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Methodenartikel

Chronische intermittierende Exposition gegenüber Ethanoldampf gepaart mit der Wahl von zwei Flaschen zur Modellierung der Alkoholkonsumstörung

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DOI:

10.3791/65320

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23. Juni 2023

 ,  ,  ,  , 
1Department of Basic Medical Sciences, College of Veterinary Medicine, Purdue University, 2The Scripps Research Institute, 3Purdue Institute for Integrative Neuroscience, 4Weldon School of Biomedical Engineering, Purdue University, 5Purdue Institute of Inflammation, Immunology, and Infectious Disease

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Hier ist ein Protokoll für das 2BC/CIE-Modell der Alkoholabhängigkeit bei Mäusen zur Untersuchung der Alkoholkonsumstörung.

Zusammenfassung

Alkoholkonsumstörung (AUD) ist eine chronische alkoholbedingte Störung, die sich typischerweise als unkontrolliertes Trinken und Beschäftigung mit Alkohol äußert. Eine Schlüsselkomponente der AUD-Forschung ist die Verwendung translational relevanter präklinischer Modelle. In den letzten Jahrzehnten wurden eine Vielzahl von Tiermodellen verwendet, um AUD zu untersuchen. Ein prominentes Modell der AUD ist das Modell der chronischen intermittierenden Ethanoldampfexposition (CIE), das ein gut etablierter Ansatz zur Induktion von Alkoholabhängigkeit bei Nagetieren durch wiederholte Zyklen der Ethanolexposition durch Inhalation ist. Um die AUD bei Mäusen zu modellieren, wird die CIE-Exposition mit einer freiwilligen Zwei-Flaschen-Auswahl (2BC) an Alkoholkonsum und Wasser gepaart, um die Eskalation des Alkoholkonsums zu messen. Das 2BC/CIE-Verfahren beinhaltet abwechselnd Wochen mit 2BC-Trinken und CIE, die sich wiederholen, bis die Eskalation des Alkoholkonsums erreicht ist. In der vorliegenden Studie skizzieren wir die Verfahren zur Durchführung von 2BC/CIE, einschließlich der täglichen Nutzung der CIE-Dampfkammer, und geben ein Beispiel für eskalierten Alkoholkonsum bei C57BL/6J-Mäusen unter Verwendung dieses Ansatzes.

Einleitung

Alkoholkonsumstörung (AUD), die chronischen übermäßigen Alkoholkonsum beinhaltet, ist eine der häufigsten psychiatrischen Störungen und ein globales Problem. AUD-Symptome beinhalten wiederholte Zyklen von Rausch, Entzug und Heißhunger und sind gekennzeichnet durch den ständigen Konsum von Alkohol ohne Rücksicht auf die sozialen, beruflichen und gesundheitlichen Folgen1,2,3,4,5,6,7. Alkoholkonsumstörungen treten häufig in Verbindung mit anderen weit verbreiteten, anhaltenden und beeinträchtigenden psychischen Störungen auf8, wie z. B. ADHS9, anxiety10 oder depression11 und ist allein in den Vereinigten Staaten für jährlich etwa 88.000 Todesfälle verantwortlich2. Übermäßiger oder häufiger Alkoholkonsum kann sich auf den Arbeitsstatus und die sozialen Beziehungen einer Person auswirken12 und kann zu erhöhter Gewalt13 führen. Körperlich kann ein akuter Alkoholentzug zu Angstzuständen, Unruhe, Zittern, übermäßigem Schwitzen, Bewusstseinsstörungen und Halluzinationen führen14,15. Darüber hinaus können Menschen Entzugserscheinungen verspüren, wenn sie weniger trinken oder aufhören, und gereizt oder launisch werden16. Darüber hinaus kann chronischer Alkoholkonsum zu Gedächtnisverlust führen17 und zu Thiaminmangel, auch bekannt als Wernicke-Korsakoff-Syndrom (WKS), der erheblich zur alkoholinduzierten Demenz beiträgt18.

