Ein Abonnement von JoVE ist erforderlich, um diesen Inhalt anzuzeigen. Melden Sie sich an oder beginnen Sie noch heute mit einer kostenlosen Testphase.

Methodenartikel

Der TD Drive: ein parametrisches Open-Source-Implantat für mehrflächige elektrophysiologische Aufzeichnungen bei sich verhaltenden und schlafenden Ratten

2.5K Aufrufe

⸱

DOI:

10.3791/66457

⸱

26. April 2024

 ,  ,  ,  , 

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Hier präsentieren wir ein einzigartiges, 3D-druckbares Implantat für Ratten namens TD Drive, das in der Lage ist, symmetrische, bilaterale Drahtelektrodenaufzeichnungen durchzuführen, derzeit in bis zu zehn verteilten Hirnbereichen gleichzeitig.

Zusammenfassung

Komplizierte Wechselwirkungen zwischen mehreren Gehirnbereichen liegen den meisten Funktionen zugrunde, die dem Gehirn zugeschrieben werden. Der Prozess des Lernens sowie die Bildung und Konsolidierung von Erinnerungen sind zwei Beispiele, die stark von der funktionellen Konnektivität des Gehirns abhängen. Darüber hinaus geht die Untersuchung von hemisphärischen Ähnlichkeiten und/oder Unterschieden Hand in Hand mit diesen Multi-Area-Interaktionen. Elektrophysiologische Studien, die versuchen, diese komplexen Prozesse weiter aufzuklären, beruhen daher auf der Aufzeichnung der Gehirnaktivität an mehreren Stellen gleichzeitig und oft bilateral. Hier wird ein 3D-druckbares Implantat für Ratten namens TD Drive vorgestellt, das in der Lage ist, symmetrische, bilaterale Drahtelektrodenaufzeichnungen durchzuführen, derzeit in bis zu zehn verteilten Hirnarealen gleichzeitig. Das Open-Source-Design wurde unter Verwendung parametrischer Designprinzipien entwickelt, die es potenziellen Anwendern ermöglichen, das Antriebsdesign einfach an ihre Bedürfnisse anzupassen, indem sie einfach High-Level-Parameter anpassen, wie z. B. die anterior-posterioren und mediolateralen Koordinaten der Positionen der Aufzeichnungselektroden. Das Implantatdesign wurde an n = 20 Lister-Kapuzenratten validiert, die unterschiedliche Aufgaben ausführten. Das Implantat war sowohl mit Tethered Sleep Recordings und Open Field Recordings (Object Exploration) als auch mit drahtlosen Aufnahmen in einem großen Labyrinth unter Verwendung von zwei verschiedenen kommerziellen Aufzeichnungssystemen und Headstages kompatibel. So wird hier das anpassungsfähige Design und die Montage eines neuen elektrophysiologischen Implantats vorgestellt, das eine schnelle Vorbereitung und Implantation ermöglicht.

Einleitung

Die Mehrbereichsnatur der Gehirninteraktionen während des Wach- und Schlafzustands macht es schwierig, die ablaufenden physiologischen Prozesse erschöpfend zu untersuchen. Während Ansätze wie die funktionelle MRT (fMRT) und der funktionelle Ultraschall (fUS) die Probenahme der Gehirnaktivität aus dem gesamten Gehirn ermöglichen 1,2, nutzen sie die neurovaskuläre Kopplung, um die Gehirnaktivität aus der hämodynamischen Aktivität abzuleiten, was ihre zeitliche Auflösung einschränkt2. Darüber hinaus erfordert die fMRT, dass das Forschungsobjekt in einem MRT-Scanner platziert wird, was Vers....

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Protokoll

Die vorliegende Studie wurde von der niederländischen Zentralkommission Dierproeven (CCD) genehmigt und gemäß dem Tierversuchsgesetz (Protokollcodes: 2020-0020-006 und 2020-0020-010) durchgeführt. Es wurden männliche Lister-Ratten mit Kapuze verwendet, die 9-12 Wochen alt waren. Die Reagenzien und die Ausrüstung, die im Protokoll verwendet werden, sind in der Materialtabelle aufgeführt. In der ergänzenden Abbildung 1 und der ergänzenden Abbildung 2 finden Sie die Schritte des Antriebsaufbaus.

1. Anpassen und Erstellen von 3D-Modellen und Daten der Elektrodenschnittstellenplatine (EIB)....

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Ergebnisse

Mit den Anweisungen im Protokoll konnte der TD Drive von mehreren Experimentatoren leicht gebaut werden. Nach der Antriebsentwicklung (n = 4) wurde ein vollwertiger Pilot mit acht Tieren gefahren. Eine weitere Charge von acht Tieren wurde implantiert und eine experimentelle Datenerhebung durchgeführt. Da die Datenanalyse dieser Tiere noch nicht abgeschlossen ist, wurden sie in die Überlebensanalyse einbezogen, nicht jedoch in andere Analysen (z. B. Targeting oder Histologie). Die Implantatoperation wurde 2 Wochen nach de.......

