Waiting
Login-Verarbeitung ...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

פרוטוקול מעקף קיבה Roux-en-Y בחולדות באמצעות מהדקים ליניאריים

Published: August 21, 2021 doi: 10.3791/62575
Automatic Translation
1, 1, 2, 1, 1, 3, 1
1Department of Surgery, University of Alberta, 2Faculty of Medicine and Dentistry, University of Alberta, 3Department of Medicine, University of Alberta

Summary

מעקף קיבה Roux-en-Y (RYGB) מבוצע לטיפול בהשמנת יתר וסוכרת. עם זאת, המנגנונים העומדים בבסיס היעילות של RYGB אינם מובנים במלואם, והמחקרים מוגבלים על ידי קושי טכני המוביל לתמותה גבוהה במודלים של בעלי חיים. מאמר זה מספק הוראות כיצד לבצע RYGB בחולדות עם שיעורי הצלחה גבוהים.

Abstract

מעקף קיבה Roux-en-Y (RYGB) מבוצע בדרך כלל לטיפול בהשמנת יתר חמורה וסוכרת מסוג 2. עם זאת, המנגנון של ירידה במשקל ושינויים מטבוליים אינם מובנים היטב. גורמים רבים נחשבים לשחק תפקיד, כולל צריכת קלוריות מופחתת, ירידה בספיגת חומרים מזינים, שובע מוגבר, שחרור של הורמונים מקדמי שובע, שינויים בחילוף החומרים של חומצת מרה, ושינויים במיקרוביוטה במעיים.

מודל RYGB חולדה מציג מסגרת אידיאלית ללמוד מנגנונים אלה. עבודה קודמת על מודלים של עכברים היו שיעורי תמותה גבוהים, הנעים בין 17 ל -52%, הגבלת האימוץ שלהם. מודלים של חולדות מדגימים עתודה פיזיולוגית רבה יותר לגירוי כירורגי והם קלים יותר מבחינה טכנית לאימוץ מכיוון שהם מאפשרים שימוש במהדקים כירורגיים. אתגר אחד עם מהדקים כירורגיים, עם זאת, הוא שהם לעתים קרובות להשאיר כיס קיבה גדול אשר אינו מייצג של RYGB בבני אדם.

בפרוטוקול זה, אנו מציגים פרוטוקול RYGB בחולדות שגורמות לכיס קיבה קטן באמצעות מהדקים כירורגיים. באמצעות שתי שריפות מהדקות אשר להסיר את forestomach של החולדה, אנו מקבלים כיס קיבה קטן יותר דומה לזה בעקבות RYGB אנושי טיפוסי. הידק כירורגי גם גורם להמוסטזיס טוב יותר מאשר חלוקה חדה. בנוסף, forestomach של החולדה אינו מכיל בלוטות והסרתו לא צריך לשנות את הפיזיולוגיה של RYGB.

ירידה במשקל ושינויים מטבוליים בקבוצה RYGB היו משמעותיים בהשוואה לקוהורטת זיוף, עם סובלנות גלוקוז נמוכה משמעותית ב 14 שבועות. יתר על כן, פרוטוקול זה יש הישרדות מצוינת של 88.9% אחרי RYGB. ניתן לרכוש את הכישורים המתוארים בפרוטוקול זה ללא ניסיון מיקרו-כירורגי קודם. לאחר שליטה, הליך זה יספק כלי לשחזור לחקר המנגנונים וההשפעות של RYGB.

Introduction

השמנת יתר וסוכרת מסוג 2 הפכו למגיפות ברחבי העולם1. למרות ירידה במשקל רפואי יכול לשפר את הסוכרת בחולים, אלה עם סוכרת חמורה ליהנות ביותר ניתוח בריאטרי. ניתוח בריאטרי הוכיח להיות בטוח ויעיל בירידה במשקל ושיפור או ריפוי סוג 2 סוכרת2,3, אפילו אלה עם מחלה ארוכת שנים4. הליכים בריאטריים מטבוליים, כגון ניתוח מעקף קיבה Roux-en-Y בתקן הזהב הנוכחי (RYGB), גורמים לשיפורים מהירים ומתמשכים בהומאוסטזיס גלוקוז ובמקביל מפחיתים את הצורך בתרופות סוכרתיות5,6,7.

