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Methodenartikel

Messung des assoziativen Lernens in der Chemotaxis des Fadenwurms Caenorhabditis elegans

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DOI:

10.3791/66311

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17. Juni 2025

 ,  , 
1Institute for Mind Brain and Behavior, Faculty of Medicine, HMU Health and Medical University Potsdam

* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Hier stellen wir ein Protokoll vor, um assoziatives Lernen durch klassische Konditionierung im Modellorganismus C. elegans zu testen. Das Paradigma basiert auf der Paarung der Salzkonzentration in der Umwelt mit dem Vorhandensein oder Fehlen von Nahrung, was ihre Chemotaxis in Richtung oder weg von Salz verändert.

Zusammenfassung

Um ihr Verhalten anzupassen, ordnen Tiere sensorischen Informationen durch assoziatives Lernen eine Valenz zu und aktualisieren diese Assoziation, wenn sich die Umweltbedingungen ändern. Die Verhaltensreaktionen von Caenorhabditis elegans auf Natriumchlorid bieten ein gut definiertes Paradigma für die Untersuchung der Mechanismen, die das assoziative Lernen steuern. Die Exposition von Würmern gegenüber bestimmten NaCl-Konzentrationen in Verbindung mit dem Vorhandensein oder Fehlen von Nahrung führt zu einer Chemotaxis in Richtung bzw. weg von dieser NaCl-Konzentration. Das assoziative Gedächtnis bildet sich innerhalb weniger Stunden und kann im gleichen Zeitraum verändert werden, wenn die Tiere einer anderen NaCl-Konzentration ausgesetzt werden.

Hier beschreiben wir, wie die Verhaltensplastizität und das Lernen auf der Grundlage der Chemotaxis von C. elegans-Salz getestet werden können. Die Assay-Stämme werden in synchronisierten Kohorten bis zum Erreichen des Erwachsenenalters gezüchtet und dann mehrere Stunden lang auf Platten mit unterschiedlichen NaCl-Konzentrationen konditioniert, entweder in Gegenwart oder ohne Nahrung. Die Tiere werden dann auf Testplatten übertragen, die Regionen mit niedrigen, mittleren oder hohen NaCl-Konzentrationen enthalten, und 30 Minuten lang kriechen gelassen, bevor die Anzahl der Würmer in jeder Region gezählt wird. Aus der Verteilung der Würmer auf der Platte wird dann ein Chemotaxis-Index berechnet. Der Assay kann verwendet werden, um die Wirkung einer Reihe von Faktoren zu testen, die das Lernen beeinflussen.

Einleitung

Um sinnvoll mit ihrer Umgebung zu interagieren und adaptives Verhalten zu erzeugen, müssen Tiere die sensorischen Informationen, die sie erhalten, interpretieren: Ob ein bestimmter sensorischer Hinweis für ihr Überleben vorteilhaft oder schädlich ist, ist fast immer nicht vorherbestimmt, sondern hängt vom Kontext ab. Eine zentrale Aufgabe des sensorischen Systems und des Nervensystems ist es daher, Umweltinformationen durch assoziatives Lernen Valenz zuzuweisen. Einige Reize sind von Natur aus appetitiv, wie z. B. Essen, und andere sind von Natur aus aversiv, wie z. B. nozizeptive Hinweise. Solche unbedingten Reize (US) können die Reaktionen auf andere Reize verändern, die zusammen mit ihnen präsentiert werden; Infolgedessen können Tiere eine Anziehungskraft oder Abneigung gegen den anderen, konditionierten Reiz (CS) entwickeln. Dies wird so interpretiert, dass CS die US 1,2,3 signalisiert oder vorhersagt. Die Untersuchung von Modellen des assoziativen Lernens ist notwendig, um die zugrundeliegenden genetischen, zellulären und physiologischen Mechanismen aufzuklären. Dies kann jedoch aufgrund der Notwendigkeit, In-vivo-Modelle zu verwenden, der Variabilität des Verhaltens, der erforderlichen Lizenzierung für den Umgang mit Tieren oder der oft langen Zeiträume für die Ausbildung sowohl des Forschers als auch der Tiere eine Herausforderung darstellen, und dies schließt in der Regel aus, dass es von Studenten im Grundstudium in einem Forschungsumfeld und noch mehr in einem Lehrumfeld durchgeführt wird.

