Verwendung einer bipolaren Elektrode zur Erstellung eines Temporallappen-Epilepsie-Mausmodells durch elektrisches Anzünden der Amygdala

Summary

Die Amygdala spielt eine Schlüsselrolle bei der Temporallappenepilepsie, die in dieser Struktur entsteht und sich von ihr ausbreitet. Dieser Artikel enthält eine detaillierte Beschreibung der Herstellung von Tiefenhirnelektroden mit Aufzeichnungs- und Stimulationsfunktionen. Es stellt ein Modell der medialen Temporallappenepilepsie vor, das von der Amygdala ausgeht.

Abstract

Die Amygdala ist einer der häufigsten Ursachen von Anfällen, und das Amygdala-Mausmodell ist für die Darstellung von Epilepsie unerlässlich. Allerdings haben nur wenige Studien das experimentelle Protokoll im Detail beschrieben. Dieser Artikel veranschaulicht den gesamten Prozess der Herstellung von Amygdala-Epilepsiemodellen mit der Einführung einer Methode zur Herstellung bipolarer Elektroden. Diese Elektrode kann sowohl stimulieren als auch aufzeichnen und so Hirnverletzungen reduzieren, die durch die Implantation separater Elektroden zur Stimulation und Aufzeichnung verursacht werden. Für die Langzeitaufzeichnung des Elektroenzephalogramms (EEG) wurden Schleifringe verwendet, um die durch Kabelsalat und Abfall verursachte Unterbrechung der Aufzeichnung zu beseitigen.

Nach periodischer Stimulation (60 Hz, 1 s alle 15 Minuten) der basolateralen Amygdala (AP: 1,67 mm, L: 2,7 mm, V: 4,9 mm) für 19,83 ± 5,742 Mal wurde bei sechs Mäusen ein vollständiges Anzünden beobachtet (definiert als Induktion von drei kontinuierlichen Episoden des Grades V, klassifiziert nach der Racine-Skala). Ein intrakranielles EEG wurde während des gesamten Anzündprozesses aufgezeichnet, und nach dem Anzünden wurde ein epileptischer Ausfluss in der Amygdala beobachtet, der 20-70 s dauerte. Daher ist dies ein robustes Protokoll zur Modellierung von Epilepsie, die von der Amygdala ausgeht, und die Methode ist geeignet, die Rolle der Amygdala bei der Temporallappenepilepsie aufzudecken. Diese Forschung trägt zu zukünftigen Studien über die Mechanismen der mesialen Temporallappenepilepsie und neuartiger Antiepileptogene Medikamente bei.

Introduction

Die Temporallappenepilepsie (TLE) ist die häufigste Form der Epilepsie und birgt ein hohes Risiko für die Umwandlung in arzneimittelresistente Epilepsie. Operationen, wie die selektive Amygdalohippocampektomie, sind eine wirksame Behandlung für TLE, und die Epileptogenese und Iktogenese der Krankheit werden noch untersucht ^1,2. Es wurde gezeigt, dass die Pathogenese der TLE nicht nur im Hippocampus, sondern auch in großem Umfang in der Amygdala auftritt ^3,4. Zum Beispiel wurden sowohl Amygdalasklerose als auch Amygdala-Vergrößerung häufig als Ursprünge....

Protocol

Dieses Experiment wurde von der Ethikkommission für Versuchstiere des Xuanwu-Krankenhauses der Capital Medical University genehmigt. Alle Mäuse wurden im Tierlabor des Xuanwu-Krankenhauses der Capital Medical University gehalten. Dieses Protokoll gliedert sich in vier Teile. In den ersten beiden Teilen wird das Verfahren zum Aufbau der Elektrode und des Stromkreises unter Verwendung eines Schleifrings zum Verbinden der Elektroden und des EEG-Aufzeichnungs-/Stimulationsgeräts vorgestellt. Der dritte Teil beschreibt die Operationsmethode der Elektrodenimplantation, und der vierte Teil stellt die EEG-Aufzeichnungs- und Stimulationsparameter vor, die für das Amygdala-Epil....

Results

Die Elektrode und der Schaltkreis ermöglichen die Aufzeichnung des EEG und fungieren als Stimulation (Abbildung 1); Dieser Aufbau vermeidet die Komplexität, Elektroden separat zu implantieren, aufzuzeichnen und zu stimulieren, und minimiert die Schädigung des Hirngewebes. Die Anwendung von Schleifringen ermöglicht die Elektrodenverbindung mit allen Arten von Geräten.

Wir führten eine Elektrodenimplantation an sechs gesunden erwachsenen männlichen C57BL/6-Mäusen du.......

Discussion

Epilepsie ist eine Gruppe von Krankheiten mit multiplen Manifestationen und vielfältigen Ursachen¹⁸; Es sollte beachtet werden, dass kein einziges Modell für alle Arten von Epilepsie verwendet werden kann, und die Forscher müssen ein geeignetes Modell für ihre spezifische Studie auswählen. Die vorliegende Studie stellt eine der am leichtesten zugänglichen Methoden der Elektrodenherstellung vor. Verschiedene Teile dieser Methode können angepasst werden, um sich an unterschiedliche Versuchsbedingung.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Alexa Fluor 488-konjugiertes Esel-Anti-Kaninchen-IgG-Invitrogen		A-21206
c-Fos-Antikörper		ab222699
Schädelbohrer	SANS	SA302
Zahnzement	NISSIN
EEG-Aufzeichnungs- und Stimulationsgerät	Neuracle Technology (Changzhou) Co., Ltd	NSHHFS-210803
bleifreier Zinndraht	BAKON
Stiftleiste / Buchsenleiste	XIANMISI		Abstand von 1,27 mm
Silberdraht	A-M Systeme	786000
Schleifring	Senring Electronics Co.,Ltd	SNM008-04
Wolframdraht	A-M Systeme	796000
ultrafeiner Mehrständerdraht	Shenzhen Chengxing Draht und	für Kabel UL10064-FEP
	BAKON	BK881