לאחר RYGB, שיפור הומאוסטזיס גלוקוז מתרחש במהירות והוא עצמאי של ירידה במשקל8. שתי תיאוריות עיקריות הוצעו להסביר את השינויים המטבוליים הקשורים הפוגה סוכרת המתרחשים לאחר ניתוח מטבולי. ראשית, ההשערה hindgut הנחת כי, לאחר מעקף, ריכוזים גבוהים יותר של חומרים מזינים מעוכלים להגיע המעי הדיסטלי שיפור שחרור של הורמונים כגון GLP-1. מצד שני, ההשערה foregut מרמז כי עקיפת המעי הפרוקסימלי מפחית את הפרשת הורמונים אנטי אינקרטין. שתי ההשפעות האלה יכול להוביל לשיפור מוקדם של חילוף החומרים גלוקוז9.

למודלים של בעלי חיים יש פוטנציאל להיות כלי רב עוצמה לחקר מנגנונים אלה. עם זאת, מחסום מרכזי בשימוש במודלים של עכבר או חולדה הוא הקושי הטכני בביצוע הליכים אלה. רוב המחקרים הסתמכו על מודלים עכבר או חולדה10,11,12. דגמי עכבר היו קשים מכיוון שבטן העכבר קטנה מכדי להשתמש במכשירי מהדק11, ושיעורי התמותה גבוהים באופן בלתי מתקבל על הדעת, הנעים בין 17 ל -52%13. בחולדות, כמה פרוטוקולים נשארים קשה מבחינה טכנית לביצוע עקב קשירה מורכבת של כלי קיבה לפני חלוקת הקיבה12,14. מודלים אחרים לחלק את הבטן באמצעות מהדק אבל להשאיר כיס גדול לא עולה בקנה אחד עם האנטומיה האנושית שלאחר RYGB11. במודל זה, אנו מספקים הוראות מפורטות כיצד לבצע RYGB באמצעות מהדקים ליניאריים במודל חולדה וכתוצאה מכך כיס קיבה יותר בקנה אחד עם זה של האנטומיה האנושית. בסך הכל, הליך זה היה קשור לשיעורי הישרדות מצוינים ותוצאות מטבוליות.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

פרוטוקולי שימוש בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה לטיפול ושימוש בבעלי חיים במדעי הבריאות באוניברסיטת אלברטה (AUP00003000). ראה איור 1 עבור תרשים המדגים את האנטומיה של RYGB.

