)-Epoxysuberosin wurden Renditen von bis zu 1,1 % w/w und 0,9 % w/w aus isoliert C. Reflexa durch dritte Studienjahr. Die ehemalige Übung wurde entwickelt als Ersatz für das traditionelle Dampf-Destillation-Experiment bietet eine Einführung in die Extraktion und Trennung Techniken, während diese Tätigkeit geführte Untersuchung Lehrmethoden in einer Bemühung vorgestellten zu simulieren Naturprodukte Bioprospektion. Dies ist in erster Linie auf die schnelle Natur dieser PHWE Technik im Vergleich zu traditionellen Extraktionsmethoden, die oft unvereinbar mit der Zeitknappheit Bachelor Laborexperimente zugeordnet sind. Diese schnelle und praktische PHWE-Methode kann verwendet werden, um verschiedene Klassen von organischen Molekülen aus einer Reihe von Pflanzenarten effizient zu isolieren. Auch die Komplementarität dieser Technik im Vergleich zu herkömmlichen Methoden zuvor nachgewiesen.

Einleitung

Die Isolierung und Identifizierung von Naturprodukten sind von grundlegender Bedeutung für die wissenschaftliche Gemeinschaft und die Gesellschaft im Allgemeinen. 1 Bioprospektion, die Suche nach wertvollen organischen Molekülen in der Natur, bleibt ein unverzichtbarer Prozess bei der Entdeckung der neuen Droge führt und potenzielle Therapeutika. Es wird geschätzt, dass ~ 75 % der alle zugelassenen niedermolekulare Medikamente wurden von 1981 bis 2014, Naturprodukte, natürliche Produkt abgeleitet oder natürliche Produkt inspirierte. 1 im übrigen Naturprodukte besitzen enorme strukturelle und chemische Vielfalt. Aus diesem Grund stellen sie auch wertvolle chemische Gerüste, die direkt in der organischen Synthese oder bei der Entwicklung von chiralen Liganden und Katalysatoren verwendet werden können. 2 , 3

Traditionell wurden relativ zeitintensive Verfahren wie Mazeration, Soxhlet-Extraktion und Wasserdampf-Destillation die Hauptstütze der Forschung konzentrierte sich auf die Isolierung von Sekundärmetaboliten aus Pflanzen. 4 modernere Extraktionstechniken, einschließlich beschleunigte Lösemittelextraktion konzentrierten sich auf die Extraktion verkürzen und Schaffung grüner Protokolle. 4 , 5 im Jahr 2015 wurde eine Originalmethode heißes Druckwasser-Extraktion (PHWE) berichtet. 6 diese Technik verwendet eine unveränderte Haushalt Espresso-Maschine, die schnelle und vor allem effiziente Gewinnung von Shikimic Säure aus Sternanis zu erleichtern. Espresso-Maschinen wurden speziell entworfen und entwickelt, um organische Moleküle aus entsprechend gemahlenen Kaffeebohnen zu extrahieren. Dieser, diese Instrumente Wärme Wasser bei Temperaturen bis zu 96 ° C und bei Drücken von in der Regel 9 Bar zu erreichen. 7 mit diesem im Verstand ist es vielleicht nicht verwunderlich, dass Espressomaschinen genutzt werden können, um effizient Naturprodukte aus einer Palette von Pflanzenmaterial extrahieren.

Nachfolgende Studien mit einer Vielzahl von terrestrischen Pflanzen zeigten die Kapazität dieser PHWE Technik effizient Naturprodukte in einem relativ breiten Polarität zu extrahieren. 6 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14 , 15 im übrigen waren Verbindungen mit etwas empfindlich Funktionsgruppen wie Aldehyde, Epoxide, Glykoside und potenziell Epimerizable Stereogenic mitten durch die Extraktion in der Regel unberührt. Die Komplementarität dieser Technik im Vergleich zu herkömmlichen Methoden wurde ebenfalls nachgewiesen. 12 , 16 das PHWE Methode wurde auch eingesetzt, um Multi-Gramm-Mengen von natürlichen Produkten, die verwendet wurden, um neuartige Naturprodukt Derivate vorzubereiten und in komplexen Moleküls Synthese allgemein zu isolieren. 8 , 11 , 17

