In diesem Protokoll werden Methoden für die Durchführung von Inzucht Kreuze und zur Beurteilung des Erfolgs eines dieser Kreuze, die Ameise Vollenhovia Emeryibeschrieben. Diese Protokolle sind wichtig für Experimente zur Verständnis der genetischen Grundlagen von Geschlecht Bestimmung Systeme in Hymenoptera.
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Methodenartikel
Induktion und Bewertung von Inzucht Kreuze mit Ant, Vollenhovia Emeryi
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Die genetischen und molekularen Komponenten der Geschlechtsbestimmung Kaskade haben ausgiebig in die Honigbiene, Apis Mellifera, hymenopteran Modellorganismus untersucht. Jedoch ist wenig bekannt über die Bestimmung des Geschlechts Mechanismen in anderen nicht-Modell hymenopteran Taxa, wie Ameisen gefunden. Aufgrund der Komplexität der Lebenszyklen, die in hymenopteran Spezies entwickelt haben, ist es schwer zu warten und experimentelle Kreuzungen zwischen diesen Organismen im Labor durchzuführen. Hier beschreiben wir die Methoden für die Durchführung von Inzucht Kreuze und für die Beurteilung des Erfolgs eines diese Kreuze in Ant Vollenhovia Emeryi. Inzucht im Labor mit V. Emeryiinduzieren, ist relativ einfach, wegen der einzigartigen Biologie der Arten. Insbesondere dieser Art produziert androgenetischen männlichen und weiblichen geschlüpften ausstellen Flügel Polymorphismus, die Identifikation der Phänotypen im genetischen Kreuze vereinfacht. Darüber hinaus ist die Bewertung des Erfolgs der Inzucht einfach, Männchen kontinuierlich hergestellt werden können, durch Inzucht Kreuze, während normale Männchen nur während einer genau definierten Paarungszeit im Feld angezeigt. Unser Protokoll ermöglichen den Einsatz V. Emeryi als Modell der genetischen und Molekulare Grundlagen der Sex-Bestimmung-System in Ameisenarten zu untersuchen.
Einleitung
Eusozialen Hautflügler Taxa, wie Ameisen und Bienen, haben eine diploide geschlechtermittlung System entwickelt, bei denen Personen, die an einem oder mehreren komplementären Geschlechtsbestimmung heterozygot sind (CSD) Loci Weibchen, während diejenigen geworden, die Homo- oder Hemizygous sind werden Sie Männchen (Abb. 1A)1.
Genetischen und molekulare Komponenten der Geschlecht-Bestimmung-Kaskade beteiligt sind gut in die Honigbiene, Apis Mellifera, ein hymenopteran Modell Organismus2,3,
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Protokoll
1. Feld Erfassung und Pflege der V. Emeryi Kolonien im Labor
Hinweis: Nester der V. Emeryi findet man in faulenden Baumstämmen und gefallenen verfallenden Baum Branchesin sekundären Wäldern in ganz Japan. Diese Sorte zeigt zwei Arten von Kolonien, d. h. (1) Kolonien produzieren nur Long-winged Königinnen und (2) Kolonien produziert vor allem kurze geflügelten Königinnen neben kleinen Anzahl von langen geflügelten Königinnen8,14. In diesem Protokoll sammelten wir die letztere Art von Kolonien in der Präfektur Ishikawa, Japan.
- V. Emeryi Ko....
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Ergebnisse
Mit F0 bis F1 Generationen Mikrosatelliten-Analyse ergab, dass Inzucht Kreuze erfolgreich produziert wurden (Abbildung 4)6. Infolgedessen wurden begatteten Königinnen von Inzucht Kreuze, innerhalb eines Monats nach der experimentellen Kreuzung Kolonien erhalten. Eine Viertel (27,1 ± 8,91 % SD) aller Nachkommen (F2) von der Inzucht Kreuze war männlich, während der Rest weiblich (Arbeitnehmer und eine Kön.......
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Diskussion
Dieser Artikel beschreibt die Protokolle, die verwendet werden können, zu induzieren Inzucht Kreuze und das Auftreten von Inzucht in die Ameise V. Emeryizu bewerten. In den Experimenten ist Genotypisierung der Individuen für Kreuze verwendet muss sichergestellt werden, dass Inzucht Kreuze erfolgreich waren. Allerdings ist die Wirksamkeit dieser Kreuzung Tests deutlich wie diploide Männchen das ganze Jahr produziert werden können, während haploide Männchen nur im Herbst im Feld und Labor-6.......
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Offenlegungen
Die Autoren haben nichts preisgeben.
Danksagungen
Wir danken Herrn Taku Shimada, der Delegierte des AntRoom, Tokio, Japan, für die uns mit seinem Foto von V. Emeryi geschlüpften. Dieses Projekt wurde von der Japan Society for Promotion of Science (JSPS) Research Fellowship für junge Wissenschaftler (16J00011) und Grant in Aid for Young Scientists (B)(16K18626). finanziert.
....Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Gipspulver | N/A | N/A | Jede Marke kann verwendet werden |
| Holzkohle, Aktiviert, Pulver | Wako | 033-02117,037-02115 | |
| Objektträgerglas | N/A | N/A | Jede Marke kann verwendet werden |
| Dry Cricket Diät | N/A | N/A | Jede Marke kann verwendet werden |
| Braun shuger | N/A | N/A | Jede Marke kann verwendet werden |
| Styrol Quadratisches Gehäuse | AS ONE | Jede Größe | Variiert je nach Anzahl der Ameisen |
| Incbator | Jede Marke kann verwendet werden | ||
| Aluminiumblockbad Trockene Thermoeinheit DTU-1B | TAITEC | 0014035-000 | |
| 1,5 ml Hyper Microtube, Klar, runder Boden | WATSON | 131-715CS | |
| Ethanol (99,5) | Wako | 054-07225 | |
| Stereoskopisches Mikroskop | N/A | N/A | Jede Marke kann verwendet werden |
| Forseps | DUMONT | 0108-5-PO | |
| Chelex 100 Natriumform | SIGMA | 11139-85-8 | |
| Phosphatpuffer Kochsalzlösung (PBS) Tabletten, pH7,4 | TaKaRa | T9181 | |
| Paraformaldehyd | Wako | 162-16065 | |
| -Cellstain- DAPI-Lösung | Dojindo Molecular Technologies | D523 | |
| ABI 3100xl Genetic Analyzer | Applied Biosystems | Wenden Sie sich direkt an den Konstrukteur, um weitere Informationen zu erhalten. | |
| Konfokales Laser-Scanning-Mikroskop Leica TCS SP8 | Leica | Wenden Sie sich direkt an den Hersteller, um weitere Informationen zu erhalten. | |
| HC PL APO CS2 20x/0.75 IMM | Leica | Wenden Sie sich für weitere Informationen direkt an den Hersteller. | |
| HC PL APO CS2 63x/1.20 WASSER | Leica | Wenden Sie sich direkt an den Hersteller, um weitere Informationen zu erhalten. | |
| Leica HyDTM | Leica | Wenden Sie sich direkt an den Hersteller, um weitere Informationen zu erhalten. | |
| Leica Application Suite X (LAS X) | Leica | Wenden Sie sich direkt an den Hersteller, um weitere Informationen zu erhalten. |
Referenzen
- Mable, B. K., Otto, S. P. The evolution of life cycles with haploid and diploid phases. BioEssays. 20 (6), 453-462 (1998).
- Beye, M., Hasselmann, M., Fondrk, M. K., Page, R. E., Omholt, S. W. The gene csd is the primary signal for sexual development in the honeybee....
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Nachdrucke und Genehmigungen
