Der Zweck dieser Studie ist es, ein Tiermodell für die Forschung in der Erholung und Fortsetzung der Gehirn-Ischämie zu etablieren und zu validieren, indem Hirninfarkt und sensorimotorische Funktion nach mittlerer ZerebrierungSverschluss/Reperfusion (MCAO/R) nach 1-90 getestet werden. Tage in Ratten.
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Methodenartikel
Ein präklinisches Modell zur Beurteilung der Gehirnerholung nach akutem Schlaganfall bei Ratten
* These authors contributed equally
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Der Zweck dieser Studie war es, ein tierisches Gehirn Ischämie-Modell in der Erholung und Fortsetzung Sephase zu etablieren und zu validieren. Es wurde ein Modell der mittleren zerebralen Arterienverschluss/Reperfusion (MCAO/R) bei männlichen Sprague-Dawley-Ratten gewählt. Durch die Änderung des Gewichts der Ratte (260 bis 330 g), des Gewindeschraubentyps (2636/2838/3040/3043) und der Hirninfarktzeit (2-3 h) wurden eine höhere Longa-Punktzahl, ein größeres Infarktvolumen und ein größeres Modellerfolgsverhältnis anhand der Longa-Punktzahl und der TTC-Färbung abgeschirmt. Die optimale Modellbedingung (300 g, 3040 Gewindebolzen, 3 h Hirninfarktzeit) wurde erfasst und in einer Beobachtungszeit von 1-90 Tagen nach der Reperfusion mittels Beurteilung der sensorimotorischen Funktionen und des Infarktvolumens verwendet. Unter diesen Bedingungen hatte der bilaterale Asymmetrietest einen signifikanten Unterschied von 1 bis 90 Tagen, und der Grid-Walking-Test hatte einen signifikanten Unterschied von 1 bis 60 Tagen; beide Unterschiede könnten ein geeigneter sensorimotorischer Funktionstest sein. So wurde der am besten geeignete Zustand eines neuartigen Rattenmodells in den Erholungs- und Sequela-Stadien der Gehirnischämie gefunden: 300 g Ratten, die MCAO mit einem 3040 Fadenbolzen für einen 3 h Hirninfarkt unterzogen und dann reperfiert wurden. Die entsprechenden sensorimotorischen Funktionstests waren ein bilateraler Asymmetrietest und ein Grid-Walking-Test.
Einleitung
Die Hirnischämie ist in drei Stadien mit verschiedenen Post-Stroke-Indikatoren unterteilt: das akute Stadium (innerhalb einer Woche), die Erholungsphase (1 Woche bis 6 Monate) und die Fortsetzungsphase (mehr als 6 Monate). Derzeit konzentrieren sich die meisten Studien auf das akute Stadium der Gehirnischämie wegen seiner signifikanten Wirkung und multi-relative Forschungsmodelle1,2,3. Jedoch, die Erholung und Fortsetzung Sendestadien des Gehirns Ischämie kann nicht ignoriert werden, aufgrund ihrer langfristigen Komplikation von Behinderungen. Daher ist der Zweck dieser Studi....
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Protokoll
Das Verfahren und die Verwendung von Tierkörpern wurden vom Nationalen Institut für Gesundheit für die Pflege und Verwendung von Labortieren genehmigt. Dieses Protokoll ist speziell für die Tests der mittleren Zerebralen Arterienverschluss/-reperfusion (MCAO/R) und der sensorimotorischen Funktion angepasst.
1. Experimentelles Design und Gruppierung
- Verwenden Sie ein Mratten-MCAO/R-Modell, um eine ischämische Methode des Rattengehirns mit schwereren Hirnverletzungen und einem höheren Modellerfolgsverhältnis mithilfe von Longas Punktzahl und TTC-Färbung zu überprüfen.
- Führen Sie das Experiment an männlichen Sprague-Dawley-Ra....
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Ergebnisse
Verwendung des oben genannten Verfahrens für ein MCAO/R-Modell mit Longa-Punktzahl und TTC-Färbung, verschiedene Behandlungen mit mittlerem Gewicht (275/300/320 g), Schraubentypen (2636/2838/3040/3043; Tabelle 1) und ischämische Zeiten (2-3 h) und 1 Tag Reperfusion wurden verwendet, um für das optimale Gehirn Ischämie-Modell bei Ratten zu überprüfen. Modellparameter mit 300 g Gewicht, 3040 Gewindebolzen und 3 h Hirninfarktzeit waren am besten geeignet für den größten Hirn.......
