Summary
Этот протокол описывает композитную модель животных с воздействием твердых частиц (ТЧ), которые усугубляют ишемию миокарда атеросклерозом.
Abstract
Проблемам со здоровьем, вызванным загрязнением воздуха (особенно загрязнением твердыми частицами), уделяется все больше внимания, особенно среди пациентов с сердечно-сосудистыми заболеваниями, что усугубляет сложные расстройства и вызывает плохой прогноз. Простая модель воздействия ишемии миокарда (ИМ) или твердых частиц (ТЧ) непригодна для таких исследований заболеваний с несколькими причинами. Здесь описан способ построения композитной модели, сочетающей воздействие ТЧ, атеросклероз и ишемию миокарда. Мышей ApoE−/− кормили диетой с высоким содержанием жиров в течение 16 недель для развития атеросклероза, трахеальную инстилляцию стандартной суспензии ТЧ проводили для имитации легочного воздействия ТЧ, а левую переднюю нисходящую коронарную артерию перевязывали через неделю после последнего воздействия. Трахеальная инстилляция ТЧ может имитировать острое воздействие легких при значительном снижении стоимости эксперимента; классическая перевязка левой передней нисходящей артерии с неинвазивной интубацией трахеи и новое вспомогательное расширительное устройство могут обеспечить выживаемость животного и снизить сложность операции. Эта животная модель может разумно имитировать патологические изменения инфаркта миокарда пациента, усугубленные загрязнением воздуха, и служить ориентиром для построения моделей животных, связанных с исследованиями, связанными с заболеваниями с несколькими причинами.
Introduction
Загрязнение воздуха было связано с высокой смертностью от всех причин и способствовало значительному бремени болезней больше, чем сумма загрязнения воды, загрязнения почвы и профессионального воздействия1. Доклад ВОЗ показал, что загрязнение наружного воздуха вызвало 4,2 миллиона преждевременных смертей как в городах, так и в сельских районах во всем мире в 2016году2. 91% людей во всем мире живут в местах, где качество воздуха превышает рекомендуемые ВОЗ пределы2. Кроме того, тонкодисперсные твердые частицы (ТЧ) (диаметр ≤2,5 мкм, ТЧ2,5) признаны наиболее значительной угрозой загрязнения воздуха для глобального общественногоздравоохранения3, особенно для людей, проживающих в городах стран с низким и средним уровнем дохода.
Неблагоприятное воздействие загрязнения воздуха на сердечно-сосудистые заболевания заслуживает большего внимания. Предыдущие исследования показали, что ТЧ приводит к повышенному риску сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ)4. Воздействие высоких концентраций ультрадисперсных частиц в течение нескольких часов может привести к повышению смертности от инфаркта миокарда. Для людей с инфарктом миокарда в анамнезе воздействие ультрадисперсных частиц может значительно увеличить риск рецидива5. Кроме того, общепризнано, что воздействие ТЧ ускоряет прогрессирование атеросклероза6.
Для медицинских исследований крайне важно выбрать подходящую модель животного. Простой атеросклероз животных модели7, ишемия миокарда животных модели8 и воздействие ТЧ на животных модели9 уже существуют. Мышь ApoE−/− (выбитый аполипопротеин Е) является традиционной моделью мыши, используемой в исследованиях атеросклероза. Способность очищать липопротеины плазмы у мышей ApoE−/− сильно нарушена. Диета с высоким содержанием жиров вызовет тяжелый атеросклероз, напоминающий диетическую зависимость от атеросклеротической болезни сердца, наблюдаемую у людей7. Перевязка левой передней нисходящей коронарной артерии (LAD) является классическим методом индуцирования ишемического события 8,10. Инфузия трахеи использовалась во многих исследованиях и выделяется из моделей воздействия11,12 из-за ее лучшего моделирования и более низкой стоимости.
