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Methodenartikel
In diesem Bericht beschreiben wir eine Double-Spin-Methode zur Herstellung von aktiviertem plättchenreichem Plasma (PRP). Unter Verwendung von autologem Thrombin wurden humane Fettstammzellen (hASCs) kultiviert. Es wurde gezeigt, dass aktiviertes PRP die Proliferation von hASCs fördert.
Aktiviertes plättchenreiches Plasma (PRP), das durch Zentrifugation aus Vollblut hergestellt wurde, zeigte in verschiedenen Arten von kultivierten Zellen eine proliferationsstimulierende Wirkung, was auf einen möglichen Einsatz in der regenerativen Medizin hindeutet. Hier wurde eine Double-Spin-Methode verwendet, um PRP aus Vollblut herzustellen. PRP wurde zusätzlich durch autologes Thrombin aktiviert. Im aktivierten PRP wurde die Thrombozytenzahl gemessen und die proliferationsstimulierende Wirkung in humanen Fettstammzellen (hASCs) untersucht. Die resultierende Thrombozytenzahl war bei PRP 11,5-mal höher als bei Vollblutplasma. Die Proliferation von hASCs wurde durch die Inkubation mit 1% PRP deutlich verstärkt. Das beschriebene Verfahren kann verwendet werden, um PRP mit einer hohen Konzentration an Thrombozyten reproduzierbar herzustellen. PRP, das mit dieser Methode hergestellt wird, fördert die Proliferation von hASCs deutlich.
Aktiviertes plättchenreiches Plasma (PRP) wird durch Zentrifugation von Vollblut hergestellt und enthält nachweislich Blutplättchen weit über den Ausgangswerten1. Autologes RPP wird häufig in der chirurgischen Behandlung eingesetzt, einschließlich der Wundheilung2, der Knochenverletzung3 und der ästhetischen Chirurgie 4,5. Nach der Aktivierung von Blutplättchen in PRP setzen die in den Blutplättchen vorhandenen α-Granulate mehrere Wachstumsfaktoren frei, wie z. B. den von Blutplättchen abgeleiteten Wachstu....
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Die Studie wurde vom Ethics Review Board der Kansai Medical University in Übereinstimmung mit den ethischen Richtlinien der Deklaration von Helsinki von 1975 genehmigt. Alle Proben wurden mit Einverständniserklärung der Spender entnommen und verwendet.
1. Vorbereitung
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Angereicherte Konzentrationen von Thrombozyten und PDGF-BB in PRP
Die Konzentrationen von Blutplättchen und PDGF-BB in PRP stiegen um das 11,5-fache bzw. 25,9-fache an und damit um das 25,9-fache höher als im gesamten Plasma. Die Konzentrationen von EGF in PRP wurden jedoch nicht verändert, und der IGF-Gehalt betrug nur 70 % des Konzentrationsgehalts von Vollplasma (Tabelle 1). Die Experimente wurden viermal mit der Double-Spin-Methode repliziert.
V.......
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Nach der PRP-Aktivierung "aktivieren" mehrere Wachstumsfaktoren wie PDGF, EGF, IGF, TGF-β und VEGF 1,6,7 Zellen und Gewebe von Wunden und fördern so die Wundheilung20,21. Bei der kosmetischen Rekonstruktionschirurgie hat sich gezeigt, dass aktivierte Zellen die Heilung induzieren und die Ästhetik verbessern22,23
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Die Autoren erklären, dass sie keine konkurrierenden finanziellen Interessen haben.
Nicht zutreffend.
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| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| 20 mL Spritze, Terumo Spritzenverschluss Typ | Terumo, Tokio, Japan. | SS-20LZP | |
| 50 mL Röhrchen, konisches Polypropylen-Röhrchen | Corning, NY, USA. | 352070 | |
| Automatisiertes Hämatologie-System | Sysmex Corp., Tokio, Japan | XE-2100 | |
| Blutentnahmenadel, SafeTouch PSV-Set mit Luer-Adapter, 21 G x 3/4" | Nipro, Osaka, Japan. | 32-384 | |
| Blutentnahmeröhrchen, ACD-Lösung Ein Blutentnahmeröhrchen, 8,5 mL | BD Vacutainer, NJ, USA. | ||
| Blutentnahmeröhrchen, Serumblutentnahmeröhrchen/Monovette, 10 mL | BD Vacutainer, NJ, USA. | 366430 | |
| Calciumchlorid, 1 mEq/ml, | Otsuka Pharmaceutical Factory, Tokushima, Japan. | 3215400A1061 | |
| Kanüle, BS-Nadel ohne Abschrägung, 18 G (1,2 mm) x 75 mm | BS Medical, Tokio, Japan. | BS-81007 | Nicht zum Verkauf |
| Zellzähl-Kit-8 | Dojindo Molecular Technologies, Kumamoto, Japan | CK04 | |
| Zentrifuge | Kokusan, Tokio, Japan. | H-19F | |
| Zentrifuge | Eppendorf, Hamburg, Deutschland. | 5415R | |
| EnSpire 2300 Multilabel-Lesegerät | PerkinElmer, Inc., Waltham, MA, USA | ||
| Filtereinheit | Merck Millipore, Co. Cork, Irland. | ||
| EGF Quantikine ELISA Kit für Menschen | R& D Systems, Minneapolis, MN, USA | DEG00 | |
| Humanes IGF-I Quantikine ELISA Kit | R& D Systems, Minneapolis, MN, USA | DG100 | |
| Humanes PDGF-BB Quantikine ELISA Kit | R& D Systems, Minneapolis, MN, USA | DBB00 | |
| Pipettenspitze, ART 1000 Reach Barrierespitze | Thermo Scientific, MA, USA. | 2079-05-HR | |
| Pipette, Nichipet EXII 100-1000 μ L | Nichiryo, Saitama, Japan. | 00-NPX2-1000 | |
| Sterling Nitril Power-Free Untersuchungshandschuhe | Kimberly-Clark | 50707 | |
| Yamazen Alkohol zur Desinfektion | Yamazen Pharmaceutical, Osaka, Japan. | Nr. A7L07 |
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