Magnet-Resonanz-Tomographie Bewertung der murinen Blase Karzinogen-induzierte Tumoren

Summary

Murine Blase Tumoren werden mit dem N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) Nitrosaminen karzinogen (BBN) induziert. Blase Tumor Generation ist heterogen; Daher ist eine genaue Beurteilung der Tumorlast vor Randomisierung, experimentelle Behandlung erforderlich. Hier präsentieren wir Ihnen eine schnelle und zuverlässige MRI-Protokoll zur Beurteilung der Tumorgröße und Bühne.

Abstract

Murine Blase Tumormodellen sind entscheidend für die Bewertung der neue Therapieoptionen. Blase Tumoren mit N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) Nitrosaminen (BBN) Karzinogen induzierten sind vorteilhaft gegenüber zeilenorientierten Zellmodelle, weil sie eng die genomische Profile von menschlichen Tumoren replizieren, und im Gegensatz zu Zellmodelle und Xenotransplantate, sie bieten eine gute Gelegenheit für die Untersuchung von Immuntherapien. Allerdings ist die Blase Tumor Generation heterogen; Daher ist eine genaue Beurteilung der Tumorlast vor Randomisierung, experimentelle Behandlung erforderlich. Hier beschriebenen ist ein Mausmodell BBN und Protokoll, Blase Krebs Tumor Belastung in Vivo unter Verwendung einer schnellen und zuverlässigen Magnetresonanz (MR)-Sequenz (wahre FISP) zu bewerten. Diese Methode ist einfach und zuverlässig, denn im Gegensatz zu Ultraschall, Herr bedienerunabhängige und die einfache Bildverarbeitung nach der Übernahme und Überprüfung ermöglicht. Verwendung von axialen Bildern der Blase, Analyse der Regionen entlang der Blasenwand und Tumor können für die Berechnung der Blase Wand und Tumor-Bereich. Diese Messung korreliert mit ex Vivo Blase Gewicht (R_s= 0.37, p = 0.009) und Tumorstadium (p = 0,0003). Abschließend BBN erzeugt heterogenen Tumoren, die ideal sind für die Bewertung von Immuntherapien und MRT können schnell und zuverlässig beurteilen Tumorlast vor der Randomisierung, experimentelle Therapiearmen.

Introduction

Blasenkrebs ist die fünft häufigste Krebsart insgesamt, verantwortlich für rund 80.000 Neuerkrankungen und 16.000 Todesfälle in den Vereinigten Staaten im Jahr 2017¹. Nach ca. 30 Jahren ohne bedeutende Fortschritte bei der systemischen Behandlung von Blase Krebs²haben den letzten Anti-PD-1 und Anti-PD-L1 Checkpoint Inhibitor Studien spannende und gelegentlich langlebige Reaktionen bei Patienten mit fortgeschrittenen gezeigt. important Karzinom^3,4,5. Allerdings nur etwa 20 % der Patienten zeigen eine objektive Antwort auf diese B....

Protocol

Alle hier beschriebene Methoden wurden von den institutionellen Animal Care und Nutzung Committee (IACUC) der Northwestern University genehmigt.

1. Induktion von Tumoren mit BBN

1. Erhalten Sie männliche C57/BL6 Mäuse, jeweils mindestens 6 Wochen alt.
   Hinweis: Männliche Mäuse entwickeln Blasenkrebs schnell und konsequent als weibliche Mäuse^14,15.
2. Hinzu kommt N-nitrosobutyl(4-hydroxybutyl) Amin (BBN) in einer Dosis von 0,05 % des Trinkwassers. In einer undurchsichtigen Behälter bewahren Sie auf und bieten Sie es Ad Libitum als Trinkwasser auf Mäuse

Results

Mit dem beschriebenen Protokoll (Abbildung 1), wurden in C57/B6 männliche Mäuse Blase Tumoren induziert. MRI wurde auf 16 Wochen durchgeführt, und Mäuse wurden in der 20. Woche eingeschläfert. Ex-Vivo Blase Gewichte (BW) für jede Maus wurden aufgezeichnet. Dias wurden gefärbt mit Hämatoxylin und Eosin, und alle Histologie Folien für Tumorstadium überprüft wurden.

Um die Tumorlast mit Herr z.......

Discussion

Genaue Darstellung der Tumormodellen ist für geeignete vor Euthanasie Inszenierung und tierischen Randomisierung vor Einleitung einer experimentellen Behandlung notwendig. Bei der hier vorgestellten Verfahren zeigen wir Methodik (1) Blase Tumoren mit dem BBN Karzinogen und (2) Schichten Blase Tumorlast durch den Einsatz von Mr An Herrn abgeleitet Bereich Messung (BLA_Wand) korreliert deutlich mit Ex-Vivo Blase Gewicht und pathologischen Tumorstadium zugeordnet ist.

Durch ein.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
C57BL/6 Mäuse	The Jackson Laboratory	664	Mäuse
N-Butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamin-Karzinogen (BBN)	TCI American	B0938	Karzinogen
0,9% normale Kochsalzlösung	Hospira, Inc	NDC 0409-488-02
Isofluran	Piramal HealthCare	60307-120-25	Anästhetikum
7Tesla ClinScan MRT	Bruker	NA	Dedizierte Bildgebung von Kleintieren
MRT Syngo Siemens		NA	MR Integrierte Bildgebungssoftware
Modell 1030 Überwachung & Gating System	Small Animal Instruments, Inc. (SAII)	NA	Physiologische Überwachung von Kleintieren
Formalin, neutral gepuffert, 10%	Sigma	HT501128	Fixiermittel
Eosin	Y Fisher Scientific	NC1093844	Histologisches Färbemittel
Hämatoxylin	Fisher Scientific	23-245651	Histisches Färbemittel
Jim7	Xinapse Systems	NA	Medizinische Bildanalysesoftware
GraphPad Prism v7.04	Graphpad	NA	Grafiksoftware
R v3.4.2	Das R-Projekt für statistisches Rechnen	NA	Statistische Software
R-Paket pROC v1.10.0.	Das R-Projekt für statistisches Rechnen	NA	ROC-Analyse