Visualisierung von 3D weißen Fettgewebe Schachts ganz-Mount Färbung

Yanqing Jiang; Joanna Lan-Hing Yeung; Ju Hee Lee; James An; Patrick E. Steadman; Jae-Ryong Kim; Hoon-Ki Sung

doi:10.3791/58683

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Methodenartikel

Visualisierung von 3D weißen Fettgewebe Schachts ganz-Mount Färbung

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DOI:

10.3791/58683

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17. November 2018

Yanqing Jiang^*¹ , Joanna Lan-Hing Yeung^*¹ , Ju Hee Lee¹^,² , James An¹ , Patrick E. Steadman³ , Jae-Ryong Kim⁴ , Hoon-Ki Sung¹^,²^,⁵

¹Translational Medicine Program, The Hospital for Sick Children, ²Department of Laboratory Medicine and Pathobiology, University of Toronto, ³Neurosciences & Mental Health Program, The Hospital for Sick Children, ⁴Department of Biochemistry and Molecular Biology, Smart-Aging Convergence Research Center, College of Medicine, Yeungnam University, ⁵Banting and Best Diabetes Centre, University of Toronto

^* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Der Schwerpunkt der vorliegenden Studie soll die gesamte-Mount Immunostaining und Visualisierung Technik als eine ideale Methode für die 3D Darstellung von Fettgewebe Architektur und zellulären Komponente zeigen.

Zusammenfassung

Fettgewebe ist ein wichtiges Stoffwechselorgan mit hoher Plastizität und reagieren auf Reize aus der Umwelt und Nährstoff-Status. Als solche haben verschiedene Techniken entwickelt, um die Morphologie und Biologie des Fettgewebes zu studieren. Allerdings sind herkömmliche Visualisierungsmethoden beschränkt sich auf die Untersuchung des Gewebes in 2D-Schnitte, Nichtbeachtung die 3D Architektur des gesamten Organs zu erfassen. Hier präsentieren wir Ihnen ganze-Mount Färbung, eine immunhistochemische Methode, die intakt Fettgewebe Morphologie mit minimalen Bearbeitungsschritten bewahrt. Daher bestehen die Strukturen der Adipozyten und anderen zellulären Komponenten ohne Verzerrung, die repräsentativsten 3D-Visualisierung des Gewebes zu erreichen. Darüber hinaus ganz-Mount Färbung mit Abstammung-Tracing-Methoden zur Zelle Schicksal Entscheidungen bestimmen kombinierbar. Diese Technik hat jedoch einige Einschränkungen, die korrekte Information über tiefere Teile des Fettgewebes. Um diese Einschränkung zu umgehen, ganz-Mount Färbung weiter kombinierbar mit Gewebe clearing-Techniken, um die Undurchsichtigkeit der Gewebe zu entfernen und ermöglichen vollständige Visualisierung der gesamten Fettgewebe Anatomie mit Licht-Blatt Fluoreszenz-Mikroskopie. Daher können eine höhere Auflösung und eine genauere Darstellung der Fettgewebe Strukturen mit der Kombination dieser Techniken erfasst werden.

Einleitung

Fettgewebe ist ein wesentliches Organ zur Speicherung von Energie und zeichnet sich durch dynamische Umbau und fast unbegrenzte Erweiterung¹. Neben Energie-Homöostase spielt Fettgewebe auch eine wesentliche Rolle in Hormonausschüttung von mehr als 50 Adipokine Ganzkörper-metabolische Funktion²zu modulieren. Fettgewebe hat eine vielfältige Architektur, bestehend aus verschiedenen Zelltypen, einschließlich Reifen Adipozyten, Fibroblasten, Endothelzellen, Immunzellen und Adipocyte Progenitor Zellen³. Jüngste Studien haben gezeigt, dass Fettleibigkeit und anderen Stoffwechselstörungen wesentlich änder....