Es wurde festgestellt, dass diese neue PHWE Methode als nützliche Lehrmittel dienen könnte, die im Grundstudium Labor integriert werden konnte. Dies ist in erster Linie auf die schnelle Natur dieser Technik im Vergleich zu traditionellen Extraktionsmethoden, die oft unvereinbar mit der Zeitknappheit Bachelor Laborexperimente zugeordnet sind. Folglich, verdrängt diese Technik der traditionellen Bachelor Chemie-Labor-Experiment konzentrierte sich auf die Gewinnung von Eugenol aus Nelken mit Dampf-Destillation an der University of Tasmania. 9 , 18 seit dieser Zeit Variationen dieses Experiments angenommen von anderen Universitäten und eine modifizierte Experiment mit Schwerpunkt auf das PHWE Knoblauchzehen nun Funktionen im Bachelor Chemie-Labor-Programm an der University of Sydney (vide infra ).

Um die Zweckmäßigkeit und Durchführbarkeit der Einsatz dieser neuen PHWE Ansatzes für Unterrichtszwecke zu demonstrieren, sind zwei Protokolle im Rahmen dieser Studie präsentiert. Der erste Teil dieses Berichts unterstreicht ein Experiment auf das PHWE Eugenol und Acetyleugenol aus Nelken ist Teil des zweiten Studienjahres Bachelor Labor-Programms an der University of Sydney (Abbildung 1). Dieses Experiment dient der Naturstoffchemie Studenten vorzustellen, während grundlegende praktische Fähigkeiten zu entwickeln. Der zweite Teil bietet ein Experiment auf das PHWE der australischen endemische Pflanzenarten Correa Reflexa ist Teil des Programms dritten Studienjahr Bachelor Labor an der University of Tasmania (Abbildung 2). Dieses Experiment soll Naturprodukte Bioprospektion zu simulieren und Kern-Labor-Techniken zu verstärken. 11

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Protokoll

Hinweis: Es ist ratsam, dass alle Eingriffe in einem Abzug durchgeführt werden. Studenten tragen geeigneten persönlichen Schutzausrüstung zu allen Zeiten im Labor und die Sicherheitsdatenblätter (SDB) zugeordnete jedes Reagens müssen vor Gebrauch konsultiert werden.