Um die AUD-Forschung weiter voranzutreiben, ist es notwendig, translational relevante Tiermodelle der Krankheit zu haben. Das häufigste Modell der AUD bei Nagetieren ist die chronische intermittierende Ethanoldampfexposition (CIE), die ein gut etablierter Ansatz zur Induktion von Alkoholabhängigkeit durch wiederholtes Einatmen von Alkoholdampf ist4,19,20,21,22,23,24,25,26,27,28,29,30. CIE-Verfahren bei Nagetieren induzieren Entzugserscheinungen wie durch die Handhabung induzierte Krämpfe31, Übererregbarkeit, reizbarkeitsähnliches Verhalten, angstähnliches Verhalten und Schlafstörungen und führen zu einer Eskalation des Alkoholkonsums22,32,33,34,35. Darüber hinaus führt CIE zu einer signifikanten Eskalation des freiwilligen Alkoholkonsums, was den zwanghaften Konsum widerspiegelt, der bei Menschen beobachtet wird36. Während der Intoxikationsphasen zeigen Mäuse Verhaltens- und physiologische Anzeichen, die mit einer Alkoholintoxikation beim Menschen übereinstimmen, einschließlich Ataxie, Sedierung und beeinträchtigter Hypothermie37,38<span style="font-size: 11.6667px;">,39. Diese Ergebnisse unterstreichen die Nützlichkeit des CIE-Modells bei der Erfassung sowohl der neurobiologischen als auch der verhaltensbezogenen Aspekte der Alkoholabhängigkeit, was es zu einem wertvollen Instrument zur Aufklärung von AUD-Mechanismen und zur Erprobung potenzieller therapeutischer Interventionen macht. In präklinischen Modellen der AUD, wie z. B. der chronischen intermittierenden Exposition gegenüber Ethanol (CIE)-Dampf, zeigen Mäuse verhaltensbezogene und physiologische Anzeichen, die der menschlichen Alkoholvergiftung und -abhängigkeit entsprechen. Während der Intoxikationsphasen können Mäuse Symptome wie Ataxie, Sedierung, vermindertes Erkundungsverhalten und beeinträchtigten Aufrichtreflex zeigen. Angesichts dieser Risiken wurden die Tiere während und nach der Exposition gegenüber Ethanoldampf engmaschig überwacht, um Anzeichen einer schweren Vergiftung oder einer Verschlechterung des Gesundheitszustands zu erkennen.

Bei Ratten beinhaltet das CIE-Modell häufig die operante Selbstverabreichung von Alkohol, um die Eskalation der Aufnahme zu messen40,41,42, während das Mausmodell CIE und Trinken mit zwei Flaschen (2BC) beinhaltet43,44. Präklinische Modelle der Alkoholabhängigkeit haben durchweg gezeigt, dass Tiere ihre Ethanolaufnahme nach chronischer Ethanoldampfexposition erhöhen23,45,46,47. Speziell bei Mäusen wurde gezeigt, dass wiederholte CIE-Zyklen die freiwillige Ethanolaufnahme erhöhen3,21,48,49,50. Insgesamt zeigen frühere Studien, dass das CIE-Modell ausreicht, um den Ethanolverbrauch zu erhöhen und die AUD bei Nagetieren zu modellieren.

Diese Studie zielt darauf ab, die CIE-Methode zur Untersuchung von AUD hervorzuheben und sich insbesondere auf das 2BC/CIE-Mausmodell zu konzentrieren. Wir gehen auf einen detaillierten Prozess der Schritte ein, die für die Durchführung von 2BC/CIE erforderlich sind, und stellen ein Beispiel für die Eskalation des Alkoholkonsums nach CIE vor.