Daher bieten wirbellose Modelle die Möglichkeit, assoziative Lernassays mit Studenten oder MSc-Studenten durchzuführen. Wirbellose Tiere benötigen keine Tierlizenz, um mit ihnen umzugehen, und können kostengünstig sein. Ein häufig verwendetes Paradigma für assoziatives Lernen ist das Salzchemotaxis-Lernen bei C. elegans 4,5,6,7,8,9. C. elegans spüren die Konzentration von Natriumchlorid (NaCl) in ihrer Umgebung und lernen, ein bestimmtes [NaCl] mit dem Vorhandensein bzw. Fehlen von Nahrung in Verbindung zu bringen. Im Allgemeinen lernen Tiere, in Richtung Salzkonzentrationen zu wandern, die zuvor mit reichlich bakteriellem Futter präsentiert wurden, und lernen, von denen wegzuwandern, die in Abwesenheit von bakteriellem Futter präsentiert wurden. Salz ist also der bedingte Reiz, und Nahrung oder Hunger ist der unbedingte Reiz3. Diese Assoziation bildet sich innerhalb von weniger als einer Stunde und ist ein Beispiel für ein kurzzeitassoziiertes Gedächtnis. Das assoziative Lernen der NaCl-Chemotaxis wird unter anderem durch den Calcium/Calmodulin-abhängigen Kinase-Signalweg (CaMK), den dopaminergen und den Insulin/Phosphatidylinositol (PI)-3-Kinase-Signalweg 5,9,10 moduliert, was darauf hindeutet, dass es Motivationssysteme und CaMK-abhängige synaptische Plastizität beinhaltet und auf ähnliche Weise wie die Signalwege des assoziativen Lernens bei Wirbeltieren funktionieren könnte.

In einem etablierten Protokoll für das Lernen der Salzchemotaxis wandern Tiere in einem räumlichen Gradienten von Salz auf einer Agarplatte, der durch Platzieren von zwei Agarpfropfen ohne bzw. hohem Salzgehalt auf der Platte7 erzeugt wird. Diese Assays sind von Studenten aufgrund der dynamischen Änderung der NaCl-Konzentration auf der Chemotaxis-Assay-Platte über Zeit und Raum schwer quantitativ durchzuführen, da das NaCl aus den Pfropfen kontinuierlich in die Agarplatte diffundiert. Ein einfacher durchzuführender Assay ist die Verwendung von Quadrantenplatten, bei denen zwei unterschiedliche Salzkonzentrationen (z. B. 25 mM NaCl und 0 mM NaCl) präsentiert und durch plastische Barrieren getrenntwerden 11. Aufgrund der Darstellung von nur zwei verschiedenen NaCl-Konzentrationen kann es jedoch nicht gleichzeitig verwendet werden, um die Anziehungskraft und/oder Vermeidung von erniedrigtem oder erhöhtem NaCl im Vergleich zur Ausgangsbedingung zu testen. C. elegans wird in der Regel auf NGM-Platten (Nematode Growth Media) in Gegenwart von 50 mM NaCl- und E. coli OP50-Bakterien gezüchtet12 und bildet daher standardmäßig eine positive Assoziation dieser NaCl-Konzentration mit Lebensmitteln.

Hier stellen wir ein angepasstes Salz-Chemotaxis-Lernprotokoll vor, das sowohl von Forschern als auch von Studenten durchgeführt werden kann. Die Tiere werden zunächst an verschiedene NaCl-Umgebungen gewöhnt, die in Gegenwart oder Abwesenheit von Nahrung präsentiert werden. Sie werden dann auf Assay-Platten mit einer Auswahl an niedrigen, mittleren und hohen Salzkonzentrationen in Y-Kammer-Agarplatten übertragen. Ihr Chemotaxis-Lernen in diesem Setting kann genutzt werden, um die Wirkung verschiedener Faktoren zu untersuchen, die es modulieren, wie z.B. Genotyp, Umweltkontexte oder Alter der Tiere.

Dieses Protokoll ist auf eine praktische Laborklasse zugeschnitten, die in acht Studentengruppen aufgeteilt ist, wobei jede Studentengruppe zu jedem experimentellen Zeitpunkt einen Satz von sechs Messungen durchführt (eine Messung pro experimenteller Bedingung). Das Protokoll kann jedoch so angepasst werden, dass es für einen einzelnen Experimentator oder für eine beliebige Anzahl von Gruppen/Personen funktioniert, mit entsprechenden Änderungen der Reagenzienmengen.

