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Selektive Manipulation der Wirbelsäule kann die Körpergewichtszunahme bei Rattenbabys mit Zerebralparese fördern.
Während der Behandlung wurde das Körpergewicht an den postnatalen Tagen 3, 14, 28, 42 und 61 gemessen (Abbildung 4, Tabelle 3). Am dritten Tag nach der Geburt betrug das Körpergewicht der Sham-Gruppe 5,53 ± 0,035 g und das Körpergewicht der Kontrollgruppe 3,15 ± 0,43 g. Das Körpergewicht der Behandlungsgruppe betrug 4,42 ± 0,13 g und unterschied sich nicht signifikant von dem der Schein- und Kontrollgruppe vor der Modellierung.
Am 14. postnatalen Tag betrug das Körpergewicht der Scheingruppe 35,97 ± 1,019 g, das Körpergewicht der Kontrollgruppe 28,00 ± 0,7403 g und das Körpergewicht der Behandlungsgruppe 33,78 ± 3,705 g. Es gab keinen signifikanten Unterschied im Körpergewicht zwischen der Behandlungs- und der Scheingruppe. Das Gewicht der Behandlungsgruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe war statistisch signifikant (P < 0,01).
Am 28. Tag nach der Geburt betrug das Körpergewicht der Scheingruppe 104,9 ± 3,534 g, das Körpergewicht der Kontrollgruppe 80,35 ± 6,767 g und das Körpergewicht der Behandlungsgruppe 96,73 ± 7,638 g. Die Behandlungsgruppe wurde mit der Kontrollgruppe verglichen und war statistisch signifikant (P < 0,01).
Am 42. postnatalen Tag betrug das Körpergewicht der Scheingruppe 194,1 ± 4,333 g, das Körpergewicht der Kontrollgruppe 138,0 ± 6,029 g und das Körpergewicht der Behandlungsgruppe 173,9 ± 5,433 g. Es zeigte sich ein statistisch signifikanter Unterschied im Körpergewicht zwischen der Behandlungs- und der Kontrollgruppe (P < 0,0001).
Am 61. postnatalen Tag betrug das Körpergewicht der Scheingruppe 321,5 ± 5,675 g, das Körpergewicht der Kontrollgruppe 230,3 ± 5,198 g und das Körpergewicht der Behandlungsgruppe 268,9 ± 15,22 g. P < 0,0001 wurden als statistisch signifikant angesehen. Es gab einen statistisch signifikanten Unterschied im Körpergewicht zwischen der Behandlungs- und der Kontrollgruppe bei P < 0,0001.
Die selektive Manipulation der Wirbelsäule kann die effektive motorische Gleichgewichtsfunktion der Zerebralparese verbessern.
Am 61. Tag nach der Geburt, nach Beendigung der Behandlung, führten wir den Ermüdungs-Rotarod-Test durch. Die erste Fallzeit jeder Gruppe betrug 296,1 ± 1,65 s in der Sham-Gruppe, 102,7 ± 7,73 s in der Kontrollgruppe und 220,1 ± 8,04 s in der Behandlungsgruppe. Es gab einen signifikanten Unterschied zwischen der Schein- und der Kontrollgruppe (P < 0,0001). Der Unterschied zwischen der Behandlungsgruppe und der Kontrollgruppe war statistisch signifikant (P < 0,0001), und der Unterschied zwischen der Behandlungsgruppe und der Scheingruppe war statistisch signifikant (P < 0,0001) (Abbildung 5, Tabelle 4)
Am 61. Tag nach der Geburt, nach Beendigung der Behandlung, betrugen die Fußfehlerwerte der Schein- und Kontrollgruppe 5,53 ± 0,03 bzw. 3,15 ± 0,43. Die Punktzahl der Behandlungsgruppe war mit 4,42 ± 0,13 signifikant niedriger als die der Scheingruppe (P < 0,0001). Die Punktzahl der Behandlungsgruppe war signifikant höher als die der Kontrollgruppe (P < 0,0001). Im Vergleich zur Behandlungsgruppe und der Scheingruppe war der Unterschied statistisch signifikant (P < 0,0001) (Abbildung 6, Tabelle 5).
Die selektive Manipulation der Wirbelsäule kann die Höhe der Wachstumshormonsekretion bei Zerebralparese regulieren.
