Doliolide, einschließlich der Art Dolioletta gegenbauri, sind kleine gelatinöse Marine Zooplankton von ökologischer Bedeutung auf produktiven subkontinentalen Regalsystemen weltweit gefunden. Die Schwierigkeit, diese empfindlichen Organismen zu kultivieren, schränkt ihre Untersuchung ein. In dieser Studie beschreiben wir Anbauansätze für das Sammeln, Aufzucht und die Pflege des Doliolid Dolioletta gegenbauri.
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Methodenartikel
Anbau des Marine Pelagischen Tunikas Dolioletta gegenbauri (Uljanin 1884) für experimentelle Studien
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Gelatinezooplanktons spielen eine entscheidende Rolle in den Ökosystemen der Ozeane. Jedoch, Es ist in der Regel schwierig, ihre Physiologie zu untersuchen, Wachstum, Fruchtbarkeit, und trophische Wechselwirkungen in erster Linie aufgrund methodischer Herausforderungen, einschließlich der Fähigkeit, sie zu kulturisieren. Dies gilt insbesondere für die Doliolid, Dolioletta gegenbauri. D. gegenbauri kommt weltweit häufig in produktiven subtropischen Kontinentalschelfsystemen vor, oft in Blütenkonzentrationen, die einen großen Teil der täglichen Primärproduktion verbrauchen können. In dieser Studie beschreiben wir Anbauansätze für das Sammeln, Aufziehen und Pflegen von D. gegenbauri zum Zweck der Durchführung von Laborstudien. D. gegenbauri und andere doliolid Arten können live mit schräg geschleppten konischen 202 m Mesh Planktonnetzen von einem treibenden Schiff gefangen werden. Kulturen werden am zuverlässigsten etabliert, wenn die Wassertemperaturen unter 21 °C liegen und von unreifen Gonozooiden, reifenden Phorozooiden und großen Krankenschwestern gestartet werden. Kulturen können in abgerundeten Kulturgefäßen auf einem sich langsam drehenden Planktonrad gepflegt und auf einer Ernährung von kultivierten Algen im natürlichen Meerwasser für viele Generationen aufrechterhalten werden. Neben der Fähigkeit, Laborkulturen von D. gegenbaurizu etablieren, zeigen wir, dass der Sammelzustand, die Algenkonzentration, die Temperatur und die Exposition gegenüber natürlich bedingtem Meerwasser für die Kultur entscheidend sind. Gründung, Wachstum, Überleben und Reproduktion von D. gegenbauri.
Einleitung
Zooplankton ist die größte tierische Biomasse im Ozean, sind Schlüsselkomponenten in marinen Nahrungsbahnen und spielen eine wichtige Rolle in den biogeochemischen Zyklen der Ozeane1,2. Zooplankton, obwohl aus einer großen Vielfalt von Organismen besteht, kann grob in zwei Kategorien unterschieden werden: gelatinös und nicht-gelatinelatinus mit wenigen Zwischentaxa3,4. Im Vergleich zum nicht-gelatinösen Zooplankton ist das gelatinöse Zooplankton aufgrund seiner komplexen Lebensgeschichten5besonders schwer zu untersuchen und ihre....
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Protokoll
1. Vorbereitung von Aufzuchteinrichtungen Für D. gegenbauri
HINWEIS: Alle benötigten Materialien und Ausrüstungen sind in der Materialtabelleaufgeführt.
- Bereiten Sie 1 M Natriumhydroxid (NaOH), 0,06 M Kaliumpermanganat (KMnO4) Lösung vor. Um diese Lösung vorzubereiten, lösen Sie 400 g NaOH in 10 L entionisiertes Wasser auf. 100 g KMnO4 in die NaOH-Lösung geben und gut vermischen.
- Eine 0,1 M Natriumbisulfitlösung (NaHSO3) vorbereiten, indem Sie 100 g NaHSO3 in 10 L entionisiertes Wasser auflösen und gut vermischen.
VORSICHT: Diese Reagenzien sind Rei....
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Ergebnisse
Nach den beschriebenen Verfahren zur Erhebung und Kultivierung des Doliolids, D. gegenbauri in Abbildung 3beschrieben, ist es möglich, eine Kultur von D. gegenbauri während seiner komplexen Lebensgeschichte zu erhalten (Abbildung 1) und für viele Generationen erhalten. Obwohl hier der Anbau von D. gegenbauri beschrieben wird, sollten diese Verfahren auch für den Anbau anderer Doliolidarten relevant sein.
Die.......
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Diskussion
Die Fähigkeit zur Kultur von Doliolids wurde in den letzten Jahrzehnten etabliert und zur Unterstützung der Forschung in mehreren Bereichen genutzt. Experimentelle Studien in unseren Laboratorien haben die Veröffentlichung von mindestens 15 wissenschaftlichen Studien unterstützt, die sich auf die Fütterung und das Wachstum konzentrierten18,26, Reproduktion18,28, Diät6, <.......
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Offenlegungen
Die Autoren haben nichts zu erklären.