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Protokoll

1. Vorbereitung von Wachstumsplatten (GP) zur Synchronisierung von C. elegans vor dem assoziativen Lerntest und Konditionierungsplatten (CP) zur Induktion der [NaCl]-Nahrungsassoziation am Testtag

HINWEIS: Petrischalen für das Wachstum und die Konditionierung sind identisch mit den Standardplatten für Nematodenwachstumsmedien (NGM)12, mit der Ausnahme, dass die NaCl-Konzentration in den 0 mM NaCl CP und 100 mM NaCl CP Platten variiert wurde.

  1. Bereiten Sie vier saubere 500-ml-Glasflaschen vor und fügen Sie Folgendes hinzu:
    1. 1,25 g Pepton, 8,5 g Agar, 487,5 ml destilliertes Wasser und einen Magnetrührer in eine Flasche geben (für 0 mM NaCl CP);
    2. Geben Sie 1,5 g NaCl, 1,25 g Pepton, 8,5 g Agar, 487,5 ml destilliertes Wasser und einen Magnetrührer in jede von zwei Flaschen (für 50 mM NaCl CP bzw. GP);
    3. Geben Sie 3 g NaCl, 1,25 g Pepton, 8,5 g Agar, 487,5 ml destilliertes Wasser und einen Magnetrührer in eine Flasche (für 100 mM NaCl CP).
  2. Autoklavieren Sie die vier Flaschen für 15 min bei 121 °C und lassen Sie die Flaschen dann 30 min bei 55 °C in einem Wasserbad abkühlen.
  3. Stellen Sie die Flaschen (eine nach der anderen) auf einen erhitzten Magnetrührer. Geben Sie in jede Flasche 12,5 ml 1 M KPO4 (pH = 6,0 bei Raumtemperatur [RT]). 2 Minuten lang gründlich mischen, dann 0,5 ml 1 M CaCl2, 0,5 ml 5 mg/ml Cholesterin in Ethanol und 0,5 ml 1 M MgSO4 hinzufügen (alle Lösungen müssen steril sein). Durch magnetisches Rühren mischen.
    HINWEIS: Gründliches Mischen nach Zugabe von KPO4 verhindert die Ausfällung von Calciumphosphat bei Zugabe von CaCl2.
  4. Für jeden Plattentyp (0 mM CP, 50 mM CP, 100 mM CP, GP) aliquotieren 8 mL des jeweiligen Mediums auf jede 55 mm x 10 mm Petrischale unter nahezu sterilen Bedingungen (in einer Strömungshaube oder neben einem Bunsenbrenner).
    HINWEIS: In diesem Schritt können ca. 62 NGM-Platten jedes Typs hergestellt werden.
  5. Kühlen Sie die Platten ab, indem Sie sie ca. 3 h bei RT stehen lassen, und lagern Sie sie dann bis zur Verwendung bis zu 2 Wochen bei 4 °C.
  6. 200 μl E. coli OP50-Suspension in jedes NGM GP geben und über Nacht bei 20 °C in einem Inkubator trocknen lassen.
    HINWEIS: Die Platten können bis zu 1 Woche bei RT gelagert werden, bevor sie verwendet werden.

2. Pflege von C. elegans und Vorbereitung auf den assoziativen Lerntest mittels zeitgesteuerter Eiablage 13 (3 Tage vor dem Assay)

HINWEIS: Für eine Runde des Chemotaxis-Assays im empfohlenen Format sind mindestens 24 Platten für das Wachstum (GP), 48 Platten für den Assay (Assay Plates, AP) und 8 Platten pro Konditionierungsgruppe (Conditioning Plates, CP) erforderlich. Für eine Klasse, die in acht Schülergruppen aufgeteilt ist, bedeutet dies, dass jede Schülergruppe 3 GP, 6 CP und 6 AP erhält - d.h. 1 CP und 1 AP für jede experimentelle Bedingung.

  1. C. elegans N2 (var. Bristol) wird auf NGM-Agarplatten, die mit lebendem E. coli OP50 gefüttert werden, bei 20 °C gehalten. Lagern Sie die Platten während der Wartung auf dem Kopf, um den Feuchtigkeitsverlust der Platten zu minimieren.
  2. Übertragen Sie 30 junge (Tag 2) N2-Erwachsene auf jeden Hausarzt.
  3. Lassen Sie die Tiere ca. 8 h bei 20 °C Eier legen.
  4. Alle adulten Tiere von den Tellern nehmen und kopfüber bei 20 °C 3 Tage lang kultivieren.