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Protokoll

Alle Verfahren wurden vom Purdue University Animal Care and Use Committee genehmigt. In der vorliegenden Studie wurden 8 Wochen alte C57BL/6J-Mäuse verwendet. Die CIE-Gruppe hatte 5 Mäuse (3 Männchen, 2 Weibchen) und die Air-Gruppe hatte 10 Mäuse (5 Männchen und 5 Weibchen). Die Tiere stammten aus einer kommerziellen Quelle (siehe Materialtabelle) und wurden in einem 12-stündigen Hell-Dunkel-Zyklus mit Zugang zu Futter in Gruppen untergebracht. Das Körpergewicht der Mäuse wurde während des gesamten Experiments einmal pro Woche gemessen.

1. Allgemeines Versuchsdesign

HINWEIS: Two-bottle choice (2BC)/chronic intermittent ethanol vapor exposure (CIE) ist ein präklinisches Mausmodell zur Erforschung der Ethanolabhängigkeit51.

  1. Stellen Sie während der 2BC-Wochen sicher, dass die Mäuse Zugang zu einer Flasche mit Ethanol (15 % w/v) und einer Flasche mit Wasser für 2 Stunden täglich (Montag bis Freitag) haben, beginnend mit 2 Stunden im Dunkelzyklus.
  2. Lassen Sie die Mäuse zunächst mindestens 2 Wochen lang 2BC zu Beginn trinken, bis ein stabiles Niveau der Ethanolaufnahme erreicht ist. Teilen Sie die Mäuse je nach experimentellem Bedarf in zwei Gruppen (eine CIE-Gruppe und eine Air-Gruppe) oder mehr ein, wenn zusätzliche Behandlungen auf der Grundlage der durchschnittlichen Ethanolaufnahme zu Studienbeginn eingeschlossen sind.
  3. Nach den 2BC-Ausgangswochen setzen Sie die Mäuse aus der CIE-Gruppe an vier aufeinanderfolgenden Tagen (Montag bis Donnerstag) Ethanoldampf (CIE) aus, wobei 16 aufeinanderfolgende Stunden Dampf an und 8 aufeinanderfolgende Stunden Dampf aus war. Um stabile und anhaltende Ethanolkonzentrationen im Blut während des gesamten Expositionszeitraums zu gewährleisten, wurde Pyrazol gleichzeitig als Alkoholdehydrogenase-Hemmer verabreicht, wodurch ein schneller Ethanolstoffwechsel verhindert und konsistente systemische Ethanolspiegel gefördert wurden.
    HINWEIS: Zur Kontrolle potenzieller kammerspezifischer Variablen wie Beleuchtung, Vibrationen, Geräusch und Temperatur wurden Mäuse in der Air-Gruppe in einer identischen Kammer unter den gleichen Umgebungsbedingungen wie die CIE-Gruppe untergebracht, jedoch ohne Alkoholdampfexposition.
  4. Stellen Sie während der CIE/Air-Woche sicher, dass 2BC nicht auftritt. Nach 1 Woche CIE/Air setzen Sie die Mäuse mit 2BC für den folgenden Montag bis Freitag fort.
  5. Lassen Sie die Mäuse für den Rest des Eingriffs abwechselnd eine Woche CIE/Luft und 2BC einnehmen, bis die Eskalation des Alkoholkonsums bei den CIE-Mäusen auftritt. Sammeln Sie mindestens einmal pro Woche Blut von den Mäusen, um ihre Blutethanolkonzentration (BEC) zu bestimmen52.

2. Experimentelle Vorbereitung

  1. Besorgen Sie sich vor Beginn der Studie alle folgenden Materialien: Mäuse, Käfige/Käfigdeckel aus Metall, Trinkflaschen für zwei nebeneinander liegende Käfige, Einstreu, Futter, eine Waage, eine chronisch unterbrochene Dampfkammer und ein Analox-Gerät oder eine andere Methode zur Analyse der BECs (siehe Materialtabelle).
  2. Stellen Sie sicher, dass alle erforderlichen Chemikalien für das Experiment bereit sind: Trinkwasser, 95 % Ethanol, Pyrazol, Heparin und sterile Kochsalzlösung.

