Inkrementelle Temperaturänderungen für maximale Brut und Laichzeit bei Astyanax mexicanus

Summary

Dieser Artikel beschreibt die grundlegenden Laborbedingungen und Protokolle für ein inkrementelles Temperaturregime zur Stimulierung des maximalen Laichens beim mexikanischen Salmler Astyanax mexicanus, einem aufstrebenden Modell für Entwicklungs- und Evolutionsstudien.

Abstract

Der mexikanische Salmler Astyanax mexicanusist ein aufstrebendes Modellsystem für Entwicklungs- und Evolutionsstudien. Die Existenz von Augenoberflächen- (Oberflächenfischen) und blinden Höhlenmorphen (Höhlenfische) in dieser Art bietet die Möglichkeit, die Mechanismen zu hinterfragen, die der morphologischen und Verhaltensevolution zugrunde liegen. Höhlenfische haben neuartige konstruktive und regressive Eigenschaften entwickelt. Zu den konstruktiven Veränderungen gehören Eine Zunahme der Geschmacksknospen und Kiefer, der Sinnesorgane der Seitenlinie und des Körperfetts. Die regressiven Veränderungen umfassen den Verlust oder die Verringerung der Augen. Melaninpigmentierung, Schulverhalten, Aggression und Schlaf. Um diese Veränderungen experimentell zu untersuchen, ist es entscheidend, eine große Anzahl von erzeugten Embryonen zu erhalten. Seit die ursprünglichen A. mexicanus Oberflächenfische und Höhlenfische in den 1990er Jahren in Texas und Mexiko gesammelt wurden, wurden ihre Nachkommen routinemäßig dazu angeregt, zweimonatlich im Jeffery-Labor eine große Anzahl von Embryonen zu züchten und zu laichen. Obwohl die Zucht durch Nahrungsfülle und -qualität, Hell-Dunkel-Zyklen und Temperatur gesteuert wird, haben wir festgestellt, dass inkrementelle Temperaturänderungen eine Schlüsselrolle bei der Stimulierung des maximalen Laichens spielen. Der allmähliche Temperaturanstieg von 72 ° F auf 78 ° F in den ersten drei Tagen einer Brutwoche bietet zwei bis drei aufeinanderfolgende Laichtage mit einer maximalen Anzahl hochwertiger Embryonen, gefolgt von einem allmählichen Temperaturabfall von 78 ° F auf 72 ° F während der letzten drei Tage der Laichwoche. Die in diesem Video gezeigten Verfahren beschreiben den Arbeitsablauf vor und während einer Laborzuchtwoche für ein inkrementelles temperaturstimuliertes Laichen.

Introduction

Der Teleost Astyanax mexicanus hat eine augenbewohnende (Oberflächenfische) Form und viele verschiedene blinde Höhlenbewohner (Höhlenfische) Formen^1,2. Höhlenfische haben sich in ständiger Dunkelheit und unter Nahrungsbeschränkungen entwickelt, was zum Auftreten neuartiger konstruktiver und regressiver Merkmale führt³. Zu den konstruktiven Merkmalen gehören eine Zunahme der Geschmacksknospen und der Kiefergröße, Sinnesorgane der Seitenlinie und Fettreserven. Zu den regressiven Merkmalen gehören der Verlust oder die Verringerung von Melaninpigmentierung, Augen und Verhaltensweis....

Protocol

Dieses Verfahren wurde von den Institutional Animal Care Guidelines der University of Maryland, College Park (derzeit IACUC 469 #R-NOV-18-59; Projekt 1241065-1).

Abbildung 1. Kalender während einer Brutwoche und einer Nichtbrutwoche. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

1. Montag

1. Führen Sie....

Results

Wir züchten und laichen im Allgemeinen die Nachkommen von Oberflächenfischen, die ursprünglich im Nacimiento del Rio Choy in San Luis Potosi, Mexiko (Rio Choy Oberflächenfisch) und San Solomon Springs im Balmorhea State Park, Texas (Texas Oberflächenfisch) und Höhlenfischen aus Cueva de El Pachón (Pachón Höhlenfisch) in Tamaulipas, Mexiko, und Cueva de los Sabinos (Los Sabinos Höhlenfisch) und Sotano de la Tinaja (Tinaja Höhlenfisch) in San Luis Potosi gesammelt wurden Mexiko.

Während einer Br.......

Discussion

Astyanax mexicanus ist ein neuartiges biologisches Modell, das häufig laicht und leicht im Labor gezüchtet werden kann^1,2. Da wir uns für die Entwicklungsmechanismen interessieren, die evolutionären Veränderungen bei A. mexicanus-Höhlenfischen zugrunde liegen, ist die Produktion und Verwendung von Embryonen für unsere Forschungsziele von entscheidender Bedeutung. Der Hauptzweck der Erhaltung eines erwachsenen Fischbestandes ist die Produktion vo.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Blackworms	Eastern Aquatics, Lancaster, PA	Keine
Zuchtnetze	Maßgeschneiderte
Artemia-Garneleneier	AquaCave Lake Forest, IL.	Keine
Kolorimetrisches Testkit	Petco	SKU:11916	API Süßwasser pH Test Kit
Eigelbflocken	Pentair, Minneapolis, MN	Keine
Fingerschalen	Carolina Biological Supply 741004		Kulturschalen, 4,5 Zoll, 250 mL
Handnetze	Any Pet Store
Inkubator für Embryonen	Fisher Scientific	51-029-321HPM	405 L
Instant Ocean Meersalze	Spectrum Brands, Blacksburg, VA	Keine
Methylenblau	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO	M9140
Pasteurpipetten	Fisher Scientific	13-678-20	5,75 Zoll
Net-Einweichlösung	Jede Tierhandlung
Nutrafin Cycle	Amazon	Keine	Bakterielle
Verstärkung Kühlschrank für Lebendfutter	Jede Quelle
Stereomikroskop	Jede Quelle
Thermometer	Jede Quelle
Tetra Tropical Crisps	Spectrum Brands, Blacksburg, VA	Keine