3. Vorbereitung des Assays (1 Tag vor dem Assay)

  1. Bereiten Sie ausgesäte (+) und ungesäte (-) CP vor.
    1. Die Hälfte der Charge von jeweils 0 mM NaCl CP, 50 mM NaCl CP und 100 mM NaCl CP mit 200 μL OP50 pro Platte (CP0+, CP50+ bzw. CP100+) aussäen.
      HINWEIS: Die Zugabe der OP50-Suspension zu CP0+ kann dazu führen, dass eine kleine Menge NaCl (<2 mM NaCl) übertragen wird, was das Verhalten der Chemotaxis wahrscheinlich nicht wesentlich beeinflusst. In Situationen, in denen geringe Konzentrationen von NaCl relevant sind, könnte dies durch Zugabe von 2 mM NaCl zu den CP0-Platten und dem "No Salt"-Sektor auf den Assay-Platten ausgeglichen werden.
    2. Die Platten über Nacht bei 20 °C in einem Inkubator neben der ungesäten Hälfte des CP (CP0-, CP50- bzw. CP100-) trocknen lassen
  2. Bereiten Sie die Assay-Platten (AP) vor.
    1. Bereiten Sie drei saubere 1-Liter-Glasflaschen vor und fügen Sie Folgendes hinzu:
      1. Geben Sie 2,5 g Pepton, 17 g Agar, 975 mL destilliertes Wasser und einen Magnetrührer in eine Flasche (für 0 mM NaCl)
      2. Geben Sie 3 g NaCl, 2,5 g Pepton, 17 g Agar, 975 mL destilliertes Wasser und einen Magnetrührer in eine Flasche (für 50 mM NaCl)
      3. Geben Sie 6 g NaCl, 2,5 g Pepton, 17 g Agar, 975 mL destilliertes Wasser und einen Magnetrührer in eine Flasche (für 100 mM NaCl)
    2. Autoklavieren Sie die drei Flaschen für 15 min bei 121 °C, dann lassen Sie die Flaschen 30 min bei 55 °C im Wasserbad abkühlen.
    3. Beschriften Sie in der Zwischenzeit den Boden jedes Abschnitts der Y-Petrischale (eine 90 mm x 10 mm große Petrischale, die durch eine Innenwand in drei Kammern unterteilt ist) mit der entsprechenden NaCl-Konzentration des Mediums, das hineingegossen werden soll. Zeichnen Sie einen Kreis mit einem Radius von 5 mm um die Mitte der Platte, wo sich die drei Wände treffen (Abbildung 1).
      HINWEIS: Der Bereich innerhalb des Kreises stellt zusammen mit den Wänden selbst den Ausschlussbereich für die Zählung dar: Würmer, die während der Zählung in diesen Bereichen gefunden werden, werden nicht auf die Gesamtsumme eines Sektors angerechnet.
    4. Stellen Sie die Flaschen (eine nach der anderen) auf einen erhitzten Magnetrührer. Geben Sie in jede Flasche 25 mL 1 M KPO4 (pH = 6,0 bei RT). 2 Minuten lang gründlich mischen, dann 1 ml 1 M CaCl2, 1 ml 5 mg/ml Cholesterin in Ethanol und 1 ml 1 M MgSO4 hinzufügen (alle Lösungen müssen steril sein). Durch magnetisches Rühren mischen.
    5. Aliquotieren Sie das 0 mM Medium in ein Fach einer 90 mm x 10 mm großen Y-Petrischale, bis das Medium die Oberseite der Innenwand erreicht, und lassen Sie es dann ca. 5 Minuten lang erstarren.
    6. Das 100 mM Medium wird in das zweite Kompartiment der Y-Petrischale aliquotiert, bis das Medium den daneben erstarrten 0 mM NaCl-Abschnitt berührt. Um ein Übergreifen auf den angrenzenden leeren Abschnitt zu vermeiden, füllen Sie den 100-mM-Abschnitt bis zum Rand der inneren Y-Wand und verwenden Sie dann eine sterile 10-μl-Pipettenspitze, um die Oberflächenspannung des Mediums entlang der Y-Wand zu brechen und es mit dem 0 mM NaCl-Abschnitt zu verbinden. Lassen Sie dann ca. 5 Minuten lang fest.
    7. Das 50 mM Medium wird in das verbleibende leere Kompartiment der Y-Petrischale aliquotiert, bis das Medium die erstarrten 0 mM NaCl und 100 mM NaCl angrenzenden Abschnitte berührt. Achten Sie darauf, dass das Medium nicht in die angrenzenden Abschnitte überschwappt. Lassen Sie dann ca. 5 Minuten lang fest.
    8. Lagern Sie die Platten über Nacht bei 20 °C in einem Inkubator.
      HINWEIS: Mit dieser Methode können ca. 50 AP hergestellt werden.
  3. 1 l steriler M9-Puffer14 wird vorbereitet.

