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Stereotaxic Chirurgie für die Implantation von Mikroelektroden-Arrays im Gemeinsamen Marmoset (Callithrix jacchus)

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DOI:

10.3791/60240

29. September 2019

* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Diese Arbeit präsentiert ein Protokoll, um eine stereotaxic, neurochirurgische Implantation von Mikroelektroden-Arrays im gemeinsamen Marmoset durchzuführen. Diese Methode ermöglicht speziell elektrophysiologische Aufnahmen bei frei verhaltenden Tieren, kann aber leicht an alle anderen ähnlichen neurochirurgischen Eingriffe bei dieser Art angepasst werden (z. B. Kanülen zur Arzneimittelverabreichung oder Elektroden zur Hirnstimulation).

Zusammenfassung

Marmosets (Callithrix jacchus) sind kleine nicht-menschliche Primaten, die in der biomedizinischen und präklinischen Forschung, einschließlich der Neurowissenschaften, an Popularität gewinnen. Phylogenetisch sind diese Tiere dem Menschen viel näher als Nagetiere. Sie zeigen auch komplexe Verhaltensweisen, einschließlich einer breiten Palette von Vokalisationen und sozialen Interaktionen. Hier wird ein wirksames stereotaxic neurochirurgisches Verfahren zur Implantation von Aufzeichnungselektrodenarrays im gemeinsamen Marmoset beschrieben. Dieses Protokoll beschreibt auch die prä- und postoperativen Schritte der Tierpflege, die erforderlich sind, um eine solche Operation erfolgreich durchzuführen. Schließlich zeigt dieses Protokoll ein Beispiel für lokale Feldpotential- und Spike-Aktivitätsaufzeichnungen in einem frei verhaltenden Marmoset 1 Woche nach dem chirurgischen Eingriff. Insgesamt bietet diese Methode die Möglichkeit, die Gehirnfunktion in wachen und frei verhaltenden Marmosets zu studieren. Das gleiche Protokoll kann leicht von Forschern verwendet werden, die mit anderen kleinen Primaten arbeiten. Darüber hinaus kann es leicht modifiziert werden, um andere Studien zu ermöglichen, die Implantate erfordern, wie die Stimulierung von Elektroden, Mikroinjektionen, die Implantation von Optroden oder Führungskanülen oder die Ablation diskreter Gewebebereiche.

Einleitung

Häufige Marmosets (Callithrix jacchus) werden in vielen Forschungsbereichen, einschließlich der Neurowissenschaften, als wichtiger Modellorganismus anerkannt. Diese Primaten der neuen Welt stellen ein wichtiges ergänzendes Tiermodell sowohl für Nagetiere als auch für andere nichtmenschliche Primaten (NHPs) dar, wie z. B. den Rhesusmakaken. Wie Nagetiere sind diese Tiere klein, leicht zu manipulieren und relativ sparsam zu pflegen und zu züchten1,2,3,4, im Vergleich zu größeren NHPs. Darüber hinaus haben diese Tiere eine Neigung zu S....

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Protokoll

Tierversuche wurden in Übereinstimmung mit dem National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals durchgeführt und von der Ethikkommission des Santos Dumont Institute (Protokoll 02/2015AAS) genehmigt.

1. Chirurgische Vorbereitung

  1. Befestigen Sie jedes Elektroden-Array an einem Elektrodenhalter, der mit dem zu verwendenden Stereotaxienrahmen kompatibel ist.
  2. Schließen Sie einen Elektrodenhalter an den stereotaxien Mikromanipulator an und stellen Sie einen Mikrodraht an die interauralen Koordinaten. Wiederholen Sie dies ggf. für die zusätzlichen Elektroden-Arrays und Halter.
    HINWEIS: Die intera....

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Ergebnisse

Der Zweck dieser Studie war es, ein stereotaxic neurochirurgisches Verfahren zur Implantation von Mikroelektroden-Arrays für elektrophysiologische Aufnahmen im gemeinsamen Marmoset zu beschreiben. Eine typische Operation (von der Anästhesieinduktion bis zur Anästhesieerholung) dauert ca. 5-7 h, abhängig von der Anzahl der implantierten Arrays. Hier wurden zwei Arrays symmetrisch implantiert, eines in jeder Gehirnhälfte. Jedes Array enthielt 32 Edelstahl-Mikrodrähte, die in sieben Bündeln angeordnet waren, die auf mehrere.......

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Diskussion

Diese Arbeit bietet eine detaillierte Beschreibung der Verfahren bei der Implantation von Mikroelektroden-Aufnahme-Arrays im Marmoset-Gehirn. Das gleiche Protokoll kann leicht verwendet werden, wenn Elektroden, ob hausgemacht oder kommerziell erhältlich, bei anderen kleinen Primaten implantiert werden. Darüber hinaus kann es leicht für andere experimentelle Zwecke angepasst werden, die eine präzise Ausrichtung der Gehirnstrukturen erfordern. Daher ist dieses Protokoll absichtlich vage in Bezug auf stereotaxic Koordinaten.......

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Offenlegungen

Die Autoren haben nichts zu verraten.