Тем не менее, животные модели одного заболевания имеют значительные ограничения в научных исследованиях. Ишемия миокарда, вызванная просто лигированием LAD, не моделируется в реальной ситуации. В естественном состоянии ишемия миокарда обычно вызвана разрывом бляшек и закупоркой коронарных артерий13. Пациенты с ишемической кардиомиопатией обычно имеют атеросклеротические основные поражения13. Существуют также нарушения липидного обмена и воспалительные реакции в организме14. Поэтому ишемия, вызванная физическими факторами или в естественных условиях, имеет разные патологические проявления. Существующие исследования показали, что инфаркт и воспаление в моделях ишемии миокарда при атеросклерозе более тяжелые15,16. Воздействие ПМ может еще больше усугубить атеросклероз и ишемию миокарда, вызывая воспаление и окислительный стресс1. Три фактора обычно сосуществуют в естественном состоянии, поэтому фактическую ситуацию можно лучше смоделировать с помощью сложной модели.
Этот протокол описывает разработку животной модели ишемии миокарда (ИМ), сочетающей атеросклероз (АС) и острое воздействие ТЧ. Мышей ApoE−/− кормили диетой с высоким содержанием жиров, чтобы вызвать атеросклероз. Легочное воздействие ТЧ имитировалось капанием суспензии ТЧ через трахею. Лигирование LAD у мышей использовалось для индуцирования ишемии миокарда. Эти методы были объединены и оптимизированы для лучшего моделирования болезненного состояния и улучшения выживаемости животных. Не требуется большой экспозиционный блок или аппарат для газовой анестезии, что делает эксперимент простым в выполнении. Эта модель может быть использована для изучения влияния воздействия ТЧ в загрязнении воздуха на атеросклероз и ишемическую кардиомиопатию и проведения исследований новых препаратов, разработанных для лечения заболеваний с такими сложными факторами.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Все виды деятельности животных, описанные здесь, были одобрены Комитетом по этике животных Института китайской Материи Медики Китайской академии китайских медицинских наук. Для исследования использовались самцы мышей ApoE−/− (фон C57BL/6) в возрасте 6-8 недель.
1. Экспериментальная подготовка
- Готовят анестетики трибромэтанола (15 мг/мл): растворяют 0,75 г трибромэтанола в 1 мл трет-амилового спирта (см. Таблицу материалов). После полного растворения разбавляют его до 50 мл стерильным физиологическим раствором. Храните раствор при 4 °C в стерильном контейнере и избегайте воздействия света.
ПРИМЕЧАНИЕ: В этом протоколе трибромэтанол использовался из-за оптимального времени восстановления анестезии и выживаемости животных. Следуйте рекомендациям местного комитета по этике животных при выборе режима анестезии. - Приготовить суспензию ПМ: измерьте 5 мг ДПМ ( твердых частиц дизельного топлива, см. Таблицу материалов) в 10 мл центрифужных трубок. Добавьте 5 мл обычного физиологического раствора и переверните трубку вверх дном, чтобы хорошо перемешать. Используйте парафиновую пленку для герметизации трубки, а затем поместите ее в ультразвуковой очиститель на 2-3 ч (40 кГц, 80 Вт) для ультразвукового разрыва.
ПРИМЕЧАНИЕ: Суспензия должна быть однородной и свободной от частиц агломератов. Хорошо встряхните перед употреблением.
2. Индукция атеросклероза у мышей
- Кормите мышей с высоким содержанием жиров (порошок яичного желтка 10%, сало 10%, стерин 1%, поддерживающий корм 79%, см. Таблицу материалов) в течение 12 недель.
- Чтобы оценить прогресс атеросклероза, случайным образом выберите 2-3 мышей и проверьте, есть ли бляшка в дуге аорты, путем ультразвуковой визуализации или прямого анатомического наблюдения17.
ПРИМЕЧАНИЕ: Для анатомического наблюдения животных отбирали путем случайной выборки и усыпляли после обезболивания. Затем их грудная полость была открыта, и кровеносные сосуды были непосредственно визуализированы. Анатомическое наблюдение обычно более надежно, потому что ультразвуковая визуализация может не обнаружить все бляшки. - После того, как атеросклероз сформировался, подготовьте мышей к следующему шагу.
3. Оротрахеальная интубация и острое воздействие твердых частиц
ПРИМЕЧАНИЕ: PM будет подвергаться воздействию один раз в неделю в течение 4 недель после 12 недель кормления с высоким содержанием жиров и постоянно получать диету с высоким содержанием жиров.
