Es wurden zwei Reihen von Markierungsbewertungen durchgeführt, um die Wirksamkeit der Markierung von Jungfischen zu untersuchen - Vorversuche im Jahr 2020 und eine Langzeitstudie im Jahr 2021. Im November 2020 wurden am PNNL vorläufige Laboruntersuchungen durchgeführt, um eine bevorzugte Methode zur Implantation von Amerikanischem Maifisch mit einem neuartigen akustischen Mikrotransmitter zu bestimmen. Prototyp-Senderdesigns (n = 4, P1-P4) wurden mit verschiedenen Markierungspositionen (Magen, Brust, Becken und Rücken) gepaart, um insgesamt 4 einzigartige akustische Sender-Markierungsortbehandlungen zu erhalten (n = 40 Fische pro Behandlung, Tabelle 1). Alle Testfische wurden nach dem Zufallsprinzip einem Behandlungs- und Auffangbecken zugewiesen. Die Testfische wurden 14 Tage lang in 2 Auffangbecken mit der gleichen Anzahl von Fischen aus jeder Behandlung (d. h. 20 Fische pro Behandlung) pro Tank gehalten. In den ersten 2 Tagen der Auswertung wurden die Maifische in Brackwasser (7,5 ppt) gehalten und durften sich von der Markierung und Handhabung erholen. Dann wurden die Tanks für den Rest des Bewertungszeitraums auf Durchfluss-Frischwasser umgestellt.
Für die vorläufige Bewertung reichten markierte Fisch- und Flossenclip-Kontrollen mit einer Gabellänge von 50 bis 80 mm. Das Überleben und die Retention von juvenilen Maifischen waren bei Fischen, die über einen Brustschnitt implantiert wurden, im Vergleich zu den anderen Markierungstechniken am höchsten (Abbildung 3). Zusätzliche Pilotauswertungen zeigten auch, dass Handhabungstechniken wie Wasser-zu-Wasser-Transfers und das Halten von Fischen im Brackwasser vor und nach stressigen Ereignissen wie dem Markieren entscheidend für die Erhöhung der Überlebensraten waren.
Unter Verwendung der erfolgreichen Markierungs- und Handhabungsprotokolle aus der vorläufigen Bewertung wurde 2021 am PNNL eine Laborstudie durchgeführt, um das langfristige 60-Tage-Überleben und die Tag-Retention von juvenilen amerikanischen Maifischen zu bewerten, denen ein akustischer Sender unter Verwendung der Brustschnitt-Markierungsmethode implantiert wurde. Bei der Langzeitbewertung wurde der Dummy-Sender P5 (Abbildung 4) verwendet, ein verbessertes Prototypdesign, das in Form und Größe dem in der Vorbewertung verwendeten P1-Design ähnelt. Die durchschnittlichen Abmessungen und das Gewicht des Dummy-P5-Tags betrugen 7,6 mm Länge × 2,3 mm Durchmesser und ein Luftgewicht von 0,058 g (Standardabweichung 0,002 g), was zu einer Tag-Belastung von <1 % führte. Der Prototyp des akustischen Senders mit Funktionskomponenten (Abbildung 4) hat Abmessungen von 7,6 mm Länge x 2,0 mm Durchmesser und ein Luftgewicht von 0,050 g.
Junge amerikanische Maifische, die in der Langzeitbewertung verwendet wurden, waren zum Zeitpunkt der Tests 4 Monate lang in Gefangenschaft gehalten worden. Während das Experiment so konzipiert war, dass die gleiche Anzahl von Behandlungs- und Kontrollfischen über einen Zeitraum von 60 Tagen in zwei Tanks gehalten wurde, war die verbleibende Anzahl von Maifischen zum Zeitpunkt der Markierung gering. Daher wurden der markierten Behandlungsgruppe nach dem Zufallsprinzip mehr Maifische zugewiesen als der Kontrollgruppe, um ein besseres Verständnis für die langfristige Wirksamkeit der Markierungstechnik bei Maifischen zu erhalten. In jedem der beiden Becken befanden sich 27 Behandlungsfische und 9 oder 10 Kontrollfische. Da das Überleben von Tank A (13,8 %) jedoch signifikant schlechter war als das von Tank B (78,4 %; Fishers exakter Test, p < 0,001) und es gab keinen Unterschied im Überleben zwischen der markierten und der Kontrollgruppe innerhalb jedes Tanks, nur die Ergebnisse für Tank B sind hier enthalten.
