Die vorliegende Arbeit beschreibt eine modifizierte Technik für die heterotope vaskularisierte Herztransplantation mit aktualisierter aseptischer Technik, Analgesie und Anästhesie.
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Methodenartikel
Ein modifiziertes heterotopes Herztransplantationsprotokoll der Maus, das den heutigen Standards der aseptischen Technik, Anästhesie und Analgesie entspricht
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Die Entwicklung experimenteller Modelle für die Herztransplantation bei Tieren hat zu vielen Fortschritten auf dem Gebiet der Immunologie und der Transplantation solider Organe beigetragen. Während das heterotope vaskularisierte Maus-Herztransplantationsmodell ursprünglich in Studien zur Transplantatabstoßung mit Kombinationen von nicht übereinstimmenden Inzucht-Mausstämmen verwendet wurde, kann der Zugang zu genetisch veränderten Stämmen und therapeutischen Modalitäten wichtige neue präklinische Erkenntnisse liefern. Grundsätzlich hat sich die chirurgische Methodik für diese Technik seit ihrer Entwicklung nicht geändert, insbesondere im Hinblick auf wichtige Faktoren wie aseptische Technik, Anästhesie und Analgesie, die wesentliche Auswirkungen auf die postoperative Morbidität und Mortalität haben. Darüber hinaus wird erwartet, dass Verbesserungen im perioperativen Management sowohl das Tierwohl als auch die Versuchsergebnisse verbessern werden. Dieser Artikel berichtet über ein Protokoll, das in Zusammenarbeit mit einem Fachexperten für Veterinäranästhesie entwickelt wurde, und beschreibt die Operationstechnik mit Schwerpunkt auf perioperativem Management. Darüber hinaus diskutieren wir die Auswirkungen dieser Verfeinerungen und geben Details zur Fehlerbehebung bei kritischen chirurgischen Schritten für dieses Verfahren.
Einleitung
Wir verdanken einen großen Teil unseres Verständnisses von Immunologie und Transplantation der Forschung, die auf experimentellen Modellen der Transplantation solider Organe an tierischen Probanden basiert. Seit der Erstbeschreibung der vaskularisierten Herztransplantation bei Säugetieren1 haben solche Modelle zum Wissen in einer Vielzahl von Bereichen beigetragen, darunter die therapeutische Anwendung der Hypothermie2, die Vorteile der Verwendung spezialisierter Nähte3 und Techniken für die Homotransplantation von Lunge und Herz4. Die Entwicklung von kardialen Transplantat....
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Protokoll
Diese Forschung wurde in Übereinstimmung mit dem Verhaltenskodex für die Pflege und Verwendung von Tieren für wissenschaftliche Zwecke15 durchgeführt und gemäß den Tierethikprotokollen RA/3/100/1568 und AE173 genehmigt (Tierethikkommission der Universität von Westaustralien bzw. Tierethikausschuss des Harry Perkins Institute of Medical Research). In der Materialtabelle finden Sie Einzelheiten zu allen Materialien, Instrumenten und Tieren, die in diesem Protokoll verwendet werden.
1. Vorbereitung des Tieres für die Operation
HINWEIS: Das Personal ist entweder....
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Ergebnisse
Um die Wirksamkeit der Operationstechnik bei der Förderung guter Ergebnisse der Wundheilung und der Genesung der Maus zu bestimmen, wurden in frühen Experimenten im Labor die Überlebenseigenschaften einer Reihe von Herztransplantaten mit unterschiedlicher Immunogenität für den Empfänger bestimmt. Dazu gehörten kongene (n = 5) und syngene (n = 5) Transplantate, die die gleichen MHC-Marker (Major Histocompatibility Complex) wie der Empfänger aufweisen, und Major Mismatch-Transplantate (n = 9), bei denen das Transplantat un.......
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Diskussion
Das orthotope Herztransplantationsmodell der Maus ist ein robustes präklinisches Modell, das in erster Linie verwendet wird, um die Auswirkungen einer MHC-Fehlanpassung auf das Ausmaß und die Art der immunologischen Abstoßung und in jüngerer Zeit die Auswirkungen der Transplantation auf den Erhalt der im Transplantatgewebe ansässigen Immunität zu untersuchen16. Während wir uns zunächst eng an das Protokoll von Corry et al.7 hielten, haben wir das Protokoll verfeinert, um Be.......