- Подготовьте рассеченную доску (см. Таблицу материалов) резинкой, закрепляющей 1,5 см от верхнего края. Закрепите рассечение под углом 60° от плоскости стола.
- Обезболить мышь с помощью трибромэтанола анестетика путем внутрибрюшинной инъекции (0,1 мл на каждые 10 г массы тела). Через 2-3 мин переверните мышь, чтобы проверить, есть ли корректирующий рефлекс. Выполните защемление пальца ноги, чтобы подтвердить седацию. Нанесите стерильную смазку на глаза.
- Продезинфицируйте рассечение спиртовыми салфетками.
- Поместите обезболенную мышь в лежачее положение на доске и прикрепите верхние резцы к резинке.
- Используйте небольшой светодиодный прожектор (см. Таблицу материалов) с гибкой трубой. Сфокусируйте свет на трахее, которая находится примерно в средней точке подмышечной линии.
- Положите небольшой стерильный ватный тампон в рот мыши, затем сверните тампон, чтобы высунуть язык.
- Держите язык и осторожно подтяните его вверх, чтобы сделать ротовую полость, глоток и трахею в том же продольном направлении. Голосовая щель, которая является входом в трахею, будет показана как яркое пятно, которое открывается и закрывается с каждым вдохом.
- Продолжайте осторожно держать язык. Вставьте канюлю (22 г) в трахею мыши, целясь в голосовую щель, вытащив сердцевину иглы после того, как канюля будет вставлена в трахею.
- Используйте пипетку с небольшим количеством обычного физиологического раствора, чтобы проверить, правильно ли находится трубка в ласке. Если трубка находится в правильном положении, столб жидкости в пипетке будет подпрыгивать с каждым вдохом.
- Опустите 50 мкл суспензии ДПМ (подготовленной на этапе 1.2) в трубку с помощью пипетки. Суспензия будет естественным образом вдыхаться в легкие мыши, когда она дышит.
ПРИМЕЧАНИЕ: Чтобы обеспечить плавное дыхание, лучше давать мыши в два раза больше суспензии DPM (25 мкл на один раз), на расстоянии 10 с друг от друга. - Удалите внутреннюю иглу для домашних животных после воздействия ПМ. Подождите, пока мышь останется на грелках, пока она не придет в сознание (10-20 мин), а затем поместите обратно в домашнюю клетку.
4. Перевязка коронарных артерий
ПРИМЕЧАНИЕ: Операция моделирования ишемии миокарда (перевязка коронарной артерии) проводится на16-й неделе.
- Подготовьте хирургические инструменты. После автоклавирования храните все хирургические инструменты в герметичном ящике для инструментов. Замочите их в 75% спирте за 20-30 мин до операции.
- Постройте хирургическую платформу. Для достижения правильного наклона платформы используйте крышку чашки для клеточной культуры (150 мм х 25 мм). Сложите 0-0 шелка (длиной 10-15 см) пополам и прикрепите концы нити к верхней части наклонной платформы с помощью ленты для создания подвесной петли.
- Обезболивание мышей в соответствии с процедурой, описанной в шаге 3.2.
ПРИМЕЧАНИЕ: Между каждым введением трибромэтанола должен быть обеспечен интервал в 1 неделю. - Продезинфицируйте платформу спиртовыми салфетками.
- Поместите мышь в лежачее положение на интубационной платформе и зацепите верхние резцы за петлю подвески, описанную на этапе 4.2. Заклейте хвост, конечности и усы.
- Удалите волосы левой груди и часть прилегающей правой груди кремом для удаления волос перед операцией.
- Выполните оротрахеальную интубацию у мышей, следуя процедуре, описанной в шагах 3.4-3.8.
- Свяжите иглу для домашних животных с вентилятором животного (см. Таблицу материалов). Настройка вентилятора: частота дыхания - 120 раз/мин; соотношение ингаляция/дыхание - 1:1,1; приливный объем - 1,7 мл.
- Протрите кожу йодофором и спиртом для дезинфекции.
- Обнажите сердце. Сделайте разрез кожи на 0,5-1 см офтальмологическими ножницами и подтяжите мышцы (грудную поверхностную мышцу и зазубренную переднюю мышцу), чтобы обнажить ребра. Зажмите ребро офтальмологическим пинцетом (крючками) и затем сделайте небольшой разрез в третьем межреберном пространстве (см. Таблицу материалов). Сделайте рабочее окно с помощью самодельных инструментов для открывания сундука.
