Nichtinvasive intratracheale Lipopolysaccharid-Instillation bei Mäusen

Zusammenfassung

In dieser Arbeit schlagen wir ein Protokoll für die intratracheale Lipopolysaccharid-Abgabe (LPS) mittels nicht-invasiver oropharyngealer endotrachealer Intubation vor. Diese Methode minimiert das Trauma des chirurgischen Eingriffs für das Tier und gibt LPS genau in die Luftröhre und dann in die Lunge ab.

Zusammenfassung

Das Mausmodell der akuten Lungenschädigung (ALI), das durch Lipopolysaccharid (LPS) oder Endotoxin induziert wird, gehört nach wie vor zu den am häufigsten verwendeten Modellen in Tierstudien zur akuten Lungenschädigung oder akuten Entzündung. Die derzeit am häufigsten verwendeten Methoden in Mausmodellen für akute Lungenverletzungen sind eine intraperitoneale Injektion von LPS und eine Tracheotomie für die tracheale Infusion von LPS. Die erste Methode ist jedoch nicht zielgerichtet auf die Lunge ausgerichtet und schädigt andere Organe, und die letztere Methode induziert ein operatives Trauma, ein Infektionsrisiko und eine niedrige Überlebensrate. Hier empfehlen wir eine nicht-invasive oropharyngeale endotracheale Intubationsmethode für die LPS-Instillation bei Mäusen. Bei dieser Methode wird LPS nicht-invasiv durch die oropharyngeale Höhle in die Luftröhre eingeführt, um mit Hilfe einer Apparatur zur endotrachealen Intubation in die Lunge instilliert zu werden. Diese Methode gewährleistet nicht nur die gezielte Ausrichtung auf die Lunge, sondern vermeidet auch Schäden und das Risiko des Todes bei den Tieren. Wir gehen davon aus, dass dieser Ansatz im Bereich der akuten Lungenschädigung weit verbreitet sein wird.

Einleitung

Die akute Lungenschädigung (ALI) ist ein häufiges klinisches Syndrom. Unter einer Vielzahl von pathogenen Faktoren führt die Störung der physiologischen Barriere der Lungenepithelzellen und der vaskulären Endothelzellen zu einer erhöhten alveolären Permeabilität, wodurch eine verminderte Lungencompliance, ein Lungenödem und eine schwere Hypoxämie verursacht^{werden 1}. Das akute Atemnotsyndrom (ARDS) ist die schwerste Form der ALI. Unkontrollierte Entzündungen und Schäden durch oxidativen Stress gelten als Hauptursachen für ALI und das schwerere ARDS². Wenn Alveoladepithelzellen durch ein Trauma direkt verletzt werden, wird....

Protokoll

Das Tierversuchsprotokoll wurde vom Verwaltungsausschuss der Universität für Traditionelle Chinesische Medizin Chengdu geprüft und genehmigt (Aktenzeichen 2021-11). Für die vorliegende Studie wurden männliche C57/BL-Mäuse (20-25 g, 6-8 Wochen alt) verwendet. Die Mäuse wurden in einer Tierkammer gehalten und konnten während des Experiments frei trinken und essen.

1. Vorbereitung

1. Stellen Sie sicher, dass die Intubationsplattform aus einer Basis, einem Steigrohr, einer Büroklammer, zwei Gummibändern und einigen Schnüren besteht. Nehmen Sie eine Schnur, führen Sie die Schnur durch die beiden Löcher oben am Tragegurt u....

Ergebnisse

Die vorgeschlagene Methode zur LPS-Instillation in Mäusen wurde durch die Auswertung der Expression des inflammatorischen Zytokins TNF-α und des Trocken-Nass-Gewichtsverhältnisses der Lunge 12 h nach LPS-Instillation verifiziert. Es gab vier Gruppen im Experiment: Blindkontrolle (ohne Behandlung), chirurgische Intubation¹⁶, intranasale ^17,18 und nichtinvasive oropharyngeale Intubation (n = 6). Im Vergleich .......

Diskussion

Zunächst suchten wir in der Mundhöhle, um die Lage der Luftröhre^{zu finden 19}. Dabei stellten wir jedoch fest, dass die Luftröhre von C57/BL-Mäusen schmal ist, was es schwierig macht, mit dieser Methode ohne die Hilfe von Geräten wie einem Endoskop²⁰ die richtige Stelle zu finden. Bei weiteren Untersuchungen stellten wir fest, dass das Licht der Intubatorlampe die Oberfläche des Körpers durchdringen konnte, so dass der Bediener die Position der Kanüle²¹

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Lipopolysaccharid	MERK	L4130	LPS
Mikroliterspritzen	SHANGHAI GAOGE INDUSTRY AND TRADE CO., LTD		Zur Lieferung von LPS
Mauskanüle	RWD Life Science	803-03008-00	Mauskanüle
Maus-Intubationskit	RWD Life Science	903-03027-00	Einschließlich einer Basis, einem Riser, einem Intubator, einer chirurgischen Pinzette und einigen Strings
Pasteur-Pipette	Biosharp life science	BS-XG-03	Zur Überprüfung des Erfolgs der Intubation
Pentobarbital-Natrium	Beijing Chemical Co., China	20220918	Zur Betäubung von Mäusen

10028505008124