Dieses Protokoll beschreibt ein Verfahren zur Erleichterung der Entnahme von Proben aus radikalen Prostatektomieproben. Ziel ist es, Gewebeproben aus den Proben nach anatomisch-pathologischen Kriterien zu kartieren, zu charakterisieren und zu mikro-präparieren, bevor sie in einer Biobank gelagert werden.
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Methodenartikel
Verbesserung der Zuverlässigkeit von Prostatatumor-Biobanken durch verbesserte Probenahmetechnik und histologische Charakterisierung
* These authors contributed equally
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Die Gewinnung frischer und gut charakterisierter Tumorgewebeproben ist entscheidend für die Durchführung qualitativ hochwertiger "Omics"-Studien. Im Zusammenhang mit Prostatakrebs (PC) kann es jedoch aufgrund der Einzigartigkeit dieses Organs und der hohen Heterogenität, die mit diesem Tumor verbunden ist, eine besondere Herausforderung darstellen. Auf der anderen Seite ist es auch eine faszinierende Herausforderung, Proben vor ihrer Lagerung histopathologisch zu charakterisieren, ohne signifikante Gewebeveränderungen zu verursachen. In diesem Zusammenhang stellen wir eine neue Methode zur Gewinnung, Kartierung, Charakterisierung und Mikrodissektion von reseziertem Prostatagewebe anhand anatomopathologischer Kriterien vor.
Im Gegensatz zu zuvor veröffentlichten Protokollen reduziert diese Methode den Zeitaufwand für die histopathologische Analyse der Prostataprobe, ohne deren Struktur zu beeinträchtigen, was für die Beurteilung der chirurgischen Ränder entscheidend ist. Darüber hinaus ermöglicht es die Abgrenzung und Mikro-Makro-Dissektion von frischen Prostatagewebeproben, wobei der Schwerpunkt auf histologischen Tumorbereichen liegt, die durch pathologische Kriterien wie den Gleason-Score, Präcursorläsionen (hochgradige intraepitheliale Neoplasie der Prostata - PIN) und entzündliche Läsionen (Prostatitis) definiert sind. Diese Proben werden dann in einer Biobank für spätere Forschungsanalysen gelagert.
Einleitung
Prostatakrebs (PC) ist die 2. häufigste Krebserkrankung bei Männern und die 5. häufigste Todesursache weltweit1. Die Behandlung und Prognose des Patienten hängt vom Staging und der Einstufung (Gleason-Score) des Tumors ab, was sich in den höheren 5-Jahres-Überlebensraten von lokalisierten und niedriggradigen Tumoren (Gleason-Grad 6) (99 %) im Vergleich zu hohen Gleason-Tumoren und metastasierten Tumoren (31 %) zeigt2.
Das PC-Lokalrezidiv und das Versagen der Behandlung wurden mit der charakteristischen hohen genetischen Intratumorheterogenität dieses Tumortyps
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Protokoll
Diese Methode wurde in Zusammenarbeit mit verschiedenen klinischen Diensten (Urologie, Pathologie und Biobank des Krankenhauses La Fe) entwickelt. Die Studie wurde in Übereinstimmung mit institutionellen, nationalen und internationalen Richtlinien für das Wohlergehen des Menschen durchgeführt und von der Ethikkommission für biomedizinische Forschung am Instituto de Investigación Sanitaria Hospital Universitario y Politécnico La Fe (Valencia, Spanien) genehmigt. Alle Proben wurden in der Biobank des Krankenhauses La Fe (PT13/0010/0026) gelagert. Das Gesamtverfahren ist in Abbildung 1 dargestellt.
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Ergebnisse
Die Ergebnisse zeigen, dass diese Technik in 61% der untersuchten Fälle (25 von 41 Fällen) die Gewinnung von Tumormaterial ermöglicht hat (Tabelle 1).
Tabelle 1: Histopathologische Daten von Studienstichproben. Zusammenfassung der histopathologischen Daten für die in der Studie verwendeten Proben. Der Diagnosezylinder bezieht sich auf die Prostatabiopsieprobe, die zu diagnostischen Zwecken entnommen wurde, während der verarbeitete Zylinder dem Zylinder entspri.......