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Offenlegungen
Die Autoren haben keine Interessenkonflikte offenzulegen.
Danksagungen
Die Autoren bedanken sich bei den hervorragenden Bemühungen der Tierpfleger der University of Western Australia und des Harry Perkins Institute of Medical Research, die mit ihrem Engagement und ihrer Expertise zur Durchführbarkeit und zum Erfolg dieser Operationen beigetragen haben.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| 2030 Rycroft Spülkanüle 30 G | McFarlane | 56005HU | |
| Geflochtene chirurgische Seide 7-0 | |||
| Bulldog-Klemme gebogen - 35 mm | Roboz | RS-7441-5 | |
| Bupivacain 0.25% | |||
| Buprenorphin | |||
| Castroviejo Nadelhalter Verschluss gebogen - 145 mm | Haag-Streit | 11.62.15 | |
| Chlorhexidin 5% Lösung | Ebos | JJ61371 | |
| Applikator mit Wattespitze - 7,5 cm | Taube | SN109510 | |
| Ethanol 70% Lösung | Ebos | WH130192EE | |
| Gaze 5 x 5 cm weiß | Aero | AGS50 | |
| Gelfoam 80 mm x 125 mm | Pfizer | 7481D | |
| Haarschneider | Wahl | 9860L | |
| Heparin 1.000 IE in 1 mL | |||
| Iris SuperCut Schere gerade - 11,5 cm | Inka Chirurgie | 11550.11 | |
| Isofluran-Verdampfer | Darvall | 9176 | |
| Micro Bulldog-Klemme - 3,7 cm | Greman | 14119-G | |
| Mikroschere gebogen 105 mm | |||
| Mikroporen-OP-Klebeband aus Normalpapier - 2,5 cm breit | Ebos | 7810L | |
| Mikrochirurgische Schere - gebogene Spitze | |||
| Monofilament-Polypropylen-Naht - 5/0 | Surgipro | P-205-X | |
| Myweigh i101 Präzisionswaage 100 g x 0,005 g | Myweigh | Kit00053 | |
| Nadel - 30 g x 0,5 Zoll | BD | BD304000 | |
| Nadelhalter 15 cm gebogen "superfein" | Chirurgische Spezialisten | ST-B-15-8.2 | |
| Nylene 10/0 x 15 cm auf 3.8 mm 3/8 Kreis Rundkörper-Konus (Durchmesser 0.07mm) CV300 | |||
| Rundkörper-Nahtzange gebogen 0.3 mm 120 mm | B. Braun | FD281R | |
| Rundkörper-Nahtzange gerade 0.3 mm 120 mm | B. Braun | FD280R | |
| Federschere mit rundem Griff vannas str/12.5 cm | 15400-12 | ||
| Federschere-Cvd Sm Klingen | 15001-08 | ||
| Stevens Schere stumpf gerade 110 mm | |||
| OP-Rückwand | Harter laminierter Karton. 15 x 15 cm | ||
| OP-Abdecktücher | In zwei Größen geschnitten: 25 cm x 25 cm und 25 cm x 40 cm | ||
| Operationsmikroskop | |||
| Spritze - 1 mL | BD | 592696 | |
| Spritze - 3 mL | Leica | M651 | |
| Zahnzange | BD | 309657 | |
| University of Wisconsin Lösung | |||
| Warmhaltekissen | Ferninfrarot-Wärmekissen 20 x 25 cm | ||
| Westcott Federschere | |||
| Yasargil Clip applier Bajonett | Aesculap | FE582K | |
| Yasargil Titan Clip perm 6,6 mm | Aesculap | A19FT222T | |
| Mouse usage | |||
| Strain/SEX/Weight | Donor | Recipent | |
| BALB/c, weiblich, 19-23 g | 7 | 21 | |
| C57BL/6, weiblich, 17-20 g | 7 | ||
| CD45.1 BALB/c, weiblich, 17-21 g | 5 |
Referenzen
- Mann, F. C., Priestley, J. T., Markowitz, J., Yater, W. M. Transplantation of the intact mammalian heart. Archives of Surgery. 26 (2), 219-224 (1933).
- Neptune, W. B., Cookson, B. A., Bailey, C. P., Appler, R., Rajkowski, F. Complete homologous heart transplantation. A.M.A. Archives of Surgery.
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Nachdrucke und Genehmigungen