1. PHWE Nelken: Isolation von Eugenol und Acetyleugenol

  1. Gewinnung von Eugenol und Acetyleugenol aus Nelken
    1. Legen Sie grob gemahlene Nelken (12,5 g) in einen 250-mL-Becherglas.
    2. Die Knoblauchzehe schleift Sand (12,5 g) hinzufügen und gut verrühren.
    3. Sammeln Sie ein Siebträger (Probenraum) zu und laden Sie den Korb mit dem gesamten Nelke-Sand-Gemisch. Die Probe mit dem Stopfer leicht zu komprimieren.
      Hinweis: Die Mischung nicht zu viel komprimieren oder Flüssigkeit fließt nicht durch.
    4. Positionieren Sie den Filterhalter in der Espresso-Maschine und platzieren Sie eine saubere 250-mL-Becherglas darunter zu. Fügen Sie eine 30 % Ethanol/H2O Lösung in den Wassertank der Espressomaschine, wenn es weniger als halb voll ist.
    5. Verwenden Sie die Espresso-Maschine, um 100 mL des Extrakts zu sammeln.
      Hinweis: Ein Kursleiter wenden der Maschine scheint verstopft werden.
    6. Lassen Sie den Filterhalter tropft zu beenden und entfernen sie dann aus der Espresso-Maschine.
      Achtung: Die schleift und Metall Umgebung wird heiß.
    7. Mit einem Spatel, die Knoblauchzehe schleift aus dem Siebträger entfernen und entsorgen in den Mülleimer.
    8. Spülen Sie die restlichen Feststoffe aus den Filterhalter mit H2O unter einem Wasserhahn in der Spüle und wieder für die nächste Person zu verwenden.
    9. Cool die Knoblauchzehe extrahieren in ein Eisbad, bis die Temperatur auf mindestens 30 ° c reduziert hat
    10. Legen Sie den Extrakt in einen 250-mL separatory Trichter, geben Sie 30 mL Hexan zu und schütteln Sie leicht.
    11. Ort der Scheidetrichter in ein Klemmring auf ein Stativ montiert und ermöglichen die wässrigen und organische Schichten zu trennen, dann sammeln die wässrige (Unterschicht) wieder in der 250-mL-Becherglas.
      Hinweis: Es dauert 10 Minuten für die Schichten zu trennen. Studierende sollten Lösungsmittel Optimierung der TLCs während des Wartens auf die erste Trennung auftreten (siehe Schritt 1.2) durchzuführen.
    12. Übertragen Sie die organische (oben) Schicht (enthält das Produkt) in eine saubere 250 mL konische Kolben, und gießen Sie dann die Bodenschicht (wässrigen) zurück in den separatory Trichter.
    13. Extrahieren Sie die wässrige Schicht weitere zwei Mal mit Hexan (2 x 30 mL).
    14. Kombinieren Sie die organische (oben) Schichten in die gleiche Flasche nach jeder Extraktion.
    15. Gießen Sie nach der dritten flüssig-flüssig-Extraktion den kombinierten organischen Extrakt in den separatory Trichter und waschen mit 100 mL H2O durch kräftig schütteln. Bio (Deckschicht) in einem sauberen 250 mL konische Kolben sammeln und trocknen durch Hinzufügen von MgSO4 und wirbeln die Küvette.
    16. Filtern Sie die daraus resultierenden Mischung durch geriffelte Filterpapier in einem Glastrichter in einem vorgewogene 250mL Rundboden Kolben enthalten.
      Hinweis: Der feste Rückstand (hydratisiert MgSO4) kann im Abfall entsorgt werden.
    17. Verdunstet das Lösungsmittel (Hexan) aus das gesammelte Filtrat mit einem Drehverdampfer (Bad Wassertemperatur: 60 ° C, Vakuum-Druck: 350 Mbar) und erneut wiegen die Flasche enthält das resultierende Öl.
  2. Optimierung der Lösungsmittelsystem Dünnschichtchromatographie (TLC)