Am 32. postnatalen Tag wurden Gewebeproben entnommen, und der Hypothalamus von Ratten mit Zerebralparese wurde für den Western Blot ausgewählt, und die entsprechenden primären und sekundären Antikörper wurden ausgewählt: Die verwendeten Antikörper waren der primäre Anti-Wachstumshormon-Antikörper, der Anti-Wachstumshormon-Rezeptor-Antikörper, der interne Referenz-Anti-Beta-Aktin-Antikörper für die primären Antikörper und der Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG H&L (HRP) (1/10000) für den Sekundärantikörper. Selektive Manipulation der Wirbelsäule kann das Wachstum und die Entwicklung von Rattenbabys mit Zerebralparese fördern, indem sie die Expression von Wachstumshormon (GH) und Wachstumshormonrezeptor (GHR) reguliert (Abbildung 7, Tabelle 6)26.
Die Förderung des Wachstums und der Entwicklung von Rattenbabys mit Zerebralparese kann den Gehalt an Serotonin und Noradrenalin im Hippocampus verbessern und dadurch die Lernfähigkeit und das Gedächtnis verbessern27.
Durch gezielte Manipulation der Wirbelsäule kann die lokale Akupunkturpunkttemperatur effektiv verbessert werden (Abbildung 8, Tabelle 7).
Die Infrarot-Wärmebildgebung wurde verwendet, um die Temperatur des lokalen Akupunkturpunkturbereichs vor und nach der Behandlung in der Behandlungsgruppe zu erfassen. Es zeigte sich, dass die Temperatur vor der Behandlung bei 32,92 ± 0,55 °C, unmittelbar nach der Behandlung bei 36,32 ± 0,15 °C und 2 min nach der Behandlung bei 35,32 ± 0,28 °C gehalten wurde. Die Temperatur betrug 5 min nach Behandlungsende 34,61 ± 0,17 °C und 10 min nach Behandlungsende 34,28 ± 0,60 °C. Die Unterschiede waren statistisch signifikant im Vergleich zur unmittelbaren Temperatur vor dem Ende der Behandlung und dem lokalen Akupunkturpunkt 2 min, 5 min und 10 min nach der Behandlung (P < 0,05). Nach selektiver Manipulation der Wirbelsäule wurde die Temperatur des lokalen Akupunkturpunkt-Bereichs in der Behandlungsgruppe erhöht und bis zu einem gewissen Grad gehalten.

Abbildung 1: Aufrichtreflex. (A) Schematische Darstellung des Aufrichtreflex-Experiments. Der Aufrichtreflextest wurde am 4. Tag nach der Geburt (am zweiten Tag nach der Modellierung) durchgeführt, um den Erfolg der Modellierung zu überprüfen. (B) Balkendiagramm des Aufrichtreflextests in jeder Gruppe (n = 6, Mittelwert ± SD). Anmerkung: ns zeigt P > 0,05 und keine statistische Differenz an. zeigt einen P < 0,0001 an, was auf eine hochsignifikante Differenz hinweist. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 2: Selektive Manipulation der Wirbelsäule. (A) Umgang mit Jungtieren vor der Manipulation. Die Rattenbabys wurden in die Handfläche des Bedieners gelegt und ruhig gehalten, was die Umgebung im Lager war. (B) Darstellung der selektiven Manipulation der Wirbelsäule. Drücken und kneten Sie die Muskeln auf beiden Seiten der Wirbelsäule. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 3: Karte der Akupunkturpunkte auf dem Rücken von Menschen und SD-Ratten. (A) Mensch und (B) SD-Ratte. C7: siebter Halswirbel; GV14: Dazhui (GV14), Lage: zwischen dem siebten Halswirbel und dem ersten Brustwirbel, dorsale Mittellinie; T3: dritter Brustwirbel; BL13: Feishu (BL13), Lage: zwischen den beiden Rippen unterhalb des dritten Brustwirbels; T5: fünfter Brustwirbel; BL15: Xinshu-Punkt, der sich zwischen den beiden Seiten der unteren Rippe des fünften Brustwirbels befindet; T7: siebter Brustwirbel; BL17: Geshu-Punkt, Lokalisation: untere und untere Rippen des siebten Brustwirbels; BL18: Ganshu-Punkt, Lokalisation: untere und untere Rippen des siebten Brustwirbels; T11: elfter Brustwirbel; GV6: Jizhong-Punkt, gelegen zwischen dem elften und zwölften Dornfortsatz des Brustwirbels; BL20: Pishu-Punkt, der sich zwischen den beiden Rippen unterhalb des zwölften Brustwirbels befindet; L2: zweite Lendenwirbelsäule; GV4: Mingmen (GV4), Lokalisation: die dorsale Medianlinie, die Vertiefung unter dem zweiten lumbalen Dornfortsatz; BL23: Shenshu-Punkt, der sich auf beiden Seiten der zweiten Lendenwirbelsäule befindet. GV20: Baihui (GV20), Lokalisation: medianes Scheitelbein; GV16, Fengfu-Punkt, Lokalisation: okzipito-atlantoaxiale gelenksdorsale Vertiefung hinter dem Hinterhauptkamm. Die Position der Akupunkturpunkte im menschlichen Körper stimmt in hohem Maße mit der Position der Akupunkturpunkte bei Tieren aus der anatomischen Position überein. Der abnormale Reaktionspunkt lag nahe am Projektionspunkt der innervierten Körperoberfläche. