Verschlimmerung der Myokardischämie bei Feinstaubexposition im Atherosklerose-Tiermodell

Zusammenfassung

Dieses Protokoll beschreibt ein zusammengesetztes Tiermodell mit Exposition gegenüber Feinstaub (PM), das die Myokardischämie mit Atherosklerose verschlimmert.

Zusammenfassung

Die durch Luftverschmutzung verursachten Gesundheitsprobleme (insbesondere Feinstaubbelastung) erhalten immer mehr Aufmerksamkeit, insbesondere bei Patienten mit Herz-Kreislauf-Erkrankungen, was komplizierte Erkrankungen verschlimmert und eine schlechte Prognose verursacht. Das einfache Expositionsmodell für Myokardischämie (MI) oder Feinstaub (PM) ist für solche Studien von Krankheiten mit mehreren Ursachen ungeeignet. Hier wurde eine Methode zum Aufbau eines zusammengesetzten Modells beschrieben, das PM-Exposition, Atherosklerose und Myokardischämie kombiniert. ApoE−^/− Mäuse wurden 16 Wochen lang mit einer fettreichen Diät gefüttert, um Atherosklerose zu entwickeln, eine tracheale Instillation von PM-Standardsuspension wurde durchgeführt, um die pulmonale Exposition von PM zu simulieren, und die linke vordere absteigende Koronararterie wurde eine Woche nach der letzten Exposition ligiert. Die Trachealinstillation von PM kann eine akute Lungenexposition simulieren und gleichzeitig die Kosten des Experiments erheblich senken. Die klassische linke vordere absteigende Arterienligatur mit nichtinvasiver Trachealintubation und einer neuen Hilfsexpansionsvorrichtung kann die Überlebensrate des Tieres sicherstellen und die Schwierigkeit der Operation reduzieren. Dieses Tiermodell kann die pathologischen Veränderungen des Myokardinfarkts des Patienten, die durch Luftverschmutzung verschlimmert werden, vernünftig simulieren und eine Referenz für die Konstruktion von Tiermodellen im Zusammenhang mit Studien mit Krankheiten mit mehreren Ursachen liefern.

Einleitung

Luftverschmutzung wurde mit einer hohen Gesamtmortalität in Verbindung gebracht und trug zu einer signifikanten Krankheitslast bei, die mehr war als die Summe aus Wasserverschmutzung, Bodenverschmutzung und beruflicher Exposition¹. Ein Bericht der WHO ergab, dass die Luftverschmutzung im Freien im Jahr 2016 weltweit 4,2 Millionen vorzeitige Todesfälle in Städten und ländlichen Gebieten verursachte². 91% der Menschen weltweit leben an Orten, an denen die Luftqualität die WHO-Richtwerte^{überschreitet 2}. Darüber hinaus gilt der Feinstaub (PM) (≤2,5 μm Durchmesser, PM_2,5) als die bedeutendst....

Protokoll

Alle hier beschriebenen Tieraktivitäten wurden von der Tierethikkommission des Instituts für chinesische Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences, genehmigt. Männliche ApoE−/− Mäuse (C57BL^/6 Hintergrund) im Alter von 6-8 Wochen wurden für die Studie verwendet.

1. Versuchsvorbereitung

1. Tribromethanol-Anästhetika (15 mg / ml) vorbereiten: 0,75 g Tribromethanol in 1 ml tert-Amylalkohol lösen (siehe Materialtabelle). Nach vollständiger Auflösung mit steriler Kochsalzlösung auf 50 ml verdünnen. Lagern Sie die Lösung bei 4 °C in einem sterilen Behälter und vermeiden Sie Lichte....

Ergebnisse

Die Mäuse wurden 24 h nach der Koronararterienligatur eingeschläfert, und das Blut wurde nach der Anästhesie gesammelt. Die Mäuse wurden durch Tribromethanol (gemäß Schritt 3.2) betäubt und die Blutprobe wurde aus dem retroorbitalen Sinus entnommen. Das Herz wurde entnommen und der Grad der Ischämie wurde durch 2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid (TTC)-Färbung untersucht (Abbildung 1). Normales Gewebe wird rot, wenn die TTC mit Succinat-Dehydrogenase reagiert, während das isch.......

Diskussion

Die Erstellung eines zusammengesetzten Tiermodells unterscheidet sich geringfügig vom Modell mit einer einzelnen MI. Die Aufrechterhaltung einer hohen Überlebensrate ist eine Herausforderung bei der Entwicklung des Verbundmodells. Der Schweregrad der Atherosklerose bei ApoE−^/− -Mäusen wird mit der Verlängerung der fettreichen Fütterungszeit^{schwerer 7}, und die Schwäche von Mäusen führt zu einer erhöhten Mortalität. Daher ist es notwendig, den Zustand der Mäuse während des Experiments kon.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
2,2,2-Tribromethanol	Sigma-Aldrich	T48402
Desinfektionsmittel mit 75 % Alkohol Beatmungsgerät
für Tiere	Shanghai Alcott Biotech	ALC-V8S
Wattestäbchen Sterile
Wattestäbchen für Babys			Steril mit einem Durchmesser von ca. 3 mm
Kulturschale	Corning	430597	150 mm x 25 mm
Dieselpartikel	National Institute of Standards Technology	1650b
Sezierbrett			ca. 25 x 17 cm. Das Präparierbrett kann durch ein Holzbrett der gleichen Größe ersetzt werden
Fettreiche Diät für Mäuse			Rezept: Eigelbpulver 10%, Schmalz 10%, Sterol 1%, Erhaltungsfutter 79%
Iodophor Desinfektionsmittel
LED-Strahler			5 V, 3 W, mit Schläuchen und Klemmen
Medizinisches Seidengarnknäuel	Shanghai Medical Suture Needle Factory Co., Ltd.	-	0-0
Medizinisches Klebeband	3M	1527C-0
Mikrovaskuläre hämostatische Pinzette	Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Fabrik für chirurgische Instrumente	W40350
Nadelhalter	Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Fabrik für chirurgische Instrumente JC32010
normale Kochsalzlösung
Ophthalmologische Schere	Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Chirurgische Instrumente Fabrik	Y00040
Ophthalmische Pinzette, 10cm, gebogen, mit Haken	Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Chirurgische Instrumente Fabrik	JD1080
Ophthalmische Pinzette, 10cm, gebogen, mit Zähnen	Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Chirurgische Instrumente Fabrik	JD1060
Pipettenspitzen	Axygen	T-200-Y-R-S	0-200 μ L
Pipette	eppendorf	3121000074	100 uL
Sicherheitsnadel			Ca. 4,5 cm lang, zur Herstellung von Brustöffnungswerkzeugen
für Kleintiere IV Kanülen	Baayen Gesundheitswesen Suzhou	BAAN-322025	IV Katheter 22FG x 25 MM
Nahtnadel mit Faden	Shanghai Medical Nahtnadel Factory Co., Ltd.	-	6-0, Nylonlinie
Nahtnadel mit Faden	JinHuan Medical	F503	5-0
Spritze			1 mL
Tert-Amylalkohol
Zoom-Stereomikroskop	Mshot	MZ62