    Hinweis: Als eine Gruppe Studenten zugeordnet werden ein Lösungsmittelsystem aus 100:0 Aceton: Cyclohexan 0:100 Aceton: Cyclohexan vom Kursleiter, das Verhältnis zu identifizieren, die die maximale Auflösung von Eugenol aus Acetyleugenol bietet.
    1. Erhalten Sie eine TLC-Referenzlösung reine Eugenol und Acetyleugenol.
      Hinweis: Die erforderlichen TLC Referenzlösungen von reinen Eugenol und Acetyleugenol wurden von Laboranten vor des Versuches vorbereitet.
    2. Markieren Sie auf einem Teller TLC eine Basislinie ~1.5 cm über dem Boden mit einem weichen Bleistift. Markieren Sie drei gleichmäßig verteilte Punkte.
    3. Verwenden Sie ein TLC-Spotter, um einen Tropfen des reinen Eugenol TLC Referenzlösung einspurig, ein Ort der reinen Acetyleugenol TLC Referenzlösung auf der dritten Spur und ein Ort des jeweils in der zweiten Spur (Co Ort) zu erkennen.
    4. Überprüfen Sie das Vorhandensein von Eugenol und Acetyleugenol auf die TLC Platte durch Anzeigen der Platte unter UV-Licht (254 nm) in der TLC Kabinett anzeigen.
      Hinweis: Es sollte kleine (1-2 mm breit) schwarze Flecken auf der Platte, wo die TLC Referenzlösungen entdeckt wurden. Gibt es keine Flecken oder Flecken, schwache, wenden Sie eine andere Stelle der TLC-Lösung bis ein schwarzen Fleck unter UV-Licht beobachtet wird.
    5. Einem sauberen, trockenen TLC Glas 10 mL der zugewiesenen Lösungsmittelgemisches hinzufügen.
      Hinweis: Sicherstellen Sie, dass die Lösungsmittel Höhe in das Glas ~ 1 cm nicht überschreitet.
    6. Mit einer Pinzette, platzieren Sie die vorbereitete TLC Platte in das TLC-Glas. Schließen Sie den Deckel des Glases.
      Hinweis: Das Lösungsmittel muss unterhalb der Grundlinie der TLC Platte liegen.
    7. Lassen Sie das Lösungsmittel, die TLC Platte zu reisen. Sobald das Lösungsmittel ~ 1 cm vom oberen Rand der Platte ist, die TLC Platte aus dem Glas mit einer Pinzette zu entfernen und die Linie der Lösungsmittel Front mit einem Bleistift markieren.
    8. Ermöglichen die Lösemittel verdunsten von TLC Platte (~ 1 min) dann einen Überblick über die TLC Platte unter UV-Licht (254 nm). Kreisen Sie mit einem Bleistift die schwarzen Flecken auf die TLC Platte beobachtet.
    9. Berechnen Sie die Aufbewahrung Faktor (Rf) Eugenol und Acetyleugenol dividiert die zurückgelegte Strecke durch die Verbindung von der zurückgelegten Strecke durch das Lösungsmittel.
    10. Berechnen Sie die Differenz zwischen der R-f -Werte für Eugenol und Acetyleugenol (ΔRf).
    11. Teilen Sie die Ergebnisse mit dem Rest der Klasse. Zeichnen Sie die Aufbewahrung Werte von anderen Studenten mit anderen Lösungsmittel Verhältnissen übernommen.
    12. Ermitteln Sie, welche Lösungsmittelsystem beste rohe Eugenol Lösung und anschliessende Reinigungsschritte zu analysieren.
      Hinweis: Das beste Lösungsmittel TLC-Verhältnis bieten die größte Trennung zwischen Eugenol und Acetyleugenol mit der größten ΔR-f -Wert bezeichnet. Wenn ΔRf gegen Lösungsmittel Zusammensetzung gezeichnet wird, sollte der Graph eine Glockenkurve ähneln.
  3. Trennung von Eugenol und Acetyleugenol durch flüssig-flüssig-Extraktion
    1. Die grobe Eugenol-haltiger Extrakt aus Schritt 1.1.17 Hexan (10 mL) hinzu, und füllen Sie die folgenden Lösung in einen 250-mL separatory Trichter.
    2. Spülen Sie den Rundboden-Kolben mit Hexan (10 mL) und fügen Sie diese an den separatory Trichter.