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 4: Balkendiagramm der Gewichtsmessung in jeder Gruppe (n = 6, Mittelwert ± SD). Anmerkung: ns P >0,05, kein statistischer Unterschied; **P < 0,01, ***P < 0,001,****P < 0,0001, war die Differenz statistisch signifikant. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 5: Balkendiagramm des Zeitpunkts des ersten Tropfens des Roat-Rod-Tests in jeder Gruppe (n = 6, Mittelwert ± SD). Hinweis: ****P < 0,0001, die Differenz war statistisch signifikant. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 6: Balkendiagramm der Fußfehler-Scores in jeder Gruppe (n = 6, Mittelwert ± SD). Hinweis: ****P < 0,0001, die Differenz war statistisch signifikant. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 7: Western-Blot-Banden von GH und GH-Rezeptor. Western Blot wurde verwendet, um die Sekretion von Wachstumshormon auf molekularbiologischer Ebene in jeder Gruppe nachzuweisen, und die Wirkung selektiver Wirbelsäulenmanipulation auf das Wachstumshormon wurde beobachtet. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 8: Temperaturüberwachung vor und nach der Behandlung. (Oberseite) Wärmebilder, die von einer Infrarot-Wärmebildkamera aufgenommen wurden. Die Temperatur (°C) des lokalen Akupunkturpunkt-Bereichs wurde vor und nach der Tuina-Behandlung mit einer Infrarot-Wärmebildkamera erfasst. (A) Vor der Tuina-Behandlung. (B) Temperatur unmittelbar nach Beendigung der Behandlung. (C) Lokale Akupunkturtemperatur 2 Minuten nach der Behandlung. (D) Lokale Akupunkturpunkttemperatur 5 Minuten nach Beendigung der Behandlung. (E) lokale Akupunkturpunkttemperatur 10 min nach der Behandlung. (Untere Platte) Balkendiagramm der Temperaturüberwachung vor und nach der Behandlung (n = 3, Mittelwert ± SD). *P < 0,05, P < 0,01, * * * * * P < 0,001, * * * * P < 0,0001, die Differenz ist statistisch signifikant. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
| Gruppe | Anzahl der Fälle (n) | Aufrichtender Reflex |
| Schein | 6 | 0,77 ± 0,10 |
| Steuerung | 6 | 19.00 ± 2.04* |
| Behandlung | 6 | 19,77 ± 0,55# |
Tabelle 1: Die Zeitstatistik des Aufrichtreflexes bei Säuglingsratten mit Zerebralparese (Mittelwert ± SD; n = 6). Die Welpen in jeder Gruppe wurden am 4. Tag nach der Geburt (am 2. Tag nach der Modellierung) dem Aufrichtreflextest unterzogen, um zu überprüfen, ob das Modell erfolgreich war. * Im Vergleich zur Scheingruppe < P 0,0001; # im Vergleich zur Kontrollgruppe < P 0,0001.
| Punktzahl | Standard für die Evaluierung |
| 1 | Wenn die junge Ratte auf die horizontale Leiter gesetzt wird, rutscht der Fuß beim Tragen des Gewichts ab, was das Gehen beeinträchtigt |
| 2 | Wenn die junge Ratte auf die Leiter gesetzt wird, rutscht der Fuß beim Tragen des Gewichts ab, beeinträchtigt aber nicht das Gehen |
| 3 | Wenn die junge Ratte auf die horizontale Leiter gestellt wird, bewegt die Ratte den Fuß schnell zur nächsten Stufe der Leiter, die das Gewicht trägt |
| 4 | Wenn die junge Ratte auf die horizontale Leiter gestellt wird, setzt die Ratte den Fuß teilweise auf und bewegt sich mit Gewicht über die Leiter |
| 5 | Wenn die junge Ratte auf die horizontale Leiter gestellt wird, setzt die Ratte ihren Fuß auf eine Stufe und bewegt sich schnell auf eine andere Stufe |
| 6 | Wenn die junge Ratte auf die horizontale Leiter gestellt wird, platziert die Ratte ihre Pfotenballen korrekt und trägt das Körpergewicht vollständig |
Tabelle 2: Standardtabelle für das Ergebnis des Fußfehlertests
| Uhrzeit (Tag) | Anzahl der Fälle (n) | Gruppe |
| Schein | Steuerung | Behandlung |
| Seite 3 | 6 | 8,52 ± 0,27 | 8,60 ± 0,08 | 8,45 ± 0,28D |
| Seite 14 | 6 | 35,97 ± 1,01 | 28,00 ± 0,74* | 33.78 ± 3.70Ñ |
| Seite 28 | 6 | 104,9 ± 3,53 | 80,35 ± 6,76* | 96.73 ± 7.63Ñ |
| Seite 42 | 6 | 194,1 ± 4,33 | 138,0 ± 6,02* | 173,9 ± 5,43#D |
| Seite 61 | 6 | 321,5 ± 5,67 | 230,3 ± 5,19* | 268,9 ± 15,22 #D |
Tabelle 3: Die Ergebnisse der Gewichtstests für jede Gruppe (Mittelwert ± SD) (g). Anmerkung: Ñ Im Vergleich zur Kontrollgruppe < P 0,01; ° Im Vergleich zur Scheingruppe < P 0,01; à Im Vergleich zur Kontrollgruppe < P 0,001; * Verglichen mit der Scheingruppe, P < 0,0001; # Im Vergleich zur Kontrollgruppe < P 0,0001; D Im Vergleich zur Scheingruppe < P 0,0001.