Danksagungen
Wir sind dankbar für die vielen Personen, die im Laufe der Jahre an diesem Projekt gesammeltes Wissen, einschließlich G.-A. Paffenhöfer und D. Deibel, die diese Protokolle ursprünglich entwickelt haben. Auch M. Köster und L. Lamboley haben wesentlich zur Entwicklung dieser Verfahren beigetragen. Die in Tabelle 1 enthaltenen Schätzungen der dolioliden Fülle wurden von N.B. Lépez-Figueroa und Der E.E. Rodriguez-Santiago erstellt. Diese Studie wurde teilweise von der US National Science Foundation awards OCE 082599, 1031263 an MEF, den Kooperationsprojekten OCE 1459293 und OCE 14595010 an MEF und DMG und dem National Oceanic and Atmospheric Administration Award NA16SEC4....
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Algenkulturröhrchen (55 mL sterile Einweg-Glaskulturröhrchen) | Beliebig | NA | Für Algenkulturen |
| Autoklav | Beliebig | NA | Zum Sterilisieren von Geräten und Meerwasser für Algenkulturen |
| Becher (2 L Glas) | Beliebig | NA | Zum Sortieren von verdünntem Plankton Netzinhalt |
| Eimer (5 Gallonen, ~20L) | Beliebig | NA | Zum Verdünnen des Inhalts des Planton-Netzes - sollte vor dem ersten Gebrauch mit Seewasser konditioniert werden |
| Ballonflaschen (20 L) | Beliebig | NA | Zum Aufbewahren von Meerwasser |
| Doliolid Kulturglas aus Glas (1,9 l Enghalsglas mit Deckel) | Qorpak | GLC-01882 | Behälter für Kultur |
| Doliolid Glas Kultivierungsglas (3,8 l Enghalsglas mit Deckel) | Qorpak | GLC-01858 | Behälter für Kultur |
| Klimakammer (Temperaturgesteuerte Umweltkammer) | Beliebig | NA | Zur Aufnahme von Planktonrädern und Kulturpflege |
| Filtergeräte für 47 mm Filter | Beliebig | NA | Zur Filterung von Meerwasser für Kulturen |
| Mikrofaserfilter aus Glas, 47 mm | Whatman | 1825-047 | Zur Filterung von Meerwasser für Kulturen |
| Glaspipette (Borosillikat Glaspipette (Glasrohr), AD 10 mm, ID 8 mm, Wandstärke 1 mm) | Science Company | NC-10894 | Kundenspezifischer Schnitt und Kanten |
| poliert Schlauchschellen, Edelstahl, #104 (178 mm) | Alle | NA | Zum Halten von Zuchtgläsern an das Planktonrad |
| Isochrysis galbana Stamm CCMP1323 | National Center for Marine Algae and Microbiota (NCMA) | Stamm CCMP1323 | Zur Fütterung von Dolomitenkulturen |
| L1 Media Kit, 50 L | Nationales Zentrum für Meeresalgen und Mikrobiota (NCMA) | MKL150L | Zur Kultivierung von Algen |
| Lampe (Fluoreszierende Tischlampe mit verstellbarem Arm) | Beliebige | NA | Zur Beleuchtung von Dolioliden in Gläsern und Bechern |
| Beleuchteter temperaturgesteuerter Inkubator | Beliebige | NA | Für Algenkulturen |
| Mikropipetten und sterile Spitzen (0-20 & Mikro; L, 20-200 &Mikro; l, 200-1000 &Mikro; l) | Beliebige | NA | Für Algenkulturen |
| Plankton Net (202 µ m 0,5 m, 5:1 Länge) mit Steertring und 4 L Steert für Aquarien | Sea-Gear Corporation | 90-50x5-200-4A/BB | Zum Sammeln von lebenden Dolomiten (siehe Abbildung 4) |
| Plankton Wheel | NA | NA | Sonderanfertigung (siehe Abbildung 2) |
| Plastikfolie | Beliebig | NA | Zum Abdecken der Innenseite des Deckels von Dolioliden-Kulturgläsern |
| Kaliumpermanganat | Fisher Scientific | P279-500 | Reagenz zum Reinigen von Gläsern und Glaswaren |
| Stamm CCMP740 | National Center for Marine Algae and Microbiota (NCMA) | Stamm CCMP740 | Zur Fütterung von Dolomitenkulturen |
| Gummischlauch | NA | NA Zum | Halten von Kulturgläsern an das Planktonrad (kann aus Tygonschläuchen hergestellt werden) |
| Natriumbisulfit | Fisher Scientific | S654-500 | Reagenz zum Reinigen von Gläsern und Glaswaren |
| Natriumhydroxid | Fisher Scientific | BP359-212 | Reagenz zum Reinigen von Gläsern und Glaswaren |
| Sterile serologische Pipetten (1 mL, 5 mL, 10 mL, 25 mL) | Beliebige | NA | Für Algenkulturen |
| Thalassiosira weissflogii Stamm CCMP1051 | National Center for Marine Algae and Microbiota (NCMA) | Stamm CCMP1051 | Zur Fütterung von Doliolidenkulturen |
| Gewebekulturflaschen (250 mL) | Beliebige | NA | Für Algenkulturen |
Referenzen
- Banse, K. Zooplankton – Pivotal role in the control of ocean production. Ices Journal of Marine Science. 52 (3-4), 265-277 (1995).
- Wilson, S. E., Ruhl, H. A., Smith, K. L. Zooplankton fecal pellet flux in the abyssal northe....
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Nachdrucke und Genehmigungen
