Ein Protokoll für Roux-en-Y Magenbypass bei Ratten mit linearen Heftern

Zusammenfassung

Roux-en-Y Magenbypass (RYGB) wird zur Behandlung von Fettleibigkeit und Diabetes durchgeführt. Die Mechanismen, die der Wirksamkeit von RYGB zugrunde liegen, sind jedoch nicht vollständig verstanden, und die Studien sind durch technische Schwierigkeiten begrenzt, die zu einer hohen Mortalität in Tiermodellen führen. Dieser Artikel enthält Anweisungen zur Durchführung von RYGB bei Ratten mit hohen Erfolgsraten.

Zusammenfassung

Roux-en-Y Magenbypass (RYGB) wird häufig zur Behandlung von schwerer Fettleibigkeit und Typ-2-Diabetes durchgeführt. Der Mechanismus der Gewichtsabnahme und metabolische Veränderungen sind jedoch nicht gut verstanden. Es wird angenommen, dass mehrere Faktoren eine Rolle spielen, darunter eine reduzierte Kalorienaufnahme, eine verminderte Nährstoffaufnahme, ein erhöhtes Sättigungsgefühl, die Freisetzung von sättigungsfördernden Hormonen, Verschiebungen im Gallensäurestoffwechsel und Veränderungen in der Darmmikrobiota.

Das Ratten-RYGB-Modell bietet einen idealen Rahmen, um diese Mechanismen zu untersuchen. Frühere Arbeiten an Mausmodellen hatten hohe Sterblichkeitsraten, die zwischen 17 und 52% lagen, was ihre Akzeptanz einschränkte. Rattenmodelle zeigen eine mehr physiologische Reserve gegenüber chirurgischen Reizen und sind technisch einfacher zu übernehmen, da sie die Verwendung von chirurgischen Heftern ermöglichen. Eine Herausforderung bei chirurgischen Heftern ist jedoch, dass sie oft einen großen Magenbeutel hinterlassen, der nicht repräsentativ für RYGB beim Menschen ist.

In diesem Protokoll präsentieren wir ein RYGB-Protokoll bei Ratten, das zu einem kleinen Magenbeutel mit chirurgischen Heftern führt. Mit zwei Hefterfeuern, die den Voromach der Ratte entfernen, erhalten wir einen kleineren Magenbeutel, der dem eines typischen menschlichen RYGB ähnelt. Chirurgisches Heften führt auch zu einer besseren Hämostase als scharfe Teilung. Darüber hinaus enthält der Voromach der Ratte keine Drüsen und seine Entfernung sollte die Physiologie von RYGB nicht verändern.

Gewichtsverlust und metabolische Veränderungen in der RYGB-Kohorte waren im Vergleich zur Scheinkohorte signifikant, mit signifikant niedrigerer Glukosetoleranz nach 14 Wochen. Darüber hinaus hat dieses Protokoll ein ausgezeichnetes Überleben von 88,9% nach RYGB. Die in diesem Protokoll beschriebenen Fähigkeiten können ohne vorherige mikrochirurgische Erfahrung erworben werden. Einmal gemeistert, wird dieses Verfahren ein reproduzierbares Werkzeug zur Untersuchung der Mechanismen und Auswirkungen von RYGB bieten.

Einleitung

Fettleibigkeit und Typ-2-Diabetes sind zu weltweiten Epidemien geworden¹. Obwohl medizinische Gewichtsabnahme Diabetes bei Patienten verbessern kann, profitieren diejenigen mit schwerem Diabetes am meisten von bariatrischen Operationen. Bariatrische Chirurgie hat sich als sicher und wirksam bei der Gewichtsabnahme und Verbesserung oder Heilung von Typ-2-Diabetes^2,3erwiesen, auch bei Menschen mit langjähriger Krankheit⁴. Metabolische bariatrische Verfahren, wie die aktuelle Goldstandard-Roux-en-Y-Magenbypass-Operation (RYGB), induzieren schnelle und anhaltende Ver....

Protokoll

Tierverwendungsprotokolle wurden vom Health Science Animal Care and Use Committee an der University of Alberta (AUP00003000) genehmigt. In Abbildung 1 finden Sie ein Diagramm, das die RYGB-Anatomie demonstriert.