ПРИМЕЧАНИЕ: Порез кожи расположен примерно на одной трети мечевидного отростка и подмышечной линии. - Разорвать мембраны перикарда. Затем можно завязать LAD, выполнив шаги 4.11-4.14.
ПРИМЕЧАНИЕ: Если легочные доли блокируют обзор, протолкните его за сердце, используя небольшой стерильный ватный тампон. - Сначала найдите LAD.
- Проведите стерильный 6-0 шелковый шов иглой с помощью микрососудистых гемостатических щипцов (см. Таблицу материалов). Пропустите шелк через миокард шириной 2 мм в область, где расположена коронарная артерия.
ПРИМЕЧАНИЕ: Не пытайтесь лигировать только LAD, что может вызвать серьезное интраоперационное кровоизлияние. - Поместите короткий кусочек стерильного шелка 5-0 между лигатурой и тканями миокарда, чтобы предотвратить разрыв ткани.
- Плотно свяжите LAD и небольшой пучок миокарда вокруг него. Перевязка считается успешной, когда передняя стенка левого желудочка (LV) бледнеет; Подъем сегмента ST можно наблюдать одновременно, если подключен аппарат для электрокардиограммы.
- Осторожно выдавите воздух из груди. Швы межреберных мышц и кожи последовательно стерильным 5-0 шелком.
ПРИМЕЧАНИЕ: Чтобы выдавить воздух из грудной клетки, закройте грудную клетку в момент расширения легких и используйте указательный и средний пальцы, чтобы осторожно сжать грудную клетку посередине и позволить воздуху выйти из-за пределов последнего шва. Шприцы также могут быть использованы для извлечения грудного газа.
ПРИМЕЧАНИЕ: Рекомендуется простой прерванный шов, так как мыши могут грызть шелк, когда они бодрствуют.
5. Восстановление
- Очистите все пятна крови после операции, иначе мышь подвергнется нападению других.
- Поместите мышь на грелку в боковое лежачее положение. Непрерывно контролируйте признаки мышей в течение 5-20 минут, пока они не восстановятся после анестезии. Время наблюдения зависит от состояния организма.
ПРИМЕЧАНИЕ: Мыши дышат легче в боковом лежачем положении. - Как только корректирующий рефлекс будет восстановлен, переведите мышей в чистые клетки восстановления на грелке с бутылкой с едой и водой. Продолжайте наблюдение в течение 15-30 мин, чтобы обеспечить выживание мыши. Держите мышь подальше от других, прежде чем она сможет двигаться полностью автономно.
- Для предотвращения раневой инфекции вводят пенициллин натрия внутримышечно в соответствии с желаемой дозой (1 000 000-1 50 000 Ед/кг). Для получения подробной информации, пожалуйста, обратитесь к маркировке препарата для преобразования дозировки.
- Поместите мышь обратно в домашнюю клетку. Продолжайте мониторинг в течение следующих 24 часов до сбора проб. Вводят анальгетики для длительных экспериментов.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Мышей усыпляли через 24 часа после перевязки коронарной артерии, а кровь собирали после анестезии. Мышей анестезировали трибромэтанолом (согласно шагу 3.2), а образец крови собирали из ретроорбитального синуса. Сердце было собрано, а степень ишемии исследовали путем окрашивания 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида (TTC) (рисунок 1).. Нормальные ткани становятся красными, когда TTC реагирует с сукцинатдегидрогеназой, в то время как ишемизированные ткани остаются бледными из-за снижения активности дегидрогеназы18. Сердце группы MI + PM имеет большую область инфаркта, чем у группы MI.
На рисунке 2 показаны бляшки в аорте масляным красным окрашиваниемO 17,19. Масло красного цвета O может точно окрашивать нейтральные жиры, такие как триглицериды в тканях17. Красные пятна на снимке указывают на бляшки. Аорта группы AS + PM имела больше бляшек, чем группа AS. На рисунке 3 показаны упомянутые самодельные инструменты для открывания сундуков и их использование.
