Erforschung der Zwei-Kräuter-Kombinationsstrategie zur Behandlung verletzter PC12-Zellen

Jie Zhang; Yumei Yan; Fang Cheng; Feixiang Huang; Xingliang Xie; Yanmei Sheng

doi:10.3791/64721

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Methodenartikel

Erforschung der Zwei-Kräuter-Kombinationsstrategie zur Behandlung verletzter PC12-Zellen

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DOI:

10.3791/64721

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18. November 2022

Jie Zhang^*¹ , Yumei Yan^*¹ , Fang Cheng^*¹ , Feixiang Huang¹ , Xingliang Xie¹ , Yanmei Sheng¹

¹School of Pharmacy, Chengdu Medical College

^* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Dieses Protokoll bietet eine Kombinationsstrategie von zwei Kräutern zur Behandlung verletzter PC12-Zellen. Das Protokoll bietet eine Referenz für die Optimierung der besten Applikationsweise der Traditionellen Chinesischen Medizin (TCM).

Zusammenfassung

Im Hinblick auf die Vorteile der Kombination der Traditionellen Chinesischen Medizin (TCM) bei der Behandlung der zerebralen Ischämie untersuchten wir die Unterschiede in der Wirksamkeit und dem Mechanismus zwischen der Präparatkombination und der Komponentenkombination, um die Zwei-Kräuter-Kombinationsstrategie zur Behandlung verletzter PC12-Zellen zu untersuchen. Kobaltchlorid (CoCl₂) in Kombination mit einem glukosefreien Medium wurde verwendet, um eine oxidative Schädigung von PC12-Zellen zu induzieren. Anschließend wurde die optimale Kombination aus Astragalus mongholicus (Ast) und Erigeron breviscapus (Eri ) ausgewählt und nach einheitlichen Designmethoden kombiniert, nachdem ihre sichere und wirksame Konzentration auf PC12-Zellen überprüft worden war. Ferner umfasst die gescreente Komponentenkombination 10 μM Astragalosid A, 40 μM Scutellarin und 75 μM Chlorogensäure in zwei Kräutern. Dann wurden MTT, Annexin V-FITC/PI, Immunfluoreszenz und Western-Blot-Analyse verwendet, um die Wirksamkeit und den Mechanismus der Präparatekombination und der Komponentenkombination auf verletzten PC12-Zellen zu bewerten. Die Ergebnisse zeigten, dass die optimale Präparationskombination für das Zellüberleben eine Ast-Injektion und eine Eri-Kapsel mit einer Konzentration von 6:1,8 (μM) war. Die Komponentenkombination (10 μM Astragalosid A, 40 μM Scutellarin und 75 μM Chlorogensäure) war wirksamer als die Zubereitungskombination. Beide Kombinationen reduzierten die apoptotische Rate, die Fluoreszenzintensität von Caspase-3 und den Gehalt an intrazellulären reaktiven Sauerstoffspezies (ROS) erheblich. In der Zwischenzeit regulierten sie die Expressionsniveaus von p-Akt/Akt, Bcl-2/Bax und Nrf2 hoch. Diese Effekte waren in der Komponentenkombination deutlicher. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass beide Kombinationen die durch CoCl₂in Kombination mit einem glukosefreien Medium auf PC12-Zellen induzierte Schädigung hemmen und so das Zellüberleben fördern können. Die Effizienz der Komponentenkombination gegenüber der Präparationskombination kann jedoch auf eine stärkere Regulation des PI3K/Akt/Nrf2-Signalwegs zurückzuführen sein, der mit oxidativem Stress und Apoptose zusammenhängt.

Einleitung

Chronische zerebrale Ischämie, verursacht durch zerebrale Hypoperfusion, ist eine häufige Erkrankung bei Menschen mittleren Alters und älteren Menschen¹. Als langfristige okkulte Ischämie kann es zu einer fortschreitenden oder anhaltenden neurologischen Dysfunktion kommen. Zu den wichtigsten pathologischen Mechanismen gehören Zellapoptose und oxidative Schäden, die zu einer fortschreitenden oder anhaltenden neurologischen Dysfunktion führen. Dies ist die pathologische Grundlage der Alzheimer-Krankheit, der vaskulären Demenz und anderer Krankheiten und beeinträchtigt die Lebensqualität der Patienten erheblich. In der modernen Medizin mangelt es ....