4. C. elegans assoziativer Lernassay (hier von 8 Gruppen parallel durchgeführt)

  1. Pipettieren Sie 1 ml sterilen M9-Puffer auf einen GP und schwenken Sie die Platte vorsichtig, um die Würmer (meist 1-Tages-Erwachsene) aus dem OP50 und dem Agar zu lösen und eine Suspension zu bilden.
  2. Kippen Sie die Platte, sammeln Sie die Wurmsuspension in M9-Puffer mit einer 1-ml-Pipettenspitze aus Kunststoff und geben Sie sie in ein 1,5-ml-Mikrozentrifugenröhrchen.
    HINWEIS: Der obere Teil der Pipettenspitze kann mit einer Schere gekürzt werden, um den Durchmesser der Öffnung zu vergrößern. Dies reduziert die Scherbelastung und die physischen Schäden, wenn die Würmer durch die Spitze gelangen, und kann besonders bei der Arbeit mit 200-μl-Pipettenspitzen nützlich sein. Vor Beginn der Versuche ist es wichtig sicherzustellen, dass die Würmer nicht an der Art des verwendeten Rohrs kleben. Dies kann durch Beobachtung des Röhrchens unter einem Präpariermikroskop erfolgen, nachdem die Wurmsuspension entfernt wurde.
  3. Wiederholen Sie den Vorgang für alle GP und lassen Sie dann die Würmer ca. 60 s lang am Boden der Mikrozentrifugenröhrchen absetzen und ein Pellet bilden.
  4. Entfernen Sie den Überstand/überschüssigen M9-Puffer mit einer 1-ml-Pipette und achten Sie darauf, das Pellet nicht zu beschädigen.
  5. Waschen Sie das Pellet zwei weitere Male mit 1 mL sterilem M9-Puffer, um OP50-Reste zu entfernen. Lassen Sie das Pellet zwischen den Wäschen ca. 60 s einwirken. Resuspendieren Sie das Pellet nach dem Waschen auf 300 μl mit M9-Puffer.
  6. Übertragen Sie langsam 50 μl der Wurmsuspension (ca. 200-300 Tiere) auf jede Konditionierungsplatte (CP0-, CP0+, CP50-, CP50+, CP100- und CP100+). Schwenken Sie die Suspension jedes Mal, bevor Sie aliquotieren, um die Würmer gleichmäßig schwebend zu halten. Bei Platten, die mit OP50 besät sind, platzieren Sie das Wurmtröpfchen vom bakteriellen Futterrasen entfernt. Lassen Sie die Suspension in den Agar einziehen.
  7. Lagern Sie die Platten kopfüber bei 20 °C in einem Inkubator für ca. 4 h, damit die Würmer umherwandern können.
    HINWEIS: Der Konditionierungsschritt kann auf 2 Stunden verkürzt werden, um den Stundenplänen der Bachelor-Kurse gerecht zu werden.
  8. Pipettieren Sie 1 ml sterilen M9-Puffer auf einen CP und schwenken Sie die Platte vorsichtig, um die Würmer zu lösen und eine Suspension zu bilden.
  9. Kippen Sie die Platte, sammeln Sie die M9-Wurmsuspension mit einer 1-ml-Kunststoffpipettenspitze und geben Sie sie in ein 1,5-ml-Mikrozentrifugenröhrchen.
  10. Lassen Sie die Würmer ca. 60 s lang am Boden des Mikrozentrifugenröhrchens absetzen.
  11. Entfernen Sie den Überstand/überschüssigen M9-Puffer mit einer 1-ml-Pipette, ohne das Wurmpellet zu stören.
  12. Waschen Sie die Würmer zwei weitere Male mit 1 mL sterilem M9-Puffer. Lassen Sie das Pellet zwischen den Wäschen ca. 60 s einwirken.
  13. Füllen Sie das Mikrozentrifugenröhrchen mit M9-Puffer bis zur 1-ml-Markierung und lassen Sie das Wurmpellet ca. 60 s lang absetzen.
  14. Entfernen Sie 960 μl des Überstands mit einer 1-ml-Pipette und achten Sie darauf, das Pellet nicht zu beschädigen.
  15. Schwenken oder schütteln Sie das Mikrozentrifugenröhrchen vorsichtig, um die Würmer wieder zu suspendieren, und übertragen Sie dann mit einer 20-μl-Pipette 20 μl des Wurmpellets (mit ca. 100-150 Tieren) in die Mitte eines AP, wo sich alle Segmente der Y-Wand treffen. Wiederholen Sie diesen Schritt für die anderen Access Points.
  16. Lassen Sie die Würmer 30 Minuten lang bei 20 °C umherstreifen und zählen Sie dann die Anzahl der Würmer, die in jedem der Abschnitte des Access Points (0 mM NaCl, 50 mM NaCl bzw. 100 mM NaCl) unter einem Stereomikroskop vorhanden sind. Es sind Würmer auszuschließen, die innerhalb von 5 mm von der Mitte der Platte in einem beliebigen Abschnitt oder an der Grenze zwischen den Abschnitten vorhanden sind (Abbildung 1).
  17. Lassen Sie die Würmer weitere 30 Minuten bei 20 °C umherstreifen und zählen Sie dann erneut die Anzahl der Würmer in jedem Abschnitt des Access Points. Schließen Sie alle Würmer aus, die innerhalb von 5 mm von der Mitte der Platte in einem beliebigen Abschnitt vorhanden sind.
  18. Berechnen Sie den Chemotaxis-Index (CI) pro Platte und Zeitpunkt mit der Formel 15,16:
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Ergebnisse

