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Methodenartikel

Bilaterales renales Ischämie-Reperfusionsmodell für akutes Nierenversagen bei Mäusen

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DOI:

10.3791/65838

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2. Februar 2024

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* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Das Ischämie-Reperfusions-Schädigungsmodell (IRI) kann in verschiedenen Stadien der Entwicklung einer akuten Nierenschädigung (AKI) eingesetzt werden, insbesondere während des Fortschreitens der AKI bis zur chronischen Nierenerkrankung (CKD). Hier beschreiben wir das Verfahren zur Entwicklung von IRI-Modellen bei Mäusen über einen transabdominalen Zugang, bei dem Nierenstiele über einen Gefäßclip eingeklemmt werden, um eine ischämische Verletzung zu induzieren.

Zusammenfassung

Akutes Nierenversagen (AKI) ist definiert als ein rascher Rückgang der Nierenfunktion, bei dem eine anhaltende Nierenfunktionsstörung aufgrund des irreversiblen Verlusts von Nephronen und ihrer maladaptiven Reparatur allmählich zu einer chronischen Nierenerkrankung (CKD) fortschreitet. In den letzten Jahren hat die Inzidenz von AKI in Bezug auf verschiedene Ätiologien zugenommen, darunter Volumenmangel, Sepsis, Nephrotoxizität, Muskelverletzungen und schwere Traumata, bei denen Ischämie-Reperfusionsschäden (IRI) für die meisten Episoden verantwortlich sind. Die Entwicklung des IRI-Modells bei Mäusen wird durch chirurgisches Abklemmen der Nierenstiele induziert, was leistungsfähige und kontrollierbare Werkzeuge für präklinische Modelle von AKI bietet. Wichtig ist, dass das IRI-Modell in verschiedenen Phasen der AKI-Entwicklung eingesetzt wird, insbesondere in den Prozessen von AKI bis CKD. Obwohl das IRI-Modell in vielen Laboratorien weit verbreitet ist, beeinflussen eine Reihe von Variablen immer noch die Ergebnisse dieses Modells. Hier beschreiben wir das Verfahren der IRI-Modellentwicklung, um Forschern eine wiederholbare und zuverlässige Methode zur Verfügung zu stellen, um die zugrunde liegende Pathogenese bei der Entwicklung von AKI und die Progression von AKI zu CKD zu untersuchen.

Einleitung

Akutes Nierenversagen (AKI) ist ein schweres klinisches Syndrom mit signifikanter Morbidität und Mortalität, definiert als ein Anstieg des Serumkreatinins um ≥ 0,3 mg/dl (26,5 μM/l) innerhalb von 48 h oder ein Anstieg des Serumkreatinins auf das 1,5-fache des Ausgangswerts innerhalb von 7 Tagen auf das ≥ oder das Urinvolumen < 0,5 ml/kg/h für 6 h1, 2,3. Trotz jahrzehntelanger Forschung fehlt es an einer wirksamen Therapie für AKI, um Nierenschäden zu lindern oder die Genesung der Nieren zu beschleunigen, und ein beträchtlicher Teil der AKI-Pa....

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Protokoll

Männliche C57BL/6J-Mäuse im Alter von 8 Wochen und mit einem Gewicht von 25 g wurden verwendet, um das AKI-Modell durch bilaterale Ischämie-Reperfusion zu etablieren. Wie in früheren Studien halten wir die Körpertemperatur bei etwa 36,5 °C bis 37 °C, und die Dauer der Nierenischämie beträgt 30 Minuten in der IRI-Operation12,13. Insgesamt wurden 6 Mäuse für jede Gruppe benötigt, und scheinoperierte Mäuse dienten als Kontrollen. Die Tierversuche in dieser Studie wurden vom Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) der Universität Zhejiang genehmigt, um das Wohlergehen ....

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Ergebnisse

Zustand der Niere während der Operation

Charakteristisch für eine erfolgreiche Ischämie ist, dass sich die Niere innerhalb von 1-2 Minuten allmählich von rot zu dunkelviolett ändert, und eine erfolgreiche Reperfusion zeichnet sich dadurch aus, dass sich die Niere innerhalb von 1-2 Minuten allmählich von tiefviolett zu rot ändert.

Histologie der Niere nach der Operation

HE und periodische saure Schiff (PAS.......

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Diskussion

In diesem Artikel haben wir ein detailliertes Verfahren zum renalen IRI-Modell vorgestellt und anschließend hervorgehoben, dass es sich um ein robustes Modell für die Progression von AKI und AKI zu CKD handelt. Darüber hinaus zeigen wir die Auswirkungen der beiden Hauptkriterien der Nierenschädigung, einschließlich der Nierenhistologie und -funktion.

Mehrere wichtige Punkte bei chirurgischen Eingriffen müssen hervorgehoben werden, um ein wiederholbares und zuv.......

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Offenlegungen

Die Autoren erklären, dass kein Interessenkonflikt besteht.

Danksagungen

Wir bedanken uns bei allen Teilnehmenden für die Mitarbeit an der aktuellen Studie. Diese Studie wurde durch die Finanzierung der Zhejiang Provincial Natural Science Foundation of China (LZ22H050001) und des Programms der Provinz Zhejiang für die Kultivierung hochrangiger innovativer Gesundheitstalente für Weiqiang Lin unterstützt.

....

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
TierhaarschneiderFEIYUBIO19-7002
1-ml-SpritzenLongreenSR60061
EthanolMacklinE885996
GazeFEIYUBIO19-5022
Homöothermisches MonitorsystemWarmmate40 x 50
NadelhalterDKBTCZQ-00160
SpreizerRWDR22029-03
Sterile KochsalzlösungBiosharpBL158A
GewebeschereDKBTDC-YKJ1002
GewebepinzetteDKBTDK079904
GefäßclipFine Science Tools18055-02
Vicryl NahtShanghai Jinhuan4 -0 

Referenzen

  1. Al-Jaghbeer, M., Dealmeida, D., Bilderback, A., Ambrosino, R., Kellum, J. A. Clinical decision support for in-hospital AKI. J Am Soc Nephrol. 29 (2), 654-660 (2018).
  2. Kellum, J. A., Lameire, N. KDIGO AKI Guideline Work Group. Diagnosis, evaluat....

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Nachdrucke und Genehmigungen

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