1. Roux-en-Y Magenbypass

1. Vorbereitung der Tiere und operativer Aufbau
   1. Versorgen Sie die Ratten eine Woche vor der Operation zusätzlich zu ihrer festen Ernährung und Wasser mit oraler Rehydratationstherapie und flüssiger Diät, um sie an diese neue Diät zu gewöhnen.
   2. Schnelle Ratten mit nur Zugang zu Wasser für 12-18 h vor der Operation.
      1. Stellen Sie sicher, dass Ratten ....

Ergebnisse

Tiere und Unterbringung
36 männliche Wistar-Ratten wurden paarweise untergebracht und ab einem Alter von sechs Wochen mit 60% steriler Nagetier-Fettreicher diät gefüttert(Abbildung 2). Im Alter von 16 Wochen unterzogen sie sich einer RYGB- oder Scheinoperation. Nach der ersten postoperativen Woche wurden die Ratten wieder fettreich ernährt. Die Hälfte der Ratten wurde nach 2 Wochen postoperativ eingeschläfert und die andere Hälfte nach 14 Wochen postoperativ eingeschläfer.......

Diskussion

RYGB beinhaltet die Schaffung eines kleinen Magenbeutels (weniger als 30 ml) und die Schaffung eines biliopankreatischen Glieds und eines Roux-Glieds (Abbildung 1). Beim Menschen ist die biliopankreatische Extremität typischerweise 30 bis 50 cm groß und transportiert Sekrete aus dem Magenrest, der Leber und der Bauchspeicheldrüse. Das Roux-Glied ist typischerweise 75 bis 150 cm lang und ist der primäre Kanal für die Aufnahme von Nahrung. Der gemeinsame Kanal ist der verbleibende Dünndarm dis.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
2-0 Seidennähte	Ethicon	K533
3-0 Vicryl-Nähte	Ethicon	J219H
4% Isofluran	N/A	N/A
5% Dextrose und 0,9% Natriumchlorid Lösung - 1000 mL	Baxter	2B1064
50 mL Konische Zentrifugenröhrchen	Fisher Scientific	14-432-22
6-0 Prolene Nahtmaterial	Ethicon	8805H
Anästhesiegerät	N/A	N/A
Tierhaarrasierer	N/A	N/A
Betadine Solution	N/A	N/A
Castrojievo Nadelhalter mit Schloss 14 cm (glatt gebogen)	World Precision Instruments	503258
ECHELON FLEX Gelenkiger endoskopischer Linearschneider	Ethicon	EC45A
Economy Pinzette #4	World Precision Instruments	501978
ENDOPATH ETS Gelenk-Linearschneider 45 mm Nachladungen	Ethicon	6R45B
Ferninfrarot-Wärmekissen-Controller mit Wärmekissen (15,2 cm B x 20,3 cm L), Pad-Temperaturfühler und 10 Einweg-Ärmelschützern	Kent Scientific	RT-0515
Großes Ratten-Elisabethanisches Halsband	Kent Scientific	EC404VL-10
Flüssige Diät-Ernährungssonde (150 mL)	Bio-Serv	9007
Flüssignahrung Ernährungssondenhalter (kurz verstellbar)	Bio-Serv	9015
Mikro-Mückenzange	World Precision Instruments	500452
Mikroschere	World Precision Instruments	503365
Mausdiät, fettreicher Fettgehalt Kalorien (60%), weiche Pellets	Bio-Serv	S3282
Nr. 11 Klingen- und Skalpellgriff	N/A	N/A
OPMI Vario Operationsmikroskop	ZEISS	S88
Doppelbodengitter	Tecniplast	GM500150 Doppelbodengitter
Nagetier Liquid Diet, Lieber-DeCarli '82, Steuerung, 4 Liter/Beutel	Bio-Serv	F1259
Natriumchlorid-Spülung 0,9%ige Lösung - 500 mL	Baxter	JF7633
Sterile Wattestäbchen	N/A	N/A
Steriles Tuch	N/A	N/A
Steriles Handtuch	N/A	N/A
Thermische Kautereinheit	World Precision Instruments	501293