    3. Extrahieren Sie die Hexan Lösung mit 3 M wässriger NaOH (2 x 25 mL) über flüssig-flüssig-Extraktion. Sammle und kombiniere die wässrige unteren Schichten in einem konischen 250-mL-Kolben aus jeder Extraktion. Die organische Schicht in einem 50 mL konische Kolben sammeln und trocknen durch Hinzufügen von MgSO4 und wirbeln die Flasche.
      Achtung: NaOH ist ätzend. Vermeiden Sie den Kontakt mit der Haut.
      Hinweis: Acetyleugenol bleibt in der organischen Schicht, während Eugenol jetzt in den alkalischen wässrigen Extrakt (unteren Schichten ist).
    4. Behalten die organische Schicht (organische Lösung A) für die spätere Analyse der TLC.
    5. Wirbeln Sie die konischen Kolben, der die alkalische wässrige Fraktion aus Schritt 1.3.3 in ein Eis-Wasserbad enthält und dazugeben Sie 10 M wässrige HCl langsam, bis eine weiße Emulsion gebildet wird; Überprüfen Sie die Säure mit Kongo-rot Papier, mit einer Pipette einen Tropfen der Lösung auf pH-Papier übertragen (es sollte blau).
      Achtung: HCl ist ätzend. Vermeiden Sie den Kontakt mit der Haut. Zugabe von HCl kann kräftig sprudeln, HCl sollte hinzugefügt werden, sorgfältig, den konischen Kolben auf dem Eis zu halten.
      Hinweis: Insgesamt 20-30 mL HCl (10 M von einer wässrigen Lösung) wird erforderlich sein.
    6. Extrahieren Sie die milchige wässrige Emulsion mit Hexan (2 x 30 mL), mit flüssig-flüssig-Extraktion in einer 250 mL Flasche zu trennen. Stellen Sie sicher, dass die Temperatur des wässrigen Extraktes bei Raumtemperatur oder unten vor dem Hinzufügen der Hexan. Kombinieren Sie die zwei Hexan-Extrakte in einem sauberen 100 mL konische Kolben.
      Hinweis: Das Eugenol werden nun in der kombinierten organischen (oben) Schichten (organische Lösung B).
    7. Fügen Sie MgSO4 trocknen organische Lösung B.
    8. Analysieren Sie organische Lösung A, organische Lösung B, reine Eugenol TLC Verweis und Acetyleugenol TLC Verweis von TLC mit dem optimierten TLC Lösungsmittel Verhältnis in der vorherigen Sitzung identifiziert.
    9. Filtern Sie organische Lösung A und B durch geriffelte Filterpapier in separaten vorgewogene 250mL Rundboden Fläschchen. Entsorgen Sie den festen Rückstand (hydratisiert MgSO4) in den Abfall.
    10. Entfernen des Lösungsmittels aus der Rundboden-Kolben mit einem Drehverdampfer (Bad Wassertemperatur: 60 ° C, Vakuum-Druck: 350 Mbar).
    11. Jedem Rundboden-Kolben Diethylether (5 mL) hinzu und übertragen Sie die gereinigten Acetyleugenol (organische Lösung A) und Eugenol (organische Lösung B) in einem unbeschrifteten, preweighed Fläschchen mit einem Trichter.
    12. Spülen Sie die Flasche mit weiteren Diethylether (5 mL) in die Flasche. Verdunstet das Lösungsmittel mit einem Drehverdampfer (Bad Wassertemperatur: 50 ° C, Vakuumdruck 800 Mbar) mit einem Fläschchen Zubehör. Aufzeichnen des Ertrags und das Fläschchen entsprechend beschriften.
    13. Analysieren Sie organische Lösung A, organische Lösung B, reine Eugenol TLC Verweis und Acetyleugenol TLC Verweis von TLC mit dem optimierten TLC Lösungsmittel Verhältnis in der vorherigen Sitzung identifiziert.
      Hinweis: Wässrige Lösungen können in den Ausguss für Entsorgung gegossen werden. Hexan und Äther Abfälle sollten in den nicht-Chlorierte organische Abfall Flaschen entsorgt werden.