Рисунок 1: Анализ окрашивания TTC в сердечной ткани мыши. Область инфаркта имеет белый цвет. Воздействие ПМ усугубляет ишемию миокарда. Sham: Не перенес операцию ИМ или воздействие ПМ; МИ: Перенес операцию ИМ, но не подвергался воздействию ПМ; MI+PM: Перенес как операцию ИМ, так и воздействие ПМ. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 2: Репрезентативные примеры окрашивания Oil Red O аорты мышей ApoE−/− . Налет в аорте был окрашен в красный цвет. Кормление с высоким содержанием жиров приводило к атеросклерозу у мышей ApoE-/- , а воздействие ТЧ усугубляло атеросклероз. Шам: мыши дикого типа с нормальным рационом; AS: ApoE-/- мыши с диетой с высоким содержанием жиров; AS+PM: ApoE-/- мыши с диетой с высоким содержанием жиров, страдали от воздействия ТЧ. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 3: Самодельные инструменты для открывания сундуков. Поперечно поместите инструменты для открывания сундука, чтобы открыть рабочее окно при использовании. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Создание составной животной модели несколько отличается от модели одного ИМ. Поддержание высокой выживаемости является сложной задачей при разработке композитной модели. Тяжесть атеросклероза у мышей ApoE−/− станет более тяжелой с продлением времени кормления с высоким содержанием жиров7, а слабость мышей приводит к повышенной смертности. Поэтому необходимо постоянно следить за состоянием мышей во время эксперимента и корректировать время индуцирования атеросклероза в соответствии с потребностями эксперимента.
Воздействие ТЧ может оказывать незначительное влияние на выживаемость мышей. Но повторная интубация трахеи вызовет внутриротовое кровотечение и отек у мышей20, что увеличит сложность последующих экспериментов. Поэтому необходимо усердно практиковать процесс интубации. Постарайтесь найти правильную позицию в как можно меньшем количестве попыток. Поскольку в этом эксперименте необходим длительный период, необходимо укорочение длинных резцов мыши. Необходимо избегать обрезки длинных резцов мыши во время операций, включая эндотрахеальную интубацию; в противном случае острые резцы могут поцарапать язык мыши и вызвать кровотечение.
Операция по перевязке LAD влияет на выживаемость мышей. Классическая и консервативная внутригрудная перевязка коронарной артерии LAD была выбрана предусмотрительно, а не «Эффективная модель»10 (метод, который выдавливает сердце из грудной клетки), чтобы улучшить долгосрочную выживаемость после операции с меньшими затратами на обучение.
Наиболее важными элементами в работе являются анестезия, поддержание дыхания мыши и предотвращение кровотечения. По сравнению с пентобарбиталом, трибромэтанол может значительно улучшить выживаемость мышей. Мышь будет без сознания через 2-5 минут после анестезии, и такая ситуация обычно длится до конца операции. Если мышь просыпается, вводится дополнительная инъекция анестетика 0,05 мл.
После того, как грудная полость открыта, вентилятор должен быть подключен до конца. Если интубация трахеи отваливается посередине, грудную полость следует немедленно заделать гемостатическими щипцами, а эксперимент можно продолжить после повторного подключения аппарата ИВЛ. Во время операции следует избегать кровотечений. Процесс кровотечения имеет тенденцию происходить в открытой грудной клетке, перикард удаляется, и LAD перевязывается. При возникновении кровотечения удалите кровь ватными тампонами. Выхлопные газы следует полностью сжимать при закрытии грудной полости, или использовать грудную трубку8 , когда грудная клетка закрыта.
Метод воздействия ТЧ у мышей в основном включает экспозиционную башню21, инъекцию в хвостовую вену22 и капельную трахею23. Экспозиционные башни имеют огромные затраты (из-за дорогого оборудования и огромного потребления ТЧ), в то время как инжекция хвостовой жилы сильно отличается от естественной картины воздействия ТЧ. Капельница трахеи является компромиссным способом. По сравнению с дыханием под воздействием ТЧ, капание трахеи является процессом пассивного воздействия. Распределение ТЧ в трахее и легких может отличаться от естественного состояния. Но как классический метод, капание трахеи количественно точно и легко осуществимо9. Хотя закапывание носа менее вредно, при закапывании носа часть суспензии может попасть в легкие, часть может попасть в пищеварительную систему, а часть останется в носовой полости. Поскольку суспензия ТЧ не вся попадает в легкие, носовая инстилляция не может имитировать воздействие загрязнения воздуха. Напротив, инъекция твердых частиц в трахею гарантирует, что все твердые частицы попадают непосредственно в легкие. Кроме того, полость носа меньше и требует более высокой концентрации суспензии для достижения желаемой дозы, что затрудняет контроль средней вводимой дозы.