1. מעקף קיבה Roux-en-Y

  1. הכנת בעלי חיים והגדרת אופרטיבי
    1. שבוע לפני הניתוח, לספק את החולדות עם טיפול rehydration אוראלי דיאטה נוזלית בנוסף לתזונה מוצקה שלהם ומים כדי להתאקלם לתזונה חדשה זו.
    2. חולדות מהירות עם גישה למים רק עבור 12-18 שעות לפני הניתוח.
      1. ודאו שחולדות צמו על משטח תיל מוגבה כך שלא יוכלו לצרוך חומר מצעים.
    3. הזריק חולדות עם buprenorphine ארוך תת עורי שחרור מתמשך (SR) במינון של 1 מ"ג/ק"ג מיד לפני הניתוח.
    4. יש לאסוף את כל המכשירים הכירורגיים, המגבות והווילונות.
    5. נקו את משטח הניתוח, משטח החימום וחרוט האף ההרדמה עם 70% אתנול.
    6. הקימו את משטח הניתוח עם מיקרוסקופ הפעלה, מכונת הרדמה ואספקה באופן ארגונומי עבור המנתח המנתח.
    7. השתמש כרית חימום מווסת טמפרטורה להגדיר 37 °C (50 °F).
    8. מניחים וילון סטרילי או מגבת על כרית החימום.
    9. מלא צינור חרוט סטרילי 50 מ"ל עם 0.9% מלוחים.
  2. אינדוקציה והכנה הרדמה
    1. לגרום להרדמה באמצעות 4% איזופלוראן לפי פרוטוקולים שנקבעו בעבר15.
    2. להפעיל לחץ על הרגל האחורית של כל ארבע הגפיים כדי להבטיח שאין תגובת כאב.
    3. בדוק אם יש הרדמה נאותה וקצב נשימה לאחר כל 5 דקות.
    4. יש למרוח חומר סיכה על שתי העיניים כדי למנוע ייבוש.
    5. תגלח שיער מהבטן.
    6. נקה את הבטן עם פתרון פוידון-יוד. אפשרו לתמיסה להתייבש, והיכנסו לכפפות סטריליות.
    7. לעטוף את החולדה עם פתח בוילונות כדי לחשוף את הבטן.
    8. הניחו מכשירים, תפרים, צמר גפן ומזרק 10 מ"ל במיקום המאפשר גישה נוחה במהלך ההליך.
  3. לפרוסטומיה חציונית
    1. בצע חתירה של 3 ס"מ בקו האמצעי העליון של הבטן באמצעות אזמל, ממש מתחת לתהליך הקסיפוד כציון דרך.
    2. באמצעות מספריים, לחלק את fascia ו צפק, עם טיפול להישאר באמצע קו על לינאה אלבה כדי להפחית את הדימום מן abdominus רקטוס. אם יש דימום, לשלוט בו עם תרמית או electrocautery.
  4. גיוס הקיבה
    1. באמצעות שתי צמר גפן רטובה, לנתח בבוטות קבצים מצורפים קיבה.
    2. כאשר נתקלים הידבקויות צפופות, להשתמש cautery תרמית כדי לחלק קבצים מצורפים קיבה בזהירות כדי למנוע צריבת הבטן. מחלקים בחדות את הרצועה בין הקיבה לאון הכבד האביזר כדי להפחית את הסיכון לקריעת כבד עם גיוס הקיבה.
    3. עבור כלי דם גדולים יותר, במיוחד בעורקי הקיבה הקצרים, ליגאט באמצעות תפירת פוליפרופילן 6-0.
    4. צור חלון בצד הדיסטלי הימני של הוושט אך פרוקסימלי לעורק הקיבה השמאלי. ודא כי צמר גפן יכול להגיע לאזור זה אחורי. הבטן מגויסת כראוי כאשר ניתן לחוץ אותה מחוץ לבטן.
  5. זהה וחלק את הג'ונום
    1. זהה את הרצועה של Treitz על ידי ביצוע jejunum בקרבת מקום עד התבוננות בו הוא מצורף mesocolon רוחבי.
    2. מודדים 7 ס"מ בצורה ברורה, מזהים מיקום בין כלי שיט מזנטיים ומחלקים את המעי במיקרו מספריים. הימנע טלאים של פייר בעת חלוקת המעי. שמור רק לחלק את המעי ולא mesentery.
    3. יש להניח ספוג נקי ספוג מלוח לפני חלוקת המעי כדי למזער את הזיהום.
    4. בדוק את נוכחותו של כלי חצייה קטן mesentery בגבול המעי הדק ולחלק את זה עם cautery כדי למנוע דימום.
    5. ממשיכים לחלק את המזנטריה 1 ס"מ לכיוון הבסיס המסטרי.
    6. זהה את הג'ג'ונום הפרוקסימלי והדיסטלי. מניחים את הג'ונום הפרוקסימלי מתחת לגאזה רטובה מימין לחולדה ואת הג'ונום הדיסטלי משמאל לעכבר.
  6. מההיאבקות בבטן
    1. הכנס מהדק חיתוך ליניארי בקו הלבן של forestomach בקו הלבן של הפורסטומך כדי ליצור כיס קטן יותר. המתן 10s לפני ירי השדכן.
    2. יש להפעיל לחץ באמצעות גזה על קווי הסיכות למשך דקה אחת כדי להבטיח את ההמוסטזיס. אם hemostasis לא מושגת עם לחץ לבד, דימום לאורך קו הסיכות הוא oversewn באמצעות 6-0 דמות פוליפרופילן של שמונה תפרים.
    3. בצע אש סיכות שנייה על פני הבטן לתוך החלון שנוצר בעבר. המתן 10s לפני ירי השדכן. הלחץ מוחזק לאורך קו הסיכות כדי להבטיח המוסטזיס, וייתכן שיהיה צורך ב-oversewing.