2. PHWE Correa Reflexa : Isolierung von Seselin und (+)-Epoxysuberosin

  1. Sitzung 1. PHWE Correa reflexa
    1. Mahlen Sie Correa Reflexa Blätter (10 g) in eine elektrische Gewürz Mühle, und übertragen Sie dann das Boden Pflanzenmaterial auf eine 250-mL-Becherglas.
      Hinweis: Das Schleifen sollte 20-30 Sekunden dauern.
    2. Fügen Sie ~ 2 g aus grobem Sand, die Becher mit Pflanzenmaterial.
    3. Mix und Pack in den Korb von den Filterhalter (Probenraum). Komprimieren Sie die Probe mit dem Stopfer.
      Hinweis: Packen Sie die Probe nicht zu fest.
    4. Die Espresso-Maschine-Tank ~ 300 mL 35 % Ethanol/H2O Lösung hinzufügen.
    5. Positionieren Sie den Filterhalter in der Espresso-Maschine und platzieren Sie eine saubere 250-mL-Becherglas darunter zu.
    6. ~ 100 mL Extrakt zu sammeln, ~ 1 Minute warten und dann eine weitere 100 mL zu sammeln.
      Achtung: Die Maschine und die Extrakte an dieser Stelle wird heiß.
    7. Diese Mischung im Eisbad abkühlen und verdunsten das Ethanol mit einem Drehverdampfer (Bad Wassertemperatur: ~ 40 ° C).
    8. Wässrigen Extrakt zu einem separatory Trichter zu übertragen und mit Ethylacetat (4 x 50 mL) zu extrahieren.
      Hinweis: Zeit kann erforderlich sein, um Emulsionen zu trennen zwischen Extraktionen zu ermöglichen.
    9. Kombinieren der Bio-Extrakte, trocknen durch Zugabe von MgSO4 und Verwirbelung der Küvette, Filtern mit einem gesinterten Glastrichter und verdampfen mit einem Drehverdampfer (Bad Wassertemperatur: ~ 35 ° C) zu den rohen Extrakt.
    10. Ein 1H-Kernspinresonanz (NMR)-Spektrum zu erhalten (siehe Kursleiter für Hilfe). 11
    11. Führen Sie TLC Analyse des rohen Extraktes zu bestimmen, einen geeigneten Lösungsmittelsystem, die Verbindungen zu isolieren, die extrahiert wurden.
      Hinweis: TLC Analyse erfolgt analog zu Verfahren in Schritt 1.2 beschrieben.
  2. Sitzung 2. Trennung von Seselin und (+)-Epoxysuberosin von Flash-Spalte Chromatographie11,19
    Hinweis: Das folgende Protokoll beinhaltet die Verwendung von Flash-Säulenchromatographie für die Trennung von organischen Verbindungen. Bitte konsultieren Sie Instruktor zu demonstrieren, wie man eine Flash-Silica-Gel-Spalte zu packen.
    1. Ort der Spalte (~ 30 mm im Durchmesser) in einer Klemme versehen, um ein Stativ. Legen Sie einen 100-mL konische Kolben unter der Spalte.
    2. Füllen Sie die Spalte mit Silica-Gel (60 μm Flash-Klasse) auf ein Niveau von ca. 10 cm und dann die Spalte Hexanes (~ 100 mL) hinzu.
    3. Platzieren Sie ein Glasstopfen in der Spalte, entfernen Sie die Spalte aus der Klemme zu und schütteln Sie, um eine Suspension zu erhalten. Setzen Sie die Säule in die Klemme und dann lassen Sie die Mischung zu begleichen.
    4. Öffnen Sie den Hahn der Spalte und mit einem Gas-Adapter an eine Druckluftleitung, leere Spalte um ~ 2 mm des Lösungsmittels über dem Bett von Kieselgel lassen. Die Gas-Adapter zu entfernen, dann den Hahn schließen.
    5. Verwenden Sie die Hexanes gesammelt in den konischen Kolben (ca. 5 mL) Waschen Sie Silica-Gel von den Wänden der Spalte mit einer Pasteurpipette mit einer Gummiseptum ausgestattet.
    6. Wiederholen Sie Schritt 2.2.4 dann eine kleine Schicht von Sand (~ 1 cm) in der Spalte.
    7. Hinzufügen von Dichlormethan (~ 1mL) in den Kolben mit dem Rohöl aus Schritt 2.1.9 extrahieren. Laden Sie sorgfältig die anschließende Lösung auf die Säule mit einer Pasteurpipette mit einem Gummiseptum ausgestattet. Öffnen Sie den Hahn der Spalte und lassen Sie die Probe auf das Kieselgel adsorbieren.
    8. Wiederholen Sie Schritt 2.2.7 weitere zwei Male.
    9. Die Spalte sorgfältig Hexanes (~ 20 mL) hinzufügen. Wiederholen Sie Schritt 2.2.4.
    10. Hinzugeben Sie vorsichtig (~ 180 mL einer 15 % igen Ethylacetat/Hexanes Lösung). Offen befestigt der Hahn der Spalte und mit einem Gas-Adapter eine Druckluftleitung, leere Spalte um ~ 2 mm des Lösungsmittels über dem Bett von Kieselgel, die Brüche in 10-mL-Röhrchen sammeln lassen.
      Hinweis: Dies ermöglicht Seselin isoliert werden.
    11. Kombinieren Sie das Reagenzglas Brüche mit Seselin in einem 250-mL Rundboden-Kolben und verdampfen mit einem Drehverdampfer (Bad Wassertemperatur: ~ 35 ° C).
      Hinweis: TLC Analyse wird verwendet, um dies zu bestimmen und wird durch Analogie zur in Schritt 1.2 beschriebenen Verfahren durchgeführt.
    12. Hinzugeben Sie vorsichtig (~ 75 mL einer 25 % igen Ethylacetat/Hexanes Lösung). Offen befestigt der Hahn der Spalte und mit einem Gas-Adapter eine Druckluftleitung, leere Spalte um ~ 2 mm des Lösungsmittels über dem Bett von Kieselgel, die Brüche in 10-mL-Röhrchen sammeln lassen.
      Hinweis: Dadurch wird (+)-Epoxysuberosin isoliert werden.
    13. Kombinieren Sie das Reagenzglas Brüche mit (+)-Epoxysuberosin in einen 250-mL-Runde untere Kolben und verdampfen mit einem Drehverdampfer (Bad Wassertemperatur: ~ 35 ° C).
      Hinweis: TLC Analyse wird verwendet, um dies zu bestimmen und wird durch Analogie zur in Schritt 1.2 beschriebenen Verfahren durchgeführt.
    14. Proben der isolierten Verbindungen sind mittels NMR-Spektroskopie analysiert. 11
      Hinweis: NMR-Spektroskopie-Experimente werden von einem Labortechniker durchgeführt.