Текущий протокол страдает определенными ограничениями. Сырьем суспензии ТЧ, используемой при инстилляции трахеи, являются стандартные твердые частицы дизельных двигателей. Он в основном содержит полициклические ароматические углеводороды, которые являются одним из основных компонентов ТЧ. Химические составляющие ТЧ из атмосферы включают нитраты, сульфаты, элементарный, органический углерод, органические соединения (например, полициклические ароматические углеводороды), биологические соединения (например, эндотоксин, фрагменты клеток) и металлы (например, железо, медь, никель, цинк и ванадий)24. Стандарт на твердые частицы может отличаться от твердых частиц в воздухе, что также не является идеальным выбором. Состав твердых частиц варьируется в зависимости от региона, климата и сезона. Таким образом, ТЧ, собранные из воздуха, являются неопределенными, в результате чего эксперименты сложно повторить с теми же результатами. Использование стандартов ТЧ могло бы дать исследованиям лучшую повторяемость.
В целом, была описана модель ишемии миокарда, возникающей на основе атеросклероза после воздействия твердых частиц. Эта модель может быть использована для изучения влияния загрязнения воздуха на сердечно-сосудистые заболевания и служить ориентиром для создания животной модели сложных заболеваний.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
У авторов нет конкурирующих финансовых интересов, которые можно было бы декларировать.
Acknowledgments
Эта модель была разработана при поддержке Национального фонда естественных наук Китая (Nos. 81673640, 81841001 и 81803814) и Главной национальной научно-технической программы Китая по инновационным лекарственным средствам (2017ZX09301012002 и 2017ZX09101002001-001-3).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 2,2,2-Tribromoethanol | Sigma-Aldrich | T48402 | |
| 75% alcohol disinfectant | |||
| Animal ventilator | Shanghai Alcott Biotech | ALC-V8S | |
| Cotton swabs | Sterile | ||
| Cotton swabs for babies | Sterile , Approximately 3 mm in diameter | ||
| Culture Dish | Corning | 430597 | 150 mm x 25 mm |
| Diesel Particulate Matter | National Institute of Standards Technology | 1650b | |
| Dissection board | About 25 x 17 cm. The dissecting board can be replaced with a wooden board of the same size | ||
| High-fat diet for mice | Prescription: egg yolk powder 10%, lard 10%, sterol 1%, maintenance feed 79% | ||
| Iodophor disinfectant | |||
| LED spotlight | 5 V, 3 W,with hoses and clamps | ||
| Medical silk yarn ball | Shanghai Medical Suture Needle Factory Co., Ltd. | - | 0-0 |
| Medical tape | 3M | 1527C-0 | |
| Micro Vascular Hemostatic Forceps | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | W40350 | |
| Needle Holders | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | JC32010 | |
| Normal saline | |||
| Ophthalmic Scissors | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | Y00040 | |
| Ophthalmic tweezer, 10cm, curved, with hooks | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | JD1080 | |
| Ophthalmic tweezer, 10cm, curved, with teeth | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | JD1060 | |
| Pipet Tips | Axygen | T-200-Y-R-S | 0-200 μL |
| Pipette | eppendorf | 3121000074 | 100 uL |
| Safety pin | Approximately 4.5 cm in length , for making chest opening tools | ||
| Small Animal I.V. Cannulas | Baayen healthcare suzhou | BAAN-322025 | I.V CATHETER 22FG x 25 MM |
| Suture needle with thread | Shanghai Medical Suture Needle Factory Co., Ltd. | - | 6-0,Nylon line |
| Suture needle with thread | JinHuan Medical | F503 | 5-0 |
| Syringe | 1 mL | ||
| Tert-amyl alcohol | |||
| Zoom-stereo microscope | Mshot | MZ62 |
References
- Al-Kindi, S. G., Brook, R. D., Biswal, S., Rajagopalan, S. Environmental determinants of cardiovascular disease: lessons learned from air pollution. Nature Reviews: Cardiology. 17 (10), 656-672 (2020).