3. Gewöhnung an Tiere

  1. Wenn die Mäuse nicht bereits am selben Ort wie die Experimente untergebracht sind, warten Sie mindestens 1 Woche, bis sie sich an die neue Umgebung gewöhnt haben.
    HINWEIS: Während dieser Zeit sollten Mäuse auch an einen schonenden Umgang gewöhnt werden, um stressbedingte Störfaktoren zu minimieren und das Wohlergehen der Tiere zu verbessern. Die Handhabungssitzungen wurden an fünf aufeinanderfolgenden Tagen einmal täglich durchgeführt, die jeweils etwa 2-3 Minuten pro Tier dauerten. Die Mäuse wurden in die Hände des Experimentators geführt oder sanft geführt, ohne den Schwanz zu heben, so dass sie freiwillig die Hand des Handlers erkunden konnten. Diese Technik erleichtert die routinemäßige Interaktion, reduziert den Stress bei nachfolgenden experimentellen Verfahren und sorgt für zuverlässigere Verhaltensdaten. Zusätzlich wurden die Tiere täglich für 30 Minuten in den Versuchsbereich gebracht, um sie weiter an die Testumgebung zu gewöhnen.
  2. Stellen Sie sicher, dass die Mäuse 1 Woche lang zwei Flaschen zur Auswahl haben, wobei beide Flaschen mit Wasser gefüllt sind, damit sie sich an die unterschiedliche Käfigkonfiguration gewöhnen und zum Trinken in einen einzelnen Käfig gesetzt werden können.

4. Auswahl mit zwei Flaschen mit 15% w/v Ethanol und Wasser

  1. Gewöhnung an zwei Flaschen
    1. Das Paradigma der Zwei-Flaschen-Auswahlprüfung ist während der gesamten Woche das gleiche wie bei der Zwei-Flaschen-Wahl mit Wasser und den späteren Tests mit Wasser und Ethanol. Bringen Sie die Mäuse in Gruppenhaltung 30 Minuten vor dem Ausschalten des Lichts in ihre einzelnen Trinkkäfige und lassen Sie die Mäuse dann 2 Stunden lang trinken.
    2. Notieren Sie das Volumen jeder Trinkflasche vor und nach der 2-stündigen Trinkperiode. Jede Gruppe durchläuft 5 Tage lang, von Montag bis Freitag, 2BC.
      HINWEIS: Der Zweck der Gewöhnungswoche besteht darin, die Tiere daran zu gewöhnen, dass sich zwei Flaschen im Käfig befinden, um Verzerrungen zu minimieren, die durch die natürliche Seitenlage einer einzelnen Flasche verursacht werden. In dieser Woche werden beide Flaschen mit Wasser gefüllt. Wenn der mitgelieferte Metalltrichter nur für eine Flasche ausgelegt ist, nutzen Sie vorsichtig den Raum zwischen den Stangen neben der ersten Flasche, um Platz für die zweite Flasche zu schaffen. Die Flaschen, die für Trinkexperimente verwendet werden, werden aus 10-ml- und 25-ml-Pipetten nach Maß hergestellt, wobei die Enden so abgeschnitten sind, dass ein gerader Sipper mit Kugellager eingesetzt werden kann, aus dem die Mäuse trinken können. Durch die Verwendung von Bindeklammern werden die Flaschen am Drahtdeckel befestigt, um sicherzustellen, dass sich die Flaschen während der Trinkzeit nicht bewegen (Ergänzende Abbildung 1 und Ergänzende Abbildung 2).
  2. Baseline Auswahl an zwei Flaschen
    1. Lassen Sie die Mäuse nach der Gewöhnung mindestens 2 Wochen lang 2BC zu Studienbeginn trinken, um eine stabile Ethanolaufnahme zu etablieren. Während der Grundtrinkzeit testen Sie die Mäuse 2 Stunden pro Tag und 5 Tage pro Woche (Montag bis Freitag) mit einer Wasserflasche und einer zweiten Flasche mit 15 % w/v Ethanol. Notieren Sie das Volumen jeder Trinkflasche vor und nach der 2-stündigen Trinkperiode.
      HINWEIS: Um einen stabilen Ausgangswert für die Ethanolaufnahme zu erreichen, wiederholen Sie die Wochen von 2BC, bis jede Maus eine Abweichung von etwa 15 % in der Aufnahme zwischen den Tagen aufweist.
    2. Nachdem die Mäuse einen stabilen Ausgangswert für die Ethanolaufnahme erreicht haben, teilen Sie die Mäuse gleichmäßig auf der Grundlage ihrer Ethanolaufnahme in ethanolunabhängige (Luftbehandlung) und ethanolabhängige (CIE-Behandlung) Gruppen auf. Sobald die Ausgangsmenge an Ethanol festgelegt wurde, werden die Mäuse in der folgenden Woche einer CIE (oder Air Exposure) unterzogen.
      HINWEIS: Nicht alle Experimente erfordern die Einbeziehung einer nicht abhängigen Gruppe, und dies muss auf der Grundlage des Schwerpunkts der Studie bestimmt werden. Zum Beispiel können ethanolabhängige Mäuse mit und ohne spezifische Behandlung ein relevanterer Vergleich sein.
  3. Auswahl an zwei Flaschen (2BC)
    1. Setzen Sie das 2BC-Verfahren fort, wie es während des Trinkens zu Studienbeginn nach der ersten CIE-Woche durchgeführt wurde.
      HINWEIS: Die Zwei-Flaschen-Maus-Trinkformel ist eine Mischung aus 15 % w/v Ethanol (1 l): 95 % Ethanol (195 ml) und Maus-Trinkwasser (805 ml).