  7. גסטרוג'ינוסטומיה
    1. הפוך גסטרוטומיה מיד לאחר מהוקקת הבטן. עיכובים בכך עלולים לגרום להתפוגחות קיבה ושאיפה שכן הקיבה אינה רציעת לאחר מצרך הקיבה השני.
    2. בעזרת אזמל בעל 11 להבים, יש ליצור גסטרוטומיה בכיס הדיסטלי. התבטא בתכולת קיבה דרך הגסטרוטומיה. זה חשוב כדי למנוע התנערות קיבה ושאיפה. להאריך את הגסטרוטומיה באמצעות מספריים מיקרו לכ 5 מ"מ. הגסטרוטומיה עשויה גדולה מספיק עבור קצה צמר גפן רק כדי להתאים דרך.
    3. גייסו את הקצה הדיסטלי של הג'ג'ונום הסמוך לגסטרוטומיה והניחו כך שהמזנטריה לא מעוותת.
    4. תוך כדי תפירת anastomosis, להבטיח כי המעי נשמר לח על ידי כיסויו עם גזה ספוג מלוחים ולהחיל מחדש מלוחים באופן קבוע.
    5. באמצעות 6-0 פולידיוקסנון או פוליפרופילן תפירה, מניחים תפירת שהייה בשוליים הנחותים של האנסטומוזיס וחזרו בעדינות באמצעות הצמד. לקשור עם שלושה קשרים.
    6. מניחים תפר שהייה בשוליים העליונים של ההרדמה וחזרו בהם בעדינות באמצעות הצמדה. לקשור עם שישה קשרים.
    7. תפרו את הצד האחורי של האנסטומוזיס באופן רציף, לוקח עקיצות ברוחב 1 מ"מ ו-1 מ"מ זה מזה בזהירות כדי להימנע מטיפול בחלק האחורי.
    8. לאחר שהתפר הגיע לתפר השהות הנחות, קשרו אותם יחד עם שישה קשרים נוספים.
    9. לאחר שהצד האחורי הושלם, הפוך את המעיים והבטן מעל ולהעביר את התפר להישאר נחות דרך הפגם המזנטרי. החל מחדש את ההצמדה וחזר בו בצורה נחותה.
    10. עבור הצד האחורי של anastomosis, למקם עובי מלא מופרע 6-0 תפרים, 1 מ"מ רוחב, ומרווח 1 מ"מ זה מזה, בזהירות כדי למנוע לקחת את הישבן. אלה קשורים עם שישה קשרים כל אחד.
      הערה: הצד הקדמי של anastomosis תפר באופן רציף בעוד הצד האחורי נעשה בצורה מופרעת. פעולה זו מונעת הקפדה פוטנציאלית או היצרות הקשורים לסגירת היקף מתמשכת.
    11. בדוק את הדליפה על ידי דחיפת תוכן זוהר בעדינות על פני anastomosis. אם יש אזורים עם דליפה, בזהירות לחזק אותם עם תפרים מופרעים. יש להקפיד להימנע מלקחת את הקיר האחורי בעת חיזוק עם תפרים נוספים.
  8. Jejunojejunostomy
    1. מהגסטרוג'ונוסטומיה, למדוד 20 ס"מ distally.
    2. צור jejunotomy בצד antimesenteric באמצעות אזמל 11 להב. הימנע מהכנת הג'ג'ינוטומיה מעל הטלאים של פייר.
    3. להרחיב את זה jejunotomy באמצעות מספריים מיקרו, כך שזה באותו גודל כמו איבר biliopancreatic. ודא כי צמר גפן פשוט מתאים בפנים.
    4. מניחים את האיבר הביליופנקריאטי כך שאין פיתול של mesentery.
    5. בצע את anastomosis בדומה gastrojejunostomy עם 6-0 להישאר תפרים בצד העליון נחות. הצד הקדמי מבוצע עם תפרים רציפים בעוד הצד האחורי מבוצע עם תפרים מופרעים.
    6. ודא כי המעי נשמר לח עם מלוחים במהלך anastomosis זה.
    7. בדוק אם יש דליפה על ידי דחיפת תוכן זוהר בעדינות דרך ההרדמה. אם יש אזורים עם דליפה, לחזק אותם עם תפרים מופרעים.
  9. מיקום מחדש של המעיים והבטן
    1. ודא כי אין פיתול של הכיס, הבטן שריד, או הכבד. ודא כי האונה השמאלית של הכבד היא חיצונית לקיבה ולא לכוד מאחורי הכיס כמו זה יכול לגרום איסכמיה כבד דחיסה.
    2. מקם את המעי בבטן במצבו הטבעי כך שאין פיתול.
  10. סגירת בטן
    1. סגור את fascia עם 3-0 פוליגלקטין באופן רציף. 3-0 פולידיוקסנון עשוי לשמש גם.
    2. סוגרים את העור עם משי 2-0 באופן רציף.
  11. הופעת הרדמה
    1. להקטין איזופלוראן לאפס אבל להמשיך חמצן משלים.
    2. לנהל הרדמה מקומית כבלוק התזה לחיתוך.
    3. יש לנהל 10 מ"ל של דקסטרוז תת עורי 5% מלוחים רגילים (D5NS) ברקמה התת עורית שמאחורי הצוואר.
    4. הנח קולר עכברוש אליזבתני לפני שהעכברוש יתעורר לחלוטין. יש להקפיד להתאים אותו בצורה נוחה אך לא הדוקה מדי כדי לגרום לאי נוחות.
      הערה: הצווארון נשמר עד היום 5 כדי למנוע dehiscence הפצע.