Die Konditionierung für 4 h auf Platten mit unterschiedlichen Mengen an NaCl (0 mM, 50 mM, 100 mM), mit oder ohne Nahrung, beeinflusste das Verhalten von Wildtyp-(N2) C. elegans signifikant. Nach 30 Minuten auf der Testplatte wiesen Würmer, die auf Platten mit hohen NaCl-Konzentrationen und Lebensmitteln (CP100+) konditioniert wurden, und Würmer, die auf Platten ohne NaCl und ohne Futter (CP0-) konditioniert wurden, ein positives KI auf, was auf eine Präferenz für höhere NaCl-Ko...

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Diskussion

In diesem Artikel beschreiben wir die Evaluation des assoziativen Lernens beim Fadenwurm C. elegans unter Verwendung der Chemotaxis als experimentelles Paradigma. In unserem Beispiel haben wir sechs experimentelle Bedingungen verwendet. Konkret wurden N2-Wildtyp-C. elegans auf Platten mit niedrigen (0 mM), mittleren (50 mM) oder hohen (100 mM) NaCl-Konzentrationen konditioniert, die entweder mit dem Standard-Nematodenfutter (E. coli OP50-Bakterienstamm) besiede...

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Offenlegungen

Die Autoren erklären, dass sie keinen Interessenkonflikt haben.

Danksagungen

Wir widmen diesen Aufsatz dem Andenken an Johannes Berthold. Einige Stämme wurden vom Caenorhabditis Genetics Center (CGC) zur Verfügung gestellt, das vom NIH Office of Research Infrastructure Programs (P40 OD010440) finanziert wird. Die E.I.B. bedankt sich für die finanzielle Unterstützung durch die Studienstiftung des deutschen Volkes.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
AgarChemsolute9972-2KG
Bacto-peptoneGibco211677
CaCl2 1M Lösung Merck2389
Caenorhabditis elegans StämmeCaenorhabditis Genetics Center (CGC)
Cholesterin Roth8866.1
E. coli OP50 FlüssigkulturN/AN/A
EthanolChemsolute22731000
KH2PO4 Roth P018.2
KPO4 (KH2PO4, K2HPO4) 1 M Lösung Chemsolute16341000
MgSO4 1 M Lösung RothT888.2
Mikrozentrifugenröhrchen 1,5 mLEppendorfN/A
Na2HPO4 RothT877.1
NaClChemsolute13671000
Y-Petrischalen 90 x 10 mmMoonlab4-0033

Referenzen

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Chemotaxis AssayVerhaltensplastizit tNatriumchlorid Konditionierungneurale Plastizit taltersbedingter kognitiver VerfallChemotaxis Indexmikrofluidische BildgebungWurmsynchronisation
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