5. Chronische Exposition gegenüber intermittierendem Ethanoldampf (CIE)

  1. Ordnen Sie die folgenden Materialien an: maßgefertigte CIE-Dampfkammern (Ergänzende Abbildung 3), 95 % Ethanol, eine Ethanol-Pyrazol-Lösung (68,1 mg/kg Pyrazol gemischt mit 20 % Ethanol), eine Kochsalzlösung-Pyrazol-Lösung (68,1 mg/kg Pyrazol gemischt in Kochsalzlösung), Spritzen (1 ml) und Nadeln.
  2. Chronisches intermittierendes Ethanoldampfverfahren (CIE)
    1. Bevor sie für CIE in die Dampfkammern gegeben werden, injizieren Sie die Mäuse intraperitoneal mit einer Ethanol-Pyrazol-Lösung (0,0075 ml/g), die verwendet wird, um eine anfängliche Ethanolintoxikation zu erzeugen, die Ethanoldehydrogenase zu hemmen und den Metabolismus von Ethanol zu blockieren53.
    2. Injizieren Sie alle Air-Kontrollschalter und andere Gruppen mit der gleichen Pyrazoldosis, gemischt mit Kochsalzlösung (0,0075 ml/g) anstelle von Ethanol. Es wird empfohlen, jede Woche am ersten und letzten Tag der CIE eine halbe Dosis (0,00375 ml/g) der Pyrazollösungen zu verabreichen.
    3. Nach den Injektionen bringen Sie die Luft-/Kontrollmäuse in ihre Heimatkäfige zurück und platzieren Sie die Käfige für die CIE-Gruppe in der Dampfkammer.
      HINWEIS: Angesichts der potenziellen Gesundheitsrisiken, die mit der chronischen Exposition gegenüber Ethanoldampf verbunden sind, wurden die Tiere während des gesamten Protokolls engmaschig überwacht, um ihr Wohlbefinden zu gewährleisten und etwaige Nebenwirkungen zu erkennen. Die Mäuse wurden mindestens zweimal pro Woche gewogen, und die Gesundheitsuntersuchungen umfassten die Beobachtung auf klinische Anzeichen von Beschwerden. Tiere, die einen Körpergewichtsverlust von mehr als 20 % gegenüber dem Ausgangswert aufwiesen oder Anzeichen wie gebeugte Haltung, Lethargie, Piloerektion oder ungepflegtes Fell zeigten, wurden als humane Endpunkte erreicht und in Übereinstimmung mit den genehmigten institutionellen Richtlinien für die Tierpflege und -verwendung umgehend aus der Studie entfernt. Während der CIE sind Mäuse am anfälligsten für schlechte gesundheitliche Ergebnisse gegen Ende der Woche, wenn sie nach Beendigung der Ethanolexposition in eine verlängerte Wartezeit eintreten. Um die Schwere des Entzugs zu minimieren, wird jede Woche am letzten Tag der Dampfexposition eine halbe Dosis Pyrazol verabreicht. Zusätzlich wird zu Beginn jedes neuen CIE-Zyklus eine halbe Dosis verabreicht, um den Tieren den Einstieg in die Ethanolexposition zu erleichtern. Pyrazol, ein Alkoholdehydrogenase-Hemmer, wird verwendet, um die Ethanolkonzentrationen im Blut zu stabilisieren und zu verlängern. Die Dosen reichen in der Regel von 0,00375 ml/g bis 0,0075 ml/g und können angepasst werden, um die gewünschte Ethanolkonzentration im Blut zu erreichen.
    4. Sobald die Mäuse in die Dampfkammern eingesetzt wurden, verriegeln Sie die Türen und stellen Sie die Pumpe auf die entsprechende Dampfstufe (z. B. 1-3). Legen Sie die Laufzeit des Experiments fest. Für die vorliegende Studie begann das Experiment um 17:00 Uhr und endete um 09:00 Uhr, und es wurde eine Pumpeneinstellung von 1-2 verwendet (durchgehend verwendet).
    5. Drücken Sie dann die Start-Taste auf dem Bildschirm zur Steuerung der CIE-Dampfkammer, um das Experiment zu starten.
