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Methodenartikel

Eine modifizierte einfache Methode zur Induktion von Myokardinfarkt bei Mäusen

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DOI:

10.3791/63042

3. Dezember 2021

* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Unter angemessener Anästhesie wurde das Mäuseherz durch den Interkostalraum externalisiert, und der Myokardinfarkt wurde erfolgreich durch Ligatur der linken vorderen absteigenden Arterie (LAD) unter Verwendung von Materialien induziert, die in den meisten Labors leicht verfügbar sind.

Zusammenfassung

Der Myokardinfarkt (MI) stellt eine der häufigsten Todesursachen dar. MI-Modelle werden häufig für die Untersuchung der Pathomechanismen des Post-MI-Umbaus und die Bewertung neuartiger Therapeutika verwendet. Verschiedene Methoden (z. B. Isoproterenol-Behandlung, Kryoverletzung, Koronararterienligatur usw.) wurden verwendet, um einen Myokardinfarkt zu induzieren. Im Vergleich zur Isoproterenol-Behandlung und Kryoverletzung kann die Koronararterienligatur die ischämische Reaktion und den chronischen Umbau nach einem Myokardinfarkt besser widerspiegeln. Herkömmliche Methoden zur Koronarligatur bei Mäusen sind jedoch technisch anspruchsvoll. Die vorliegende Studie beschreibt ein einfaches und effizientes Verfahren zur Induktion von Myokardinfarkt bei Mäusen mit leicht verfügbaren Materialien. Die Brusthaut der Maus wurde unter stabiler Narkose aufgeschnitten. Das Herz wurde nach stumpfer Trennung des großen und kleinen Brustmuskels sofort durch den Interkostalraum externalisiert. Der linke vordere absteigende Ast (LAD) wurde 3 mm von seinem Ursprung entfernt mit einer 6-0-Naht ligiert. Nach LAD-Ligation zeigte die Färbung mit 2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid (TTC) eine erfolgreiche Induktion von MI und zeitliche Veränderungen der Post-MI-Narbengröße. In der Zwischenzeit zeigten die Ergebnisse der Überlebensanalyse eine offensichtliche Mortalität innerhalb von 7 Tagen nach einem Myokardinfarkt, hauptsächlich aufgrund einer Herzruptur. Darüber hinaus zeigte die echokardiographische Beurteilung nach MI eine erfolgreiche Induktion der kontraktilen Dysfunktion und des ventrikulären Remodelings. Einmal gemeistert, kann ein MI-Modell innerhalb von 2-3 Minuten mit leicht verfügbaren Materialien in Mäusen etabliert werden.

Einleitung

Der Myokardinfarkt (MI) stellt weltweit eine der häufigsten Todes- und Invaliditätsursachen dar 1,2,3,4,5. Trotz rechtzeitiger Reperfusion fehlt es derzeit an wirksamen Therapien zur Behandlung des kardialen Umbaus nach einem Myokardinfarkt. Dementsprechend wurden erhebliche Anstrengungen unternommen, um MI 6,7,8 mechanistisch zu erforschen und therapeutisch zu nutzen. Bemerkenswert ist, dass die Etablierung von MI....

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Protokoll

Die Tierversuche werden mit allen erforderlichen Genehmigungen der Ethikkommission für das Wohlergehen von Labortieren des Renji-Krankenhauses, Shanghai Jiao Tong University, School of Medicine (R52021-0506) durchgeführt. In der Studie wurden weibliche und männliche C57BL/6J-Mäuse im Alter zwischen 8 und 10 Wochen verwendet.

1. Vorbereitung des vereinfachten Anästhesiegerätes (OPTIONAL)

HINWEIS: Dies ist eine optionale präoperative Einrichtung und kann durch eine titrierbare Anästhesie ersetzt werden, wie in Abschnitt 2 erwähnt. Die institutionelle Ethikkommission für Tiere und die Tierärzte sollte....