2. ניתוח מזויף

הערה: ניתוח מזויף מבוצע בדומה RYGB, עם זאת, לא anastomoses מבוצעים.

  1. גסטרוטומיה נוצרת ולאחר מכן נסגרת עם 6-0 תפרי פולידיוקסנון או פוליפרופילן.
  2. jejunotomy נוצר 7 ס"מ דיסטל לרצועה של Treitz ולאחר מכן סגור עם 6-0 תפרים פולידיוקסנון או פוליפרופילן.

3. טיפול לאחר הניתוח

  1. טיפול לאחר הניתוח
    1. חולדות בית בנפרד ולשמור אותם על פלטפורמות תיל מוגבה עד מזון מוצק הוא reinduceded כדי למנוע צריכת מצעים וחסימה זוהרת.
      הערה: דיאטה לאחר הניתוח מתחדשת בהדרגה כמו בצקת ב gastrojejunostomy יכול לגרום לחסימה עם חידוש מוקדם של דיאטה מוצקה.
    2. בדוק את הרגליים מדי יום בזמן חולדות הם על פלטפורמות תיל מוגבהות עבור כל שינוי בעור.
    3. שמור חולדות על מים ותזונה טיפול התייבשות דרך הפה עבור 72 שעות הראשונות.
    4. ניהול 10 מ"ל של D5NS כל 12 שעות עבור 72 השעות הראשונות.
    5. ניהול buprenorphine קצר תת עורי ב 0.01 מ"ג/ קילוגרם אם חולדות נראה סובל מכאבים. סולם גרימס עכברוש משמש להערכת כאב16.
    6. ביום שלאחר הניתוח 3, מוסיפים דיאטה נוזלית מכרסמת. המשך לספק טיפול התייבשות מים אוראלי.
    7. ביום שלאחר הניתוח 5, הפעל מחדש דיאטה עתירת שומן. המשך לספק מים ותזונה נוזלית. הסר את הצווארון האליזבתני.
    8. ביום שלאחר הניתוח 7, יש להפסיק את הדיאטה הנוזלית.
    9. הסר תפרי עור ביום שלאחר הניתוח 10-14.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

בעלי חיים ודיור
36 חולדות ויסטאר זכר שוכנו בזוגות והאכילו אותם ב-60% בדיאטה סטרילית עתירת שומן של מכרסמים החל מגיל שישה שבועות(איור 2). בגיל 16 שבועות, הם עברו ניתוח RYGB או זיוף. לאחר השבוע הראשון שלאחר הניתוח, חולדות התחדשו בדיאטה עתירת שומן. מחצית מהעכברושים הומתו בשבועיים לאחר הניתוח והחצי השני הומתו ב-14 שבועות לאחר הניתוח.

התמותה
בסך הכל, 33 (91.7%) חולדות שרדו עד לנקודת הקצה המתוכננת של המחקר. כל החולדות שעברו המתת חסד מוקדמת עברו נמק על ידי וטרינר. שתי חולדות הומתו תוך 24 שעות. RYGB אחד היה דלקת ריאות שאיפה וחולדה מזויפת אחת הייתה dehiscence פשיסטי עם מעי בלתי ניתן להזזה. עכברוש RYGB נוסף הומת בשבועיים עקב דליפה אנסטומוטית מהגסטרו-ג'ינוסטומיה. בסך הכל, 88.9% מחולדות RYGB שרדו כדי ללמוד נקודת קצה.

משקל גוף
לחולדות שעברו RYGB היה משקל נמוך יותר לאחר הניתוח מאשר חולדות מזויפות. איור 3 מדגים משקלים מוחלטים עבור חולדות לאחר הניתוח, ואילו איור 4 מדגים שינוי במשקל האחוזים לאחר הניתוח, שהיה משמעותי סטטיסטית בכל נקודות הזמן לאחר הניתוח. בגיל 14 שבועות, חולדות שעברו RYGB היה שינוי משקל אחוז ממוצע של 6.4% בעוד חולדות עם ניתוח מזויף היה 23.7% (p = 0.0001).

בדיקת עמידות לגלוקוז תוך-אישית
גלוקוז בדם בצום לא היה שונה באופן משמעותי בין כל הקוהורטות. עם זאת, השטח שמתחת לעקומה היה נמוך משמעותית בריי-ג'י-ג'י בהשוואה ל-13 שבועות (18.1 לעומת 23.8 מ"מ-h/L, p=0.046, איור 5)אך היה זהה ל-RYGB לעומת זיוף בשבוע אחד (20.8 לעומת 23.3 מ"מ-h/L, p=0.68).