| Gruppe | Anzahl der Fälle (n) | Roat-Rute/Zeit/en |
| Schein | 6 | 296,1 ± 1,65 |
| Steuerung | 6 | 102,7 ± 7,73* |
| Behandlung | 6 | 220.1 ± 8.04#D |
Tabelle 4: Der Rotarod-Test an Säuglingsratten in jeder Gruppe (Mittelwert ± SD) (s). Anmerkung: * Verglichen mit der Scheingruppe < P 0,0001; # Im Vergleich zur Kontrollgruppe < P 0,0001; D Verglichen mit der Scheingruppe < P 0,0001.
| Gruppe | Anzahl der Fälle (n) | Fußfehler-Score |
| Schein | 6 | 5,53 ± 0,03 |
| Steuerung | 6 | 3,15 ± 0,43* |
| Behandlung | 6 | 4,42 ± 0,13#D |
Tabelle 5: Die Fußfehler-Scores jeder Gruppe (Mittelwert ± SD). Anmerkung: * Verglichen mit der Scheingruppe < P 0,0001; # Im Vergleich zur Kontrollgruppe < P 0,0001; D Verglichen mit der Scheingruppe < P 0,0001.
| Gruppe | GH | GHR |
| Schein | 2.325 ± 0.830 | 1.469 ± 0.265 |
| Steuerung | 1,563 ± 0,070# | 1.563 ± 0.070Ñ |
| Behandlung | 2.471 ± 0.956* | 2.471 ± 0.956& |
Tabelle 6: Wachstumshormon- und Wachstumshormonrezeptor-Grauwert-Daten des Western-Blot-Bandes (n = 10). GH:* Der paarweise Vergleich zwischen der Behandlungsgruppe und der Kontrollgruppe (P = 0,020 < 0,05) zeigte einen statistisch signifikanten Unterschied; # Der paarweise Vergleich zwischen der Scheingruppe und der Kontrollgruppe (P = 0,022 < 0,05) zeigte einen signifikanten Unterschied; Der paarweise Vergleich zwischen der Behandlungsgruppe und der Scheingruppe zeigte keine statistische Signifikanz (P = 0,076 > 0,05); GHR: & Paarweiser Vergleich zwischen Behandlungsgruppe und Kontrollgruppe (P = 0,024 < 0,05) zeigte einen signifikanten Unterschied; Ñ Der paarweise Vergleich zwischen der Scheingruppe und der Modellgruppe (P = 0,021 < 0,05) zeigte einen statistisch signifikanten Unterschied; Der paarweise Vergleich zwischen der Behandlungsgruppe und der Scheingruppe zeigte keine statistische Signifikanz (P = 0,085 > 0,05).
| Zeitpunkt der Therapie | Anzahl der Fälle (n) | Temperatur |
| Vor der Behandlung | 3 | 32,92 ± 0,55 |
| Sofort | 3 | 36,32 ± 0,15* |
| Nach 2 min | 3 | 35,32 ± 0,28# |
| Nach 5 min | 3 | 34.61 ± 0.17Ñ |
| Nach 10 min | 3 | 34.28 ± 0.60Tag |
Tabelle 7: Ergebnisse der Temperaturüberwachung vor und nach der Behandlung (Mittelwert ± SD) (°C). Anmerkung: * Im Vergleich zu denen vor der Behandlung < P 0,0001; # Im Vergleich zu vor der Behandlung < P 0,001; D Im Vergleich zu 0 min nach der Behandlung war P <0,001; Ñ Im Vergleich zu vor der Behandlung < P 0,01; à Im Vergleich zur Vorbehandlung < P 0,05.