Maifische (Gabellänge 69-105 mm; Gewicht 3,9-11,7 g) wurden entweder mit dem P5-Sender über den Brustschnitt markiert (n = 27) oder der Kontrollgruppe zugeordnet (n = 10). Kontrollfische wurden mit den gleichen Verfahren behandelt, einschließlich der Platzierung auf der Operationsunterlage für ~20 s, aber sie erhielten weder einen Flossenclip oder einen Schnitt noch wurden ihnen ein Sender implantiert. Nach der Markierung wurden beide Behandlungsgruppen 1 Tag lang in Brackwasser (7,5 ppt) gehalten und dann für den Rest der Studie auf Flusswasser umgestellt. Das Überleben nach 60 Tagen betrug 81,5 % für die markierte Gruppe und 70 % für die nicht markierten Kontrollen (Abbildung 5). Das Überleben von markierten Fischen in dieser Bewertung wurde sowohl als Überleben als auch als Markierungsretention definiert, da die Austreibung von Tags in einer Telemetriestudie nicht von einem Mortalitätsereignis unterschieden werden kann. Es gab keinen signifikanten Unterschied im Überleben zwischen den beiden Gruppen (exakter Fisher-Test, P = 0,884); Die Trennschärfe, einen Unterschied zu erkennen, betrug jedoch aufgrund der kleinen Stichprobengrößen 38,4 %. Obwohl die Aussagekraft, einen Unterschied zwischen den Behandlungen zu erkennen, gering war, zeigen die Ergebnisse der Langzeitbewertung, dass dieses Handhabungs- und Markierungsprotokoll mit mäßigem Erfolg verwendet werden kann, um Amerikanischen Maifisch mit akustischen Sendern zu implantieren.

Abbildung 1: Mit Brackwasser gefüllter Bergungstank nach dem Tagging. Ein Lufthebesystem versorgt den statischen Tank mit Sauerstoff. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 2: Akustische Senderimplantation eines juvenilen amerikanischen Maifisches. Junger amerikanischer Maifisch (A) mit einem Brustschnitt und (B) mit dem Dummy-P5-Sender, der in den Schnitt eingeführt wurde. Beachten Sie, dass das Maul des Maifisches teilweise in Wasser getaucht ist, das aus dem blauen Schlauch fließt. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 3: Überlebensprozentsatz über eine vorläufige 14-Tage-Bewertung mit einer Gruppe von nicht markierten Kontrollen und vier markierten Gruppen von juvenilen Maifischen. Die markierten Behandlungen bestanden aus vier Markierungsstellen (Magen, Brust, Becken und dorsal), die jeweils mit einem einzigartigen Transmitter-Prototyp (P1-P4) gepaart waren. Das Überleben der markierten Fische wurde sowohl als Überleben als auch als Markierungsretention definiert. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 4: Akustische und Dummy-Sender zur Markierung von juvenilen Amerikanischen Maifischen. (A) Funktioneller akustischer Mikrotransmitter und (B) der Dummy-P5-Prototyp-Sender, der in der 60-Tage-Laborüberlebensstudie verwendet wurde. Beachten Sie, dass die Zahlen 4-7 auf dem Lineal Zentimeter darstellen. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 5: Überlebensprozentsatz des Amerikanischen Maifisches über eine Langzeitstudie mit 60 Tagen. Jungfische wurden entweder nicht markiert (Untagged Controls; durchgezogene Linie) oder markiert (Tagged [Brust P5]; gestrichelte Linie) mit einem Dummy-Sender. Das Überleben der markierten Gruppe wurde sowohl als Überleben als auch als Tag-Retention definiert. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
| Tag-Typ | Tag-Position | N | Gabellänge (mm) | Mittleres Tag-Gewicht (SD; g) | Tag-Belastung (%) | Überleben (%) | Mittlere Zeit zum Taggen/Clip(s) |
| Bereich | Mittelwert (SD) |
| P1 | Magen | 40 | 50 - 76 | 60 (6.0) | 0.058 (0.003) | 1.5 - 5.2 | 45 | 12 |
| P2 | Brust | 40 | 50 - 78 | 60 (7.3) | 0.039 (0.001) | 1.0 - 3.2 | 80 | 23 |
| P3 | Becken | 40 | 50 - 70 | 58 (5.3) | 0.039 (0.001) | 1.0 - 4.1 | 55 | 26 |
| P4 | Dorsal | 40 | 50 - 80 | 61 (6.8) | 0.088 (0.004) | 0 | 60 | 57 |
| Steuerung | NA (Clip) | 40 | 50 - 80 | 59 (5.7) | NA | 0 | 92.5 | 14 |
Tabelle 1: Markierungs- und Überlebensinformationen für Amerikanische Maifische, die im Rahmen der vorläufigen Bewertung mit Prototypsendern (P1-P4) implantiert oder mit oberen Schwanzflossenclips und unteren Schwanzflossenclips markiert wurden (Kontrolle). Die Markierungsposition für die Kontrollgruppe ist Nicht zutreffend (NA), da diese Fische nur Flossenclips (Clip) erhalten haben. Beachten Sie, dass der Tag-Typ P4 ein neutral schwimmfähiges Design war. Die Standardabweichung (SD) des Mittelwerts ist in Klammern angegeben.