Figure 1
איור 1: אנטומיה מעקף קיבה Roux-en-Y אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 2
איור 2: משקל מוחלט טרום-הניתוחי על תזונה עתירת שומן; RYGB, מעקף קיבה Roux-en-Y אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 3
איור 3: משקל מוחלט לאחר הניתוח על תזונה עתירת שומן; RYGB, מעקף קיבה Roux-en-Y אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 4
איור 4: שינוי במשקל אחוז לאחר הניתוח על דיאטה עתירת שומן; RYGB, מעקף קיבה Roux-en-Y אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 5
איור 5: בדיקת סובלנות גלוקוז תוך-אישית במעקף קיבה לעומת זיוף בגיל 13 שבועות. RYGB, מעקף קיבה Roux-en-Y אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

RYGB כרוך ביצירת כיס קיבה קטן (פחות מ-30 מ"ל), ויצירת איבר ביליופנקריאטי וגפי רו(איור 1). אצל בני אדם, הגפה הביליופנקריטית היא בדרך כלל 30 עד 50 ס"מ ומעבירה הפרשות משרידי הקיבה, הכבד והלבלב. איבר Roux הוא בדרך כלל 75 עד 150 ס"מ אורך והוא הערוץ העיקרי עבור מזון בליעה. הערוץ המשותף הוא דיסטל המעי הדק הנותר למקום שבו שני הגפיים להצטרף והוא המקום שבו רוב העיכול והספיגה להתרחש, כמו אנזימי הלבלב ומרה לערבב עם מזון ingested17.

המנגנון של ירידה במשקל RYGB הוא multimodal. כיס הקיבה הקטן מפחית את צריכת המזון באמצעות הגבלה מכנית. המעקף גורם לרכיב לא מתאים שכן חלק משמעותי מהמעי הדק אינו סופג קלוריות וחומרים מזינים. לאחרונה, מחקרים הראו כי הורמוני המעיים לשחק תפקיד משמעותי ירידה במשקל לאחר RYGB גם כן. אלה הם בעיקר דרך גרלין, פפטיד-YY, כולציסטוקינין (CCK), ומסלולי הורמון GLP-118.

מודלים חולדה לספק שיטה רבת עוצמה ללמוד את המנגנונים מאחורי המשקל ואת ההשפעות המטבוליות של RYGB. במאמר זה, אנו מציגים פרוטוקול RYGB בעל תמותה נמוכה עם ירידה משמעותית במשקל והשפעות מטבוליות. ברגע שהמפעיל הכיר את הטכניקה, ההליך לקח בערך 90 דקות לבצע. הפרוטוקול יכול גם להיות שונה עם אורך גפיים biliopancreatic ו Roux ארוך יותר כדי להגדיל פוטנציאל לירידה במשקל והשפעה מטבולית. יתר על כן, זה מבחינה טכנית יותר ריאלי מאשר מודלים אחרים כפי שהוא מאפשר את השימוש של מהדקים כירורגיים כדי להשיג hemostasis ולמזער את הזמן האופרטיבי. מודלים הנתמכים על חלוקה חדה של הקיבה מבלי להיידד גורמים לעתים קרובות לתמותה גבוהה יותר עקב אובדן דם משמעותי. הכישורים הטכניים הנדרשים לביצוע ההליך היו קלים יחסית לרכישה, ולומדים הצליחו לבצע את ההליך בנוחות לאחר כחמישה עד עשרה הליכים ללא התאוששות.

אחד הצעדים הקריטיים של פרוטוקול זה הוא להגביל את איבוד הדם במהלך גיוס הקיבה. חשוב להשתמש בזהירות של קשירה תרמית בשילוב עם קשירת תפר של כלי שיט. חשוב גם לבצע לפחות מחצית ההיקף של anastomoses באופן מופרע. זה מונע הקפדה מוגזמת על anastomoses. יתר על כן, בדיקת דליפות היא קריטית כמו אלה יכולים להוביל אלח דם ומוות. לפני סגירת הבטן, זה חיוני כי האונה השמאלית של הכבד ממוקמת במצב הטבעי שלה, חיצוני וכי אין סיבוב במעי או בבטן כמו זה יכול להוביל איסכמיה הקרביים.