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Diskussion
In jeder Forschungsstudie ist die Gewinnung von Qualitätsproben eine wesentliche Voraussetzung, um systematische Verzerrungen zu reduzieren und zuverlässige Ergebnisse zu erhalten22. Daher muss die Kontrolle präanalytischer Variablen wie die Temperatur, bei der Proben verarbeitet und gelagert werden, die von der Probenentnahme bis zur Lagerung verstrichene Zeit, die Verwendung sterilisierter Materialien oder die Auswirkungen, die der Zusatz von Konservierungsmitteln oder anderen Zusatzstoffen auf .......
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Offenlegungen
Die Autoren erklären, dass kein Interessenkonflikt besteht.
Danksagungen
A.L. bestätigt einen Postdoktorandenvertrag von "Margarita Salas" (Nummer 21-076) und MAM-T einen Forschungsvertrag von "Maria Zambrano" (Nummer MAZ/2021/03 UP2021-021). Beide Verträge wurden im Rahmen der Europäischen Union (Next Generation EU) finanziert.
....Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Cadiere Pinzette | Intuitive | PN1052082-US 10/2021 | Teilenummer: 471049. 18 Anwendungen. |
| Konventionelle Objektträger | Knittel Glass | 2021 | Gemahlenes/ mattiertes Ende |
| Kryostat Mikrotom | Thermo Fisher Scientific--- | Criostato CryoStar NX50 | |
| Kryoröhrchen | Greiner Bio-One GmbH | Ref.: 122280. | CRYO S. PP, mit Schraubverschluss, steril. |
| Da Vinci Chirurgiesystem | Intuitive | PN1052082-US 10/2021 | Modell XI |
| Sezierinstrumente | Bayer --- | Zwei Pinzetten und eine chirurgische Klinge | |
| DPX Eukitt | Medizin- und Labortechnik GmbH | 6.00.01.0001.06.01.01 | |
| Eosin | Agilent | 157252 | |
| Fenestierte bipolare Pinzette | Intuitive | PN1052082-US 10/2021 | Teilenummer: 471205. 14 Leben. |
| Force bipolar | Intuitive | PN1052082-US 10/2021 | Teilenummer: 471405. 12 Anwendungen. |
| Gefrierschränke | Thermo Scientific | MODELL 907. -80 º C | |
| Hämatoxylin | Agilent | 157251 | |
| Inmunohistochemie Objektträger | Agilent-Dako | K802021-2 | |
| Großer Nadeltreiber | Intuitiv | PN1052082-US 10/2021 | Teilenummer: 471006. 15 Anwendungen. |
| Maryland bipolare Pinzette | Intuitive | PN1052082-US 10/2021 | Teilenummer: 471172. 14 Anwendungen. |
| Mikroskop | Olympus | --- | Olympus cx40 |
| Mikrotomklingen | PFM Medical | a35 | |
| Monopolar gebogene Schere | Intuitive | PN1052082-US 10/2021 | Teilenummer: 470179. 10 Anwendungen. |
| OCT Compound | NEG-50 | LOT.117340 | |
| PlusSpeed S Einmal-Biopsiegerät mit abgeschrägter Spitze | Peter Pflugbeil GmbH | PSS-1825-S | |
| ProGasp Pinzette | Intuitive | PN1052082-US 10/2021 | Teilenummer: 471093. 18 Anwendungen. |
| Probenhalter Disc | Davidson Cryo Chuck. BradleyProdukte | 30 mm | |
| Tissue-Tinte | Pelikan | 2021 | Tinte 4001 brillantschwarz (301168) |
| Xylol | Quimipur | Ref. 169 |
Referenzen
- Rawla, P. Epidemiology of prostate cancer. World Journal of Oncology. 10 (2), 63-89 (2019).
- Epstein, J. I. The 2019 Genitourinary Pathology Society (GUPS) white paper on contemporary grading of prostate cancer. Archives of Pat....
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Nachdrucke und Genehmigungen