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Ergebnisse

Das Versuchsprotokoll und einige der kritischen Schritte sind in Abbildung 1 dargestellt. Das vereinfachte Anästhesiegerät induzierte eine Anästhesie. Wie in Abbildung 2A gezeigt, war die induzierte Anästhesie stabil, was sich in den regelmäßigen Atemfrequenzen widerspiegelte (variierte zwischen 90 und 107 Atemzügen/min bei den getesteten Mäusen). Nach der Ligatur der Koronararterien zeigte die TTC-Färbeanalyse eine erfolgreiche Induktion des Myokardinfarkts und.......

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Diskussion

Der vorliegende Bericht demonstrierte ein einfaches Protokoll für die Induktion von Myokardinfarkt bei Mäusen mit leicht verfügbaren Materialien, das von einer von Gao16 berichteten Methode modifiziert wurde. Murine MI-Modelle sind unverzichtbar für die mechanistische Exploration und das Screening von Medikamenten auf Post-MI-Dysfunktion und -Remodeling12. Unter den bestehenden Techniken zur Induktion von Myokardinfarkten ist die Koronararterienligatur die am häufigsten pra.......

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Offenlegungen

Die Autoren haben nichts zu verraten.

Danksagungen

Diese Arbeit wurde durch Zuschüsse der National Natural Science Foundation of China (81930007, 81625002, 81800307, 81470389, 81500221, 81770238), des Shanghai Outstanding Academic Leaders Program (18XD1402400), der Science and Technology Commission of Shanghai Municipality (201409005200), des Shanghai Pujiang Talent Program (2020PJD030) und der China Postdoctoral Science Foundation (2020M671161, BX20190216) unterstützt.

....

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
2,3,5-TriphenyltetrazoliumchloridSIGMAT8877-25GTTC Färbung
4-0 SeidennahtYUANKANG4-0Chirurgisches Instrument
AutoklavHIRAYAMAHVE-50Sterilisation für feste
BuprenorphinQinghai Pharmaceutical FACTORY Co., Ltd.H10940181postoperative Schmerzen zu reduzieren
ZentrifugationsröhrchenBiological Hope1850-K15ML
EnthaarungscremeZIKER BIOTECHNOLOGYZK-L2701Enthaarungsmittel für Labortiere
PinzetteRWDF12028Chirurgisches Instrument
GasfilterZHAOXINSA-493Bedienerschutz
IsofluranRWD20071302Wird für die Anästhesie
verwendet LichtquelleBeijing PDVLG-150BOperationslampe
Mikro-Moskito-HämostatFST13011-12Chirurgisches Instrument
NadelBINXIONG42180104Chirurgisches Instrument
Nadel und die 6-0 SeidennahtJIAHESC086Chirurgisches Instrument
NadelhalterShangHaiJZJ32030Chirurgisches Instrument
NadelhalterShangHaiJZJ32010Chirurgisches Instrument
Povidon-Jod-TupferSingleLadyGB26368-2010Hautdesinfektion
SchereCNSTRONGJYJ1030Chirurgisches Instrument
Sterile AugencremeShenyang Xingqi Pharmaceutical Co., Ltd.H10940177Hornhauttrockenheit zu verhindern
Ultrahochauflösendes Ultraschall-Bildgebungssystem für KleintiereVisualSonicsVevo 2100Echokardiographische Analyse

Referenzen

  1. Fu, Y., et al. A simple and efficient method for in vivo cardiac-specific gene manipulation by intramyocardial injection in mice. Journal of Visualized Experiments. (134), e57074(2018).
  2. Pell, S., Fayerweather, W. E.

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Nachdrucke und Genehmigungen

Tags

KoronararterienligaturMaus-MI-Modellventrikuläres RemodelingTTC-FärbungPost-MI-Remodelingkontraktile Dysfunktionechokardiographische BeurteilungHerzrupturintramyokardiale Injektion