- WHO. Ambient (outdoor) Air Pollution. WHO. , Available from: https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/ambient-(outdoor)-air-quality-and-health (2021).
- Kim, K. H., Kabir, E., Kabir, S. A review on the human health impact of airborne particulate matter. Environment International. 74, 136-143 (2015).
- Rajagopalan, S., Al-Kindi, S. G., Brook, R. D. Air pollution and cardiovascular disease: JACC State-of-the-Art Review. Journal of the American College of Cardiology. 72 (17), 2054-2070 (2018).
- Wolf, K., et al. Associations between short-term exposure to particulate matter and ultrafine particles and myocardial infarction in Augsburg, Germany. International Journal of Hygiene and Environmental Health. 218 (6), 535-542 (2015).
- Sun, Q., Hong, X., Wold, L. E. Cardiovascular effects of ambient particulate air pollution exposure. Circulation. 121 (25), 2755-2765 (2010).
- Emini Veseli, B., et al.
- Reichert, K., et al. Murine Left anterior descending (LAD) coronary artery ligation: An improved and simplified model for myocardial infarction. Journal of Visualized Experiments. (122), e55353 (2017).
- Lei, J., et al. The acute effect of diesel exhaust particles and different fractions exposure on blood coagulation function in mice. International Journal of Environmental Research and Public Health. 18 (8), 4136 (2021).
- Gao, E., et al. A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse. Circulation Research. 107 (12), 1445-1453 (2010).
- Pei, Y. H., et al. LncRNA PEAMIR inhibits apoptosis and inflammatory response in PM2.5 exposure aggravated myocardial ischemia/reperfusion injury as a competing endogenous RNA of miR-29b-3p. Nanotoxicology. 14 (5), 638-653 (2020).
- Jia, H., et al. PM2.5-induced pulmonary inflammation via activating of the NLRP3/caspase-1 signaling pathway. Environmental Toxicology. 36 (3), 298-307 (2021).
- Vogel, B., et al.
- Libby, P.
- Zhou, Z., et al. Excessive neutrophil extracellular trap formation aggravates acute myocardial infarction injury in Apolipoprotein E deficiency mice via the ROS-dependent pathway. Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2019, 1209307 (2019).
- Pluijmert, N. J., Bart, C. I., Bax, W. H., Quax, P. H. A., Atsma, D. E. Effects on cardiac function, remodeling and inflammation following myocardial ischemia-reperfusion injury or unreperfused myocardial infarction in hypercholesterolemic APOE*3-Leiden mice. Scientific Reports. 10 (1), 16601 (2020).
- Centa, M., Ketelhuth, D. F. J., Malin, S., Gistera, A.
- Benedek, A., et al. Use of TTC staining for the evaluation of tissue injury in the early phases of reperfusion after focal cerebral ischemia in rats. Brain Research. 1116 (1), 159-165 (2006).
- Mehlem, A., Hagberg, C. E., Muhl, L., Eriksson, U., Falkevall, A. Imaging of neutral lipids by oil red O for analyzing the metabolic status in health and disease. Nature Protocols. 8 (6), 1149-1154 (2013).
- Nelson, A. M., Nolan, K. E., Davis, I. C.
- Zheng, Z., et al. Exposure to fine airborne particulate matters induces hepatic fibrosis in murine models. Journal of Hepatology. 63 (6), 1397-1404 (2015).
- Bai, N., van Eeden, S. F. Systemic and vascular effects of circulating diesel exhaust particulate matter. Inhalation Toxicology. 25 (13), 725-734 (2013).
- Furuyama, A., Kanno, S., Kobayashi, T., Hirano, S. Extrapulmonary translocation of intratracheally instilled fine and ultrafine particles via direct and alveolar macrophage-associated routes. Archives of Toxicology. 83 (5), 429-437 (2009).
- Brunekreef, B., Holgate, S. T.