      HINWEIS: Dieser Schritt kann je nach verwendeter Kammer und Unterschieden in der Einrichtung variieren. Sobald alle Mäuse injiziert und in die Ethanolkammer eingesetzt wurden, sollte die Kammer beginnen, 95 % Ethanol in einen Glaskolben zu pumpen und das flüssige Ethanol zu Dampf zu erhitzen. Der Dampf strömt durch die Kammer, in der die Mäuse 4 Tage lang (Montagabend bis Freitagmorgen) 16 h/Tag lang gehalten werden. Jeden Tag erleben die Mäuse 8 Stunden, in denen der Dampf ausgeschaltet ist. Die Mäuse werden dann am Ende des vierten Tages (Freitagmorgen) aus der Kammer genommen und beginnen am folgenden Montag mit 2BC. Abhängig vom spezifischen Verdampfungskammersystem und -aufbau kann es zu Abweichungen in den BECs kommen, die durch die unterschiedlichen Einstellungen/Dampfstufen verursacht werden. Verschiedene Faktoren, wie z.B. geringfügige Unterschiede bei den Systemkomponenten, Luftströmung, Abgas etc., können die Ursache dafür sein. Die Anpassung des Ethanoldampfgehalts anstelle der Pyrazoldosis ist geeignet, um ein BEC im Zielbereich zu halten. Mit zunehmender Toleranz können die BECs zu niedrig sein, und der Dampfpegel muss möglicherweise angepasst werden. Wenn der Gradient zwischen den Dampfwerten zu steil ist, um die BECs zu erhöhen, wird empfohlen, die Pyrazoldosis entsprechend anzupassen, um die BECs zu verändern.
    6. Messen Sie die BECs (siehe Schritt 5.3) der Mäuse mindestens einmal pro Woche während der CIE. Führen Sie die Blutentnahme 30 Minuten vor dem Stoppen des Dampfes durch, um sicherzustellen, dass die BECs nicht zu sinken begonnen haben.
      HINWEIS: Der Dampfpegel muss möglicherweise während des Experiments angepasst werden, da sich die Ethanoltoleranz im Laufe mehrerer Wochen aufbaut. BECs sollten vor und nach dem Anpassen der Dampfeinstellungen getestet werden.
    7. Bringen Sie die Mäuse in der Woche nach der CIE wieder in den 2BC-Test. Wiederholen Sie Schritt 4 und Schritt 5. Lassen Sie die Mäuse vier bis acht Zyklen (8-16 Wochen) zwischen CIE und 2BC wechseln, bis sie eine signifikante Steigerung des Ethanolverbrauchs im Vergleich zu ihrem Ausgangstrinkvolumen aufweisen.
  3. Blutmessungen
    1. Ordnen Sie die folgenden Materialien an: Geräte zur Messung von BECs, wie z. B. ein Analox-System, eine Klinge, ein Röhrchen (0,2 ml), Heparin/EDTA und eine Zentrifuge (siehe Materialtabelle).
    2. Schneiden Sie die CIE-Mäuse einmal während der CIE-Woche ab, 30 Minuten bevor sich das Dampfsystem abschaltet, um Blut für die Bestimmung des BEC zu sammeln. Die Blutentnahme kann mit verschiedenen Methoden durchgeführt werden, abhängig von den Präferenzen des Labors54.
      HINWEIS: Das Blut wird in heparinisierten oder EDTA-beschichteten 0,5-ml-Röhrchen gesammelt (siehe Materialtabelle).
    3. Halten Sie die entnommenen Blutproben bis zur Verarbeitung bei 4 °C.
    4. Um die Proben zu verarbeiten, zentrifugieren Sie zunächst bei 208 x g für 10 min bei 4 °C, um das Plasma zu trennen.
    5. Bestimmen Sie die Ethanolkonzentrationen im Blut mit einem Ethanolanalysator mit Sauerstoffgehalt (siehe Materialtabelle) oder anderen Systemen, die BECs bestimmen können.