טיפול לאחר הניתוח חיוני לפרוטוקול זה. פלטפורמות תיל מוגבהות נדרשות הן בתקופות הצום והן בתקופה שלאחר הניתוח, שכן צריכת חומר מוצק מובילה לחסימות אנסטופוטיות. חשוב מאוד לספק נוזל תת עורי כמו החולדות לא יכול לסבול נוזלי הפה בתקופה שלאחר הניתוח המיידי. החולדות צריכות להתאקלם לטיפול בהידרציה אוראלית ותזונה נוזלית כמו חולדות עשויות להימנע דיאטות חדשות עקב אסוציאציות עם כאב לאחר הניתוח. פרוטוקול תזונתי זה תורם לירידה משמעותית במשקל בתקופה שלאחר הניתוח המיידית הן בקבוצת RYGB והן ב- sham group, והתאוששות המשקל בקבוצת השאיוף ארכה כחמישה שבועות. עם זאת, הקפדה על פרוטוקול זה לאחר הניתוח חיונית כדי להפחית את התחלואה והתמותה לאחר RYGB. בנוסף, חשוב לזהות בדיקה תכופה של החולדות באמצעות סולם גרימס ראט. במחקר שלנו, חולדה אחת פיתחה דליפה אנסטומוטית מאוחרת אשר זוהתה במהירות באמצעות סולם זה ואפשרה המתת חסד מוקדמת כדי להפחית את הסבל.

אחד היתרונות של שיטה זו הוא כי התוצאה היא כיס קטן יותר באמצעות מהדקים כירורגיים כדי להפחית את הדימום בקיבה. כאשר ניסינו לחלק בחדות את הקיבה ללא מהדקים, זה מוביל לדימום מוגזם ושיעור תמותה גבוה בהרבה. עם זאת, זה גם מוביל להסרת forestomach, וזה עלול להוביל לשינויים פיזיולוגיים שונים מאלה של RYGB אנושי. עם זאת, forestomach הוא ייחודי מכרסמים ואינו מכיל בלוטות, ולא צריך לגרום לשינויים בהורמוני המעיים.

המגבלה החשובה ביותר של שיטה זו היא שהיא דורשת שני מהדקים כירורגיים לכל חולדה, אשר יכול להיות יקר. עם זאת, תוצאות הישרדות מצוינות עשויות להפחית את העלות על ידי דרישת פחות חולדות למחקר, וכתוצאה מכך ניצול טוב יותר של מתקני גידול, ציוד כירורגי ואנשי מחקר.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

אתיקון סיפק שני מהדקי חיתוך ליניאריים בקוצר 45 מ"מ, מטענים מרובים של מהדקים בקוצר 3.5 מ"מ ותפרים פוליפרופילן 6-0. למחברים אין ניגודי עניינים אחרים להצהיר עליהם.

Acknowledgments

מחקר זה מומן על ידי האגודה האמריקאית לחקר ניתוחים מטבוליים ובריאטריים. אתיקון סיפק באדיבות תפרים, מהדקים וקליפים. מחקר הדוקטורט של המחבר הראשי מומן על ידי תוכנית החוקרים של אוניברסיטת אלברטה והמלגה הקלינאית של אלברטה Innovates. ברצוננו גם להודות למישל טראן על האיור הרפואי שלה לאנטומיה של RYGB.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
2-0 Silk Sutures Ethicon K533
3-0 Vicryl Sutures Ethicon J219H
4% Isoflurane N/A N/A
5% Dextrose and 0.9% Sodium Chloride Solution - 1000 mL Baxter 2B1064
50 mL Conical Centrifuge Tubes Fisher Scientific 14-432-22
6-0 Prolene Sutures Ethicon 8805H
Anesthetic Machine N/A N/A
Animal Hair Shaver N/A N/A
Betadine Solution N/A N/A
Castrojievo Needle Holder with lock 14 cm (smooth curved) World Precision Instruments 503258
ECHELON FLEX Articulating Endoscopic Linear Cutter Ethicon EC45A
Economy Tweezers #4 World Precision Instruments 501978
ENDOPATH ETS Articulating Linear Cutter 45mm Reloads Ethicon 6R45B
Far Infrared Warming Pad Controller with warming pad (15.2 cm W x 20.3 cm L), pad temperature probe, and 10 disposable, non-sterile sleeve protectors Kent Scientific RT-0515
Large Rat Elizabethan Collar Kent Scientific EC404VL-10
Liquid Diet Feeding Tube (150 mL) Bio-Serv 9007
Liquid Diet Feeding Tube Holder (short adjustable) Bio-Serv 9015
Micro Mosquito Forceps World Precision Instruments 500452
Micro Scissors World Precision Instruments 503365
Mouse Diet, High Fat Fat Calories (60%), Soft Pellets Bio-Serv S3282
No. 11 Blade and Scalpel Handle N/A N/A
OPMI Vario Surgical Microscope ZEISS S88
Raised Floor Grid Tecniplast GM500150 Raised Floor Grid
Rodent Liquid Diet, Lieber-DeCarli '82, Control, 4 Liters/Bag Bio-Serv F1259
Sodium Chloride Irrigation 0.9% Solution - 500 mL Baxter JF7633
Sterile Cotton Swabs N/A N/A
Sterile Drape N/A N/A
Sterile Towel N/A N/A
Thermal Cautery Unit World Precision Instruments 501293