Danksagungen

Die Autoren danken Bernardo Luiz für die technische Unterstützung beim Filmen und Bearbeiten. Diese Arbeit wurde vom Santos Dumont Institute (ISD), dem brasilianischen Bildungsministerium (MEC) und coordenaéo de Aperfeiéoamento de Pessoal de Nével Superior (CAPES) unterstützt.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Equipments
683 Beatmungsgerät für KleintiereHarvard Apparatus, Inc.55-0000
Anästhesie-MontageBRASMEDCOLIBRI
Barber ClippersMundialHC-SERIES
DentalbohrerNorgenB07-201-M1KG
Homöothermisches Heizkissen und MonitorHarvard Apparatus, Inc.50-7212
Marmoset Stereotaktischer RahmenNarishige Scientific Instrument LabSR-6C-HT
Patientenmonitor und PulsoximeterBionet Co., LtdBM3
Stereotaktischer MikromanipulatorNarishige Scientific Instrument LabSM-15R
OperationsmikroskopOptoSM PLUS IBZ
Instruments
Allis GewebezangeSklar36-2275
Alm Retraktor, abgerundete Spitze, 4x4 ZähneRhosseRH11078
abgewinkelte McPherson PinzetteOftalmologiabr11301A
Gebogene chirurgische SchereHarvard Apparatus, Inc.72-8422
Gebogene GewebezangeSklar47-1186
Zarte DissektionszangeWPI WP5015
DentalbohrerMicrodontISO.806.314.001.524.010
Essring GewebezangeSklar19-2460
FG 1/4 DentalbohrerMicrodontISO.700.314.001.006.005
Halsey NadelhalterWPI15926-G
Halstead Moskito-PinzetteWPI503724-12
Hämostatische Pinzette, geradeSklar17-1260
SchmuckzangeSklar66-7436
McPherson-Vannas Optathalmische Mikroschere, 3 mm SpitzeArgos InstrumentalARGOS-4004
Pereosteal RaspatoryGolgran38-1
SkalpalgriffHarvard Apparatus, Inc.72-8354
SchraubendreherEurotoolSCR-830.00
LöseeisenHikari21K006
Chirurgische SchereHarvard Apparatus, Inc.72-8400
ZahnzangeWPI501266-G
Disposables/Single Use
1 ml sterile Spritze mit 26 G NadelDescarpack7898283812785
130 cm x 140 cm Operationsfeld, vorsterilisiertProtDesc7898467276344
24G Nadel, vorsterilisiertDescarpack7898283812846
50 cm x 50 cm Operationsfeld, vorsterilisiertEsterili-med110100236
Sonden mit Wattespitze, vorsterilisiertJiangsu Suyun Medical Materials Co. Ltdd23007
Qutips mit WattespitzeHigie Topp7898095296063
ElektrodenarrayHausgemacht
Endotrachealtubus ohne Manschette, Innendurchmesser 2,0 mm, Außendurchmesser 2,9 mmSolidor7898913077201
verzinnter Kupferdraht, 0,15 mm Durchmesser
M1,4x3 EdelstahlschraubenUSMICROSCREWM14-30M-SS-P
Medical TapeMissner7896544910102
Nylon OP-NahtmaterialShalonN540CTI25
Skalpalklinge, vorsterilisiertAdvantiVe1037
LotKesterSN63PB37
Sterile Kochsalzlösung 0,9%Isofarma7898361700041
Sterile OP-HandschuheMaxitex7898949349051
Steriler OP-KittelProtDesc7898467281208
OP-Gaze, 15 cm x 26 cm vorsterilisiertHé ika7898488470315
GelfoamPfizer
Medikamente/Chemikalien
0,25 mg/ml AtropinIsofarma
10% Lidocain SprayProdutos Quí micos Farmacê uticos Ltda.
2,5 % Enrofloxacino VeterinärantibiotikumChemitec0137-02
Dexametasona Veterinär EntzündungshemmendMSDR06177091A-00-15
WasserstoffperoxidFarmax7896902211537
IsofluoranBioChimico7897406113068
Jet AcrylpolymerisationslösungArtigos Odontoló gicos Clá ssico
Jet Auto polymerisierendes AcrylArtigos Odontol&oakut; gicos Clá ssico
Ketamin 10%Syntec
Lidocain und Phenylephrin 1,8 ml LokalanästhetikumSS Weiß7892525041049
Povidon-Jod LösungFarmax7896902234093
Riohex 2% chirurgische SeifeRioquí Glimmer7897780209418
SilberfarbeSPI liefert05002-AB
Tramadolchlorid 50 mg/mlUniã o Quí mica7896006245452
Refresh Gel (Polyacrylsäure)Allergan
7896676405644

Referenzen

  1. Okano, H., Hikishima, K., Iriki, A., Sasaki, E. The common marmoset as a novel animal model system for biomedical and neuroscience research applications. Seminars in Fetal and Neonatal Medicine. 17 (6), 336-340 (2012).
  2. Harris, R. A., et al.

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Schlagwörter

Implantation von Mikroelektroden Arrayselektrophysiologische AufzeichnungKonstruktion der KopfkappeKraniotomieverfahrenEntfernung der Dura MaterAnwendung von Zahnakrylpostoperative Versorgung

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