Dissektion von Mäusen des gesamten zentralen und peripheren Nervensystems

Krystina Rhéaume; Zhiguo Chen; Yong Wang; Camille Plante; Dhanushka Hewa Bostanthirige; Maude Lévesque; Sameh Geha; Lu Q. Le; Jean-Philippe Brosseau

doi:10.3791/64974

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Methodenartikel

Dissektion von Mäusen des gesamten zentralen und peripheren Nervensystems

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DOI:

10.3791/64974

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24. Februar 2023

Krystina Rhéaume^*¹ , Zhiguo Chen^*² , Yong Wang^*² , Camille Plante¹ , Dhanushka Hewa Bostanthirige¹ , Maude Lévesque¹ , Sameh Geha³^,⁴ , Lu Q. Le²^,⁵^,⁶^,⁷ , Jean-Philippe Brosseau¹^,⁴

¹Department of Biochemistry and Functional Genomics, Université de Sherbrooke, ²Department of Dermatology, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, ³Department of Pathology, Université de Sherbrooke, ⁴Centre de Recherche du Centre Hospitalier de Universitaire de Sherbrooke, Université de Sherbrooke, ⁵Simmons Comprehensive Cancer Center, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, ⁶UTSW Comprehensive Neurofibromatosis Clinic, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, ⁷Hamon Center for Regenerative Science and Medicine, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas

^* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Hier stellen wir ein Protokoll vor, um die Dissektion des zentralen und peripheren Nervensystems von Mäusen abzuschließen. Die präparierten Gewebe werden in nachgelagerten Anwendungen, wie z.B. der Aufnahme von Bruttobildern oder der Histologie, weiter analysiert.

Zusammenfassung

Tiermodelle stellen das Arbeitspferd der Neurowissenschaften dar. Trotzdem gibt es heute immer noch kein Schritt-für-Schritt-Protokoll zur Sezierung eines kompletten Nervensystems von Nagetieren, noch gibt es ein vollständiges Schema, das es frei verfügbar darstellt. Es stehen nur Methoden zur Entnahme des Gehirns, des Rückenmarks, eines bestimmten Spinalganglion und des Ischiasnervs (separat) zur Verfügung. Hier finden Sie detaillierte Bilder und ein Schema des zentralen und peripheren murinen Nervensystems. Noch wichtiger ist, dass wir ein robustes Verfahren zur Durchführung der Dissektion skizzieren. Der 30-minütige Vordissektionsschritt ermöglicht die Isolierung des intakten Nervensystems innerhalb des Wirbels mit Muskeln, die von Eingeweiden und Haut befreit sind. Es folgt eine 2-4-stündige Dissektion unter einem Mikrodissektionsmikroskop, um das Rückenmark und die Thoraxnerven freizulegen und schließlich das gesamte zentrale und periphere Nervensystem vom Kadaver zu schälen. Dieses Protokoll stellt einen bedeutenden Schritt vorwärts bei der Erforschung der Anatomie und Pathophysiologie des Nervensystems weltweit dar. So können beispielsweise die präparierten Spinalganglien aus einem Neurofibromatose-Typ-I-Mausmodell für die Histologie weiterverarbeitet werden, um Veränderungen in der Tumorprogression zu entschlüsseln.

Einleitung

Das übergeordnete Ziel dieser Methode ist es, das zentrale und periphere Nervensystem einer Maus in einem Stück zu isolieren. Derzeit gibt es kein Protokoll, um das gesamte Nervensystem eines Nagetiers zu sezieren, um es auf globaler Ebene zu untersuchen. Neurowissenschaftler verwenden typischerweise den Ischiasnerv als Surrogat für jeden peripheren Nerv¹ und die Ganglien L3 bis L5² als Surrogat für alle Ganglien. Mit diesen Methoden ist es unmöglich zu schließen, ob die Ergebnisse spezifisch für den jeweiligen Nerv/Ganglion sind. Da bekannt ist, dass zumindest einige Nervenpathologien n....