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Ergebnisse

PHWE der Nelken. Beim Versuch, die flüssig-flüssig-Extraktionsschritt durchführen, begegnet Studenten oft Emulsionen (die Zugabe von Salzwasser in der Regel nicht wirksam war). Zu diesem Zeitpunkt wurden Studenten angewiesen, lassen Sie die Mischung in den Scheidetrichter stehen, während sie die Auswirkungen der Eluent Zusammensetzung auf die Trennung von Eugenol und Acetyleugenol untersucht von TLC. Es sei darauf hingewiesen, dass das Hexan Heptan oder Dichlormethan in der flüssig-flüssi...

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Diskussion

Das klassische Verfahren zur Isolierung von Eugenol aus Nelken durch Wasserdampf-Destillation ist seit Jahrzehnten Teil des Programms Mittelstufe Chemie-Labor an der Universität von Sydney aber wurde modernisiert, um PHWE Methodik im Jahr 2016 (Abbildung 1) zu beschäftigen. 9 , 18 Dies bot eine Reihe Vorteile. Erstens nutzt Haushalts Espressomaschinen in der Laborumgebung sofort fasziniert und engagierte Studenten durch die Darstellu...

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Offenlegungen

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Danksagungen

Die Autoren erkennen der School of Natural Sciences - Chemie, Universität von Tasmanien und der School of Chemistry, The University of Sydney für finanzielle Unterstützung. B.J.D. und j.j. danken die australische Regierung für Forschungsstipendien Training Programm.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
EspressomaschinenBreville/SunbeamBreville Espressomaschine Modell 800ES / Sunbeam EM3820 Café Espresso II
Rotations-EvporatorenBuchi und Heidolph
Nelken (Pflanzenmaterial)Dijon Food Pty LtdNelken müssen in einer Küchenmaschine für Studenten gemahlen werden.
Correa reflexa (Pflanzenmaterial)Probe aus Tasmanien Probevon ausgewachsenen Sträuchern im Thomas Crawford Reserve an der Universität von Tasmanien
SandAjax1199
Ethanol Redoc ChemicalsE95 F3
HexaneAjax251
MagnesiumsulfatAjax1548
Diethyl EtherMerck1009215000
Kieselsäure auf Aluminium TLC PlattenMerck1055540001
EugenolMerck1069620100
EugenylacetatAldrichW246905
AcetonRedox ChemicalsAceton13
CyclohexanChemSupplyCA019
Kieselgel 60Trajan513431240 - 63um (230-400mesh)
Kongo rotes PapierChemSupplyIS070-100S
32% SalzsäureAjax256

Referenzen

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