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Diskussion

In diesem Artikel wird ein anpassungsfähiges Implantat für bilaterale, symmetrische Mehrbereichs-Drahtelektrodenaufnahmen für sich frei bewegende Ratten vorgestellt.

Die Möglichkeit, das Implantat durch Ändern vordefinierter Parameter einfach anzupassen, war eine der Motivationen für die Entwicklung des TD Drive. Obwohl das Ziel darauf abzielt, die Flexibilität für sich ändernde Parameter zu maximieren, setzen inhärente Einschränkungen in den Beziehungen zwisc.......

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Offenlegungen

TS und PvH sind Mitarbeiter von 3Dneuro, Nijmegen, Niederlande. 3Dneuro hat den TD Drive mitentwickelt und produziert.

Danksagungen

Die Autoren danken Angela Gomez Fonseca für die Inspiration zur Entwicklung des Antriebs und allen Studenten, die Pilotversuche mit den Tieren durchgeführt haben, Milan Bogers, Floor van Ravenswoud und Eva Severijnen. Diese Arbeit wurde vom Niederländischen Forschungsrat (NWO; Crossover-Programm 17619 "INTENSE").

....

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
0,5 mm Bohrer McMaster2951A38
1,27 mm Rastermaß SIP/DIP-Buchse (Mill-Max)Mouser Electronic575-003101Für die Montage und den Anschluss von EEG & GND-Schrauben
5 Minuten Epoxidharz BisonHandelsüblicherhandelsüblicher Epoxid-Cyanacrylat-Kleber
LoctiteSuper Glue-3 
EEG-DrahtScience Products GmbH7SS-2T
ElektrodendrahtScience Products GmbHNC7620F
EthanolLCFür das präoperative Standardsterilisationsverfahren des Antriebs
Feine Pinzette (5)FST91150-20Für die Vorbereitung und Handhabung von Drahtbündeln
Form 3BFormlabs3D-Drucker zum 3D-Druck der selbst gedruckten Teile des TD-Laufwerks
Goldstifte (klein)Neuralynx, Inc.9885Befestigung von Elektrokabeln an
ErdungskabelScience Products GmbHSS-3T/A
Steckverbinder mit hoher Dichte LabMaker GmbH/OmneticsA79026-001
Lister Hodded RattenCharles River LaboratoriesCrl:LISwir verwendeten männliche Ratten, 9-12 Wochen alt bei der Ankunft
M1 MessingeinsatzAliExpressKommerziell erhältlichhttps://aliexpress.com/item/33047616164.html
M1 HahnMcMaster2504A33
M1x16 SchraubeBossard1096613
M1x3 Schrauben aus rostfreiem StahlSchrauben und mehr84213_14985
M2,5x5 Polyimid Schraubenund mehr7985PA25S_50
MineralölMcMaster1244K14
NagellackEtosKommerziell erhältlichZur Farbcodierung EEG und GND Drähte
MalerbandGammaKommerziell verfügbarFür die Vorbereitung von Drahtbündeln
Pin SchraubstockMcMaster8455A16
PlotpapierCansonKommerziell erhältlichFür die Vorbereitung von Drahtbündeln
PolyimidrohreAmazon / KleinteileTWPT-0159-30-50AWG, 0,0159" ID, 0,0219" OD, 0,0030" Wand, 30" Länge
RHD 32-Kanal Kopftisch mit BeschleunigungsmesserIntan Technologies, LLCC3324Für angebundene Aufnahmen in der sleepbox
RHD 3 Fuß (0,9 m) Standard-SPI-KabelIntan Technologies, LLCC3203Vom Kommutator zum Kopftisch
RHD 6 Fuß (1,8 m) Standard-SPI-KabelIntan Technologies, LLCC3206Von der OpenEphys-Box zum Kommutator
Schleifring mit FlanschAdafruit1196Kommutator: 22 mm Durchmesser, 12 Drähte
LötflussmittelGriffon S-39 50 mlKommerziell erhältlichZum Löten von EEG & GND Schrauben
LötpasteAmazonB08CBZ5HC5
Edelstahl M2 Mutter McMaster93935A305
Tethered Aufnahme-Setup OpenEphysAcquasition Board
Drahtloser AufzeichnungsloggerSpikeGadgetsminiLogger 32Für drahtlose Aufzeichnungen in der Aufgabe
Drahtlose AufzeichnungseinrichtungSpikeGadgetsMain Control Unit (MCU) inkl. Breakout-Board und HF-TransceiverFür drahtlose Aufzeichnungen in der Aufgabe
EIB-Vorstand

Referenzen

  1. Deffieux, T., Demené, C., Tanter, M. Functional Ultrasound Imaging: A New Imaging Modality for Neuroscience. Neuroscience. 474, 110-121 (2021).
  2. Finn, E. S., Poldrack, R. A., Shine, J. M. Functional neuroimaging as a catalyst for integrated neuroscience. Nature. 623....

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Nachdrucke und Genehmigungen

Weitere Artikel entdecken

Aufzeichnungen aus mehreren Arealenbilaterale Elektrodenaufzeichnung3D-druckbares ImplantatGedächtnisverarbeitungInteraktion zwischen Hirnregionenfrei bewegliche RattenSchlafaufzeichnungen