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Diskussion
Viele Modelle, die Methoden und Verhaltensindikatoren, die gut in akuten zerebralen Ischämie verwendet werden möglicherweise keine signifikanten Veränderungen in der Erholung und Fortsetzung Sephase der GehirnIschämie16,17. Jedoch, die Zahl der Patienten mit Gehirn ischämische in der Genesung und Sequela-Stadien ist die größte. Es ist wichtig, ein geeignetes Tiermodell für die Erholung und Fortsetzung von Ischämie-Schlag zu wählen.
Wir.......
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Offenlegungen
Die Autoren haben nichts zu verraten.
Danksagungen
Diese Arbeit wurde von der National Natural Science Foundation of China (81603315, 81603316), Schlüssel F & E-Plan der Provinz Jiangxi in China (20171ACH80001), industrielle und akademische Kooperationsprojekte in Hochschulen und Universitäten der Provinz Fujian in China (2018Y41010011).
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Anatomisches Mikroskop | Leica (Deutschland) | S8 | Mikroskopisches Operationsinstrument |
| Klinge | Gellette | / | Schneiden von Hirnschnitten |
| Schüttelbett mit konstanter Temperatur | Taicang Experimentelle Ausrüstung Fabrik | THZ-C | Um die Färbung der Gehirnabschnitte gleichmäßig und bei konstanter Temperatur |
| zu halten Digitalkamera | Canon | 700D | Zum Aufnehmen Bilder von TTC färben |
| Elektrorasierer | Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd. | 3000# | Entfernung von Haaren vom Hals von Ratten |
| Pinzette Hamostatic | Shanghai Medical Device Co., Ltd. | 14 cm | Verwendung zum Entfernen des Gehirns |
| Image Pro Plus Software | Media Cybernetics Inc. | 6.0 | Analysieren Sie das Infarktvolumen |
| Isofluran | RWD Life Science | 217170702 | Anästhesiegas |
| Mikrozange | Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd. | 10 cm | Gefäß-Mikromanipulationsmikroskopschere |
| Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd. | 10 cm | Gefäßmikromanipulation | |
| Ophthalmische Pinzette | Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd. | 10 cm | Hilfshaut und Muskelanatomie |
| Pphthalmische Schere | Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd. | 10 cm | Verwendung zum Schneiden der Haut des Halses |
| Rattenhirn Slice Mold | Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd. | 400 g | Für das standardmäßige, gleichmäßige Schneiden von Gehirngewebe |
| Ratten-Ermüdungsgerät mit rotierendem Stab | Anhui Zhenghua Biological Instrument and Equipment Co., Ltd. | ZH-300B | Zum Testen der sensomotorischen Funktion |
| Anästhesiegerät für Kleintiere | Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd. | ABM3000 | Ein Gasanästhesiegerät |
| Kleintierthermostat | Beijing Damida Technology Co., Ltd. | DM.7-YLS-20A | Um die Körpertemperatur des Tieres während des Betriebs konstant zu halten |
| Chirurgische Schere | Shanghai Medical device Co., Ltd. | 16 cm | Verwendung zum Enthaupten und Entfernen des Gehirns |
| Naht | Shanghai Jinhuan Medical Devices Co., Ltd. | 4-0 / 5-0 | Verwendung für Haut- und Muskelnähte / Verwendung für Gefäßligaten |
| Thread Bolt | Beijing Cinontech Co., Ltd. | 2636/2838/3040/3043-A4 | Verschluss der mittleren Hirnarterie bei Ratten |
| 5-Triphenyl-2H-tetrazoliumchlorid (TTC) | Sigma | LOT#BCBP3272V | Reagenz zur Färbung von Hirnschnitten |
Referenzen
- Kong, L. L., et al. Neutralization of chemokine-like factor 1, a novel C-C chemokine, protects against focal cerebral ischemia by inhibiting neutrophil infiltration via MAPK pathways in rats. Journal of Neuroinflammation. 11, 112(2014).
- Jiang, M., et al.
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Nachdrucke und Genehmigungen
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