In Ovo Intravaskuläre Injektion in Hühnerembryonen

Kai Jin; Jing Zhou; Gaoyuan Wu; Ziyi Lian; Zongyi Zhao; Shujian Zhou; Chen Chen; Hongyan Sun; Yingjie Niu; Qishenng Zuo; Yani Zhang; Jiuzhou Song; Guohong Chen; Bichun Li

doi:10.3791/63458

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Methodenartikel

In Ovo Intravaskuläre Injektion in Hühnerembryonen

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DOI:

10.3791/63458

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3. Juni 2022

Kai Jin¹^,² , Jing Zhou¹^,² , Gaoyuan Wu¹^,² , Ziyi Lian¹^,² , Zongyi Zhao¹^,² , Shujian Zhou¹^,² , Chen Chen¹^,² , Hongyan Sun¹^,² , Yingjie Niu¹^,² , Qishenng Zuo¹^,² , Yani Zhang¹^,² , Jiuzhou Song³ , Guohong Chen¹^,² , Bichun Li¹^,²^,⁴

¹Joint International Research Laboratory of Agriculture and Agri-Product Safety of Ministry of Education of China, Yangzhou University, ²Key Laboratory of Animal Breeding Reproduction and Molecular Design for Jiangsu Province, College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, ³Animal & Avian Sciences, University of Maryland, College Park, ⁴College of Biotechnology, Jiangsu University of Science and Technology

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Das übergeordnete Ziel dieses Papiers ist es, zu beschreiben, wie bei der intrazellulären Injektion von exogenen Materialien in Hühnerembryonen durchgeführt werden kann. Dieser Ansatz ist sehr nützlich, um die Entwicklungsbiologie von Hühnerembryonen zu untersuchen.

Zusammenfassung

Als klassisches Modellsystem der Embryonenbiologie wurde der Hühnerembryo verwendet, um die Entwicklung und Differenzierung von Embryonen zu untersuchen. Die Abgabe exogener Materialien in Hühnerembryonen hat einen großen Vorteil für die Untersuchung der Genfunktion, der transgenen Zucht und der Chimärenvorbereitung während der Embryonalentwicklung. Hier zeigen wir die Methode der intravaskulären In-Ovo-Injektion , bei der exogene Materialien wie Plasmidvektoren oder modifizierte primordiale Keimzellen (PGCs) in frühen Entwicklungsstadien in Spenderhühnerembryonen übertragen werden können. Die Ergebnisse zeigen, dass die intravaskuläre Injektion durch die dorsale Aorta und den Kopf es ermöglicht, injizierte Materialien durch das Blutkreislaufsystem in den gesamten Embryo zu diffundieren. Im vorgestellten Protokoll wurden die Wirksamkeit der exogenen Plasmid- und Lentiviralvektoreinführung sowie die Besiedlung injizierter exogener PGCs in der Empfängergonade durch Beobachtung der Fluoreszenz in den Embryonen bestimmt. Dieser Artikel beschreibt detaillierte Verfahren dieser Methode und bietet damit einen hervorragenden Ansatz zur Untersuchung der Genfunktion, der Embryonen- und Entwicklungsbiologie sowie der Gonaden-chimären Hühnerproduktion. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass dieser Artikel es den Forschern ermöglichen wird, bei der intravaskulären Injektion von exogenen Materialien in Hühnerembryonen mit großem Erfolg und Reproduzierbarkeit durchzuführen.

Einleitung

Hühnerembryonen werden seit Jahrhunderten in entwicklungspolitischen, immunologischen, pathologischen und anderen biologischen Anwendungen eingesetzt ^1,2,3. Sie haben viele inhärente Vorteile gegenüber anderen Tiermodellen in der Erforschung der Toxikologie und Zellbiologie⁴. Hühnerembryonen sind leicht zugänglich und können in vitro manipuliert und in jedem Entwicklungsstadium direkt beobachtet werden, was ein praktisches Modellsystem für die Embryonenforschung bietet.

Im Allgemeinen haben aktuelle Hühnerembryo-Abg....