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Ergebnisse

In der vorliegenden repräsentativen Studie wird die Alkoholaufnahme (g/kg) während des 2BC-Verfahrens in der Basislinienphase und nach mehreren Wochen mit CIE (nach Dampfexposition) angegeben. Kurz gesagt, wie im Protokoll beschrieben, hatten die Mäuse während des 2BC-Verfahrens Zugang zu zwei Flaschen: eine enthielt Wasser, die andere 15 % (w/v) Ethanol. Nachdem die Basislinienaufnahmemengen bestimmt waren, wurden die Versuchstiere aufgeteilt und gleichmäßig den CIE- oder Luftgruppen zugewiesen. Die anfängliche Basislin...

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Diskussion

Die Alkoholkonsumstörung stellt ein globales Problem der öffentlichen Gesundheit mit hoher Prävalenz und hohen Kosten für die Gesellschaftdar 56. Um AUD in präklinischen Tiermodellen zu untersuchen, ist eine gängige Methode bei Mäusen2BC/CIE 20,34,43,44,51,57,58,59.

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Offenlegungen

Maury Cole ist der Eigentümer und Betreiber von La Jolla Alcohol Research Inc.

Danksagungen

Diese Arbeit wurde durch Zuschüsse der National Institutes of Health (NIH) AA027301 und AA029985 unterstützt.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
500 Eppendorf TubesEppendorfL203896J
95% EthanolDecon Laboratorien2816
Analox MaschineAnalox InstrumentsAnalox-AM1
TierwaageKent ScientificSCL-4000
Binder ClipsOffice Depot560394
C57BL/6J MäuseDie Jackson Laboratory000664
ZentrifugeEppendorf5418R
Chronische intermittierte DampfkammerLa Jolla Alcohol Research IncMaßgeschneiderte Materialien
Heparin/EDTASagent PharmazeutikaTS/DRUGS/2/2015
MausbettwäscheBed-o' Cobs8BFüllung mit 1/8" tiefer
Maus-TrinkflascheMaßgeschneiderte Materialien
PyrazolSigma-Aldrichbccc6397
Teklad global 18% Protein (Mausnahrung)Teklad globalEnvigo 2018

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