Methodenartikel

Generierung eines künstlichen Dezidualisierungsmodells der Maus mit Ovariektomie für die Endometrium-Dezidualisierungsforschung

DOI:

10.3791/64278

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27. Juli 2022

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1Center for Reproductive Medicine and Obstetrics and Gynecology, The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School, 2State Key Laboratory of Reproductive Medicine, Nanjing Medical University, 3Center for Molecular Reproductive Medicine, Nanjing University

* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

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Hier beschreiben wir die Methode zur Erzeugung eines künstlichen Dezidualisierungsmodells mit der ovariektomierten Maus, ein klassisches Endometrium-Dezidualisierungsexperiment im Forschungsgebiet der Endometrium-Dezidualisierung.

Zusammenfassung

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Die Endometriumdezidualisierung ist ein einzigartiger Differenzierungsprozess des Endometriums, der eng mit Menstruation und Schwangerschaft zusammenhängt. Eine Beeinträchtigung der Dezidualisierung führt zu verschiedenen Endometriumstörungen wie Unfruchtbarkeit, wiederholten Fehlgeburten und Frühgeburten. Die Entwicklung und Anwendung des Endometriumdezidualisierungsmodells in Reproduktionsstudien ist seit langem ein Highlight für Reproduktionsforscher. Die Maus wurde ausgiebig bei der Untersuchung der Reproduktion und Dezidualisierung eingesetzt. Es gibt drei gut etablierte Mausmodelle zur Dezidualisierung, nämlich die natürliche Schwangerschaftsdezidualisierung (NPD), die künstliche Dezidualisierung (AD) und die In-vitro-Dezidualisierung (IVD). Unter ihnen gilt AD als zuverlässiges Modell für die Dezidualisierung von Mäusen, das einfach zu implementieren und nahe an NPD ist. Diese Arbeit konzentriert sich auf eine modifizierte Methode des Generierungs- und Anwendungsprozesses des künstlichen Dezidualisierungsmodells der Maus mit Ovarektomie, um ovarielle Effekte zu vermeiden, die mit kleinen Varianzen innerhalb der Gruppe hochreproduzierbare Ergebnisse erzielen können. Diese Methode bietet ein gutes und zuverlässiges Tiermodell für die Untersuchung der Endometriumdezidualisierung.

Einleitung

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Mit der Entwicklung der humanassistierten Reproduktionstechnologie hat die derzeitige klinische Schwangerschaftsrate der In-vitro-Fertilisation-Embryotransfer (IVF-ET) die der natürlichen Schwangerschaft erreicht oder sogar übertroffen. Trotzdem werden viele Patientinnen in der klinischen Praxis der assistierten Reproduktion immer noch mehreren Embryotransfers unterzogen, erreichen jedoch nicht die gewünschte Schwangerschaft. Sein spezifischer molekularer Mechanismus ist jedoch noch unklar, so dass klinische Interventionen unwirksam sind, was eine der größten Herausforderungen für die Reproduktionsmedizin darstellt 1,2

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Protokoll

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Alle beschriebenen Tierversuche wurden vom Komitee für die Verwendung und Pflege von Tieren (Nr. 20171202) des Affiliated Drum Tower Hospital der Nanjing University Medical School genehmigt. Alle Vorgänge folgen den entsprechenden Richtlinien der Tierpflege- und -verwendungsbehörde sowie der nationalen Richtlinien.

HINWEIS: Die Mäuse wurden in einer spezifischen, pathogenfreien Umgebung (SPF) mit einer Temperatur von 22 °C ± 1 °C, einer relativen Luftfeuchtigkeit von 50 % ± 1 %, einem Hell-Dunkel-Zyklus von 12 h/12 h und freiem Zugang zu Futter und Wasser aufgezogen.

1. Ovarektomie der Maus

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Ergebnisse

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Die Indizes des Maus-Dezidualisierungsmodells umfassen die allgemeine Morphologie des Uterus, das Massenverhältnis des dezidualisierten und nicht dezidualisierten Uterus, die histologische Morphologie des Endometriums und das Expressionsniveau der Dezidualisierungsmarkermoleküle. Die allgemeine Morphologie des künstlichen dezidualisierten Uterus von Mäusen, die durch Öl induziert werden, ist näher an der des Uterus in der Schwangerschaft. Der Uteruskörper wird dick und die Gebärmutterhöhle wird kleiner als die nicht indu.......

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Diskussion

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Die Dezidualisierung bei Mäusen ist ein spontaner Prozess, der von der Anwesenheit von Embryonen abhängt, die sich vom Menschen unterscheiden. Es wurde jedoch festgestellt, dass künstliche Stimulation wie die Injektion von Glasperlen in die Gebärmutter und die Verletzung der Gebärmutter eine Dezidualisierung des Endometriums anstelle von Embryonen induzieren kann. Darüber hinaus fanden die Forscher heraus, dass viele Faktoren eine Dezidualisierung induzieren oder an der Dezidualisierung teilnehmen können, wie z. B. die I.......

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Offenlegungen

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Die Autoren haben nichts zu offenbaren.

Danksagungen

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Die Autoren bedanken sich für die Unterstützung durch die National Nature Science Foundation of China (82001629, XQS), das Youth Program of Natural Science Foundation of Jiangsu Province (BK20200116, XQS) und die Postdoctoral Research Funding der Provinz Jiangsu (2021K277B, XQS).

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
ÖstrogenSigmaE2758Hormonergänzung
ProgesteronSigmaP0130Hormonergänzung
Sesamöl SigmaS3547Hormonergänzung
Natrium-Pentobarbital Verifizierter Lieferant - Dainippon Sumitomo Pharma Co.,Ltd.Anästhesie
Meloxicam InjektionQilu Animal Health Products Co., LtdAnalgesie
Alkalisches Phophatase Färbekit (Kaplow's/Azo-Kopplungsmethode)SolarbioG1480Alkalische Phophatase Färbung
EosinServicebioG1005-2HE Färbung
HämatoxylinServicebioG1005-1HE
Färbung ChamQ Universal SYBR qPCR Master MixVazymeQ711-02qPCR
70% EthanolLirconZH1120090Desinfektion
IodophorRunzekangRZK-DFDesinfektion
Erythromycin AugensalbeGuangzhou BaiyunshanMäuse Augapfel schützen
4-0 NahtEthiconW329Schnittnaht
10% FormalinYuluL25010118Tissue fix
Verbindung mit optimaler SchnitttemperaturSakura4583Ssection
Trizol ReagenzAmbion15596018qPCR

Referenzen

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  1. Carson, S. A., Kallen, A. N. Diagnosis and management of infertility: A review. JAMA. 326 (1), 65-76 (2021).
  2. Yatsenko, S. A., Rajkovic, A. Genetics of human female infertility dagger. Biology of Reproduction. 101 (3), 549-566 (2019).
  3. Sang, Y., Li, Y., Xu, L., Li, D., Du, M.

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Schlagwörter

Artificial DecidualizationMouse ModelOvariectomy SurgeryEndometrial DecidualizationUterine Horn InjectionHormone SupplementationHematoxylin Eosin StainingAlkaline Phosphatase ActivityEndometrial DisordersAdenovirus Injection

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