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. World Health Organization. Obesity and Overweight. , Available from: http://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/obesity-and-overweight (2018).
  2. Courcoulas, A. P., et al. Three-year outcomes of bariatric surgery vs lifestyle intervention for type 2 diabetes mellitus treatment. JAMA Surgery. 15213 (10), 1-9 (2015).
  3. Ardestani, A., Rhoads, D., Tavakkoli, A. Insulin cessation and diabetes remission after bariatric surgery in adults with insulin-treated type 2 diabetes. Diabetes Care. 38 (4), 659-664 (2015).
  4. Casella, G., et al. Ten-year duration of type 2 diabetes as prognostic factor for remission after sleeve gastrectomy. Surgery for Obesity and Related Diseases. 7 (6), 697-702 (2011).
  5. Panunzi, S., De Gaetano, A., Carnicelli, A., Mingrone, G. Predictors of remission of diabetes mellitus in severely obese individuals undergoing bariatric surgery. Annals of Surgery. 261 (3), 459-467 (2015).
  6. Edelman, S., et al. Control of type 2 diabetes after 1 year of laparoscopic adjustable gastric banding in the helping evaluate reduction in obesity (HERO) study. Diabetes, Obesity and Metabolism. 16 (10), 1009-1015 (2014).
  7. Mingrone, G., et al. Metabolic surgery versus conventional medical therapy in patients with type 2 diabetes: 10-year follow-up of an open-label, single-centre, randomised controlled trial. The Lancet. 397 (10271), 293-304 (2021).
  8. Thaler, J. P., Cummings, D. E. Minireview: Hormonal and metabolic mechanisms of diabetes remission after gastrointestinal surgery. Endocrinology. 150 (6), 2518-2525 (2009).
  9. Mingrone, G., Castagneto-Gissey, L. Mechanisms of early improvement / resolution of type 2 diabetes after bariatric surgery. Diabetes and Metabolism. 35 (6), 518-523 (2009).
  10. Arapis, K., et al. Remodeling of the residual gastric mucosa after Roux-en-Y gastric bypass or vertical sleeve gastrectomy in diet-induced obese rats. PloS One. 10 (3), 012414 (2015).
  11. Bruinsma, B. G., Uygun, K., Yarmush, M. L., Saeidi, N. Surgical models of Roux-en-Y gastric bypass surgery and sleeve gastrectomy in rats and mice. Nature Protocols. 10 (3), 495-507 (2015).
  12. Bueter, M., et al. Roux-en-Y gastric bypass operation in rats protocol. Journal of visualized experiments : JoVE. (64), (2012).
  13. Stevenson, M., Lee, J., Lau, R. G., Brathwaite, C. E. M., Ragolia, L. Surgical mouse models of vertical sleeve gastrectomy and Roux-en Y gastric bypass: a Review. Obesity Surgery. , (2019).
  14. Hao, Z., et al. Reprogramming of defended body weight after Roux-En-Y gastric bypass surgery in diet-induced obese mice. Obesity. 24 (3), 654-660 (2016).
  15. McErlane, S. Adult rodent anesthesia SOP. UBC Animal Care Guidelines. , Available from: https://animalcare.ubc.ca/sites/default/files/documents/ACC-01-2017_Anesthesia.pdf (2017).
  16. Sotocinal, S. G., et al. The Rat Grimace Scale: a partially automated method for quantifying pain in the laboratory rat via facial expressions. Molecular pain. , 1-10 (2011).
  17. Elder, K. A., Wolfe, B. M. Bariatric surgery: A review of procedures and outcomes. Gastroenterology. 132 (6), 2253-2271 (2007).
  18. Lim, R. B. Bariatric procedures for the management of severe obesity: Descriptions. UpToDate. , Available from: https://www.uptodate.com/ (2017).

Tags

רפואה גיליון 174 מעקף קיבה Roux-en-Y מעקף קיבה ניתוח מטבולי ניתוח בריאטרי חולדה
פרוטוקול מעקף קיבה Roux-en-Y בחולדות באמצעות מהדקים ליניאריים
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Dang, J. T., Mocanu, V., Fang, B.,… More

Dang, J. T., Mocanu, V., Fang, B., Laffin, M., Karmali, S., Madsen, K., Birch, D. W. A Protocol for Roux-en-Y Gastric Bypass in Rats using Linear Staplers. J. Vis. Exp. (174), e62575, doi:10.3791/62575 (2021).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter