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Methodenartikel

Kardiale Belastung mit passiver linksatrialer Druckbeaufschlagung und passiver Nachlast für die Transplantatbeurteilung

1.7K Aufrufe

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DOI:

10.3791/66624

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2. August 2024

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* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Das Protokoll beschreibt ein porzines ex vivo Herzperfusionssystem, bei dem die direkte Belastung des linken Ventrikels als Beurteilungstechnik für die Gesundheit des Transplantats dienen kann und gleichzeitig eine ganzheitliche Bewertung der Transplantatfunktion ermöglicht. Es wird auch eine Diskussion des Systemdesigns und möglicher Bewertungsmetriken gegeben.

Zusammenfassung

Die ex vivo maschinelle Perfusion oder normotherme maschinelle Perfusion ist eine Konservierungsmethode, die im Bereich der Transplantation große Bedeutung erlangt hat. Trotz der immensen Möglichkeiten zur Beurteilung aufgrund des schlagenden Zustands des Herzens hängt die derzeitige klinische Praxis von begrenzten metabolischen Trends für die Transplantatbewertung ab. Hämodynamische Messungen, die an der linksventrikulären Belastung gewonnen werden, haben aufgrund ihres Potenzials als objektive Bewertungsparameter in der Branche große Aufmerksamkeit erregt. In der Tat bietet dieses Protokoll eine einfache und effektive Möglichkeit, Belastungsfähigkeiten in etablierte Langendorff-Perfusionssysteme durch einfaches Hinzufügen eines zusätzlichen Reservoirs zu integrieren. Darüber hinaus wird die Machbarkeit des Einsatzes einer passiven linksatrialen Druckbeaufschlagung zur Belastung demonstriert, ein Ansatz, der unseres Wissens bisher noch nicht demonstriert wurde. Ergänzt wird dieser Ansatz durch eine passive Windkessel-Base-Afterload, die als Compliance-Kammer fungiert, um die Myokardperfusion während der Diastole zu maximieren. Schließlich wird die Fähigkeit hervorgehoben, funktionelle Metriken während der kardialen Belastung, einschließlich des linksventrikulären Pulsdrucks, der Kontraktilität und der Entspannung, zu erfassen, um Defizite in der kardialen Transplantatfunktion nach längeren Konservierungszeiten (˃6 h) aufzudecken.

Einleitung

Die orthotope Herztransplantation ist der derzeitige Goldstandard in der Behandlung von Herzinsuffizienz im Endstadium1. Leider ist das Feld durch einen schweren Spendermangel erheblich eingeschränkt, was dazu führt, dass jedes Jahr nur 2.000 Herztransplantationen durchgeführt werden, obwohl über 20.000 Menschen von dem lebensrettenden Verfahren profitieren würden2. Es wird erwartet, dass sich dieser Organmangel noch verschlimmern wird, da die Prävalenz von Herzinsuffizienz allein in den Vereinigten Staaten bis 2030 voraussichtlich 8 Millionen Menschen übersteigenwird 3....

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Protokoll

Diese Studie wurde in Übereinstimmung mit dem Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC), dem Massachusetts General Hospital und den Tierrichtlinien von Jove durchgeführt. Die Herzen (170 - 250 g) wurden von Yorkshire-Schweinen (30 - 35 kg, Alter 3-4 Monate, gemischtes Geschlecht) unter Verwendung eines Spendemodells nach Hirntod entnommen und vor der Verladung 6 h lang retrograd perfundiert (Langendorff). Alle Transplantate wurden während der Instrumentierung einer kalten Ischämiezeit von ca. 1 h ausgesetzt.

1. Systemdesign

  1. Vergewissern Sie sich, dass das System aus ei....

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Ergebnisse

Die Herzen von 4 Yorkshire-Schweinen (30 - 35 kg) wurden geerntet und über Langendorff NMP 6 h lang konserviert, bevor sie 4 h ununterbrochen verladen wurden. Diese experimentelle Bedingung wurde gewählt, da 6 h die durchschnittliche klinische Konservierungsdauer ist (5,1 ± 0,7 h)34. Durch die Hinzufügung von 4 zusätzlichen Stunden kontinuierlicher Belastung (insgesamt 10 Stunden ex vivo-Zeit ) wurde ein gewisses Maß an Herzinsuffizienz erwartet, da zuvor über eine klare Korrelation zwisc.......

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Diskussion

Die normothermische maschinelle Perfusion ist eine leistungsstarke Modalität zur Organkonservierung und -bewertung, die durch die Erweiterung des Spenderpools von Erwachsenenherzen einen großen Einfluss auf den Bereich der Herztransplantation hatte36. Diese Erweiterung ist das Ergebnis der Möglichkeit, derzeit einen kleinen Pool von Herzen zu nutzen, die bisher als ungeeignet für eine Transplantation galten. Die normothermische maschinelle Perfusion bewahrt Herztr.......

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Offenlegungen

DV ist Mitarbeiter und Gründer von VentriFlo, Inc., Pelham, NH, und hat Patentanmeldungen, die für diese Studie relevant sind. Weitere Informationen finden Sie unter https://ventriflo.com/patents/. SNT verfügt über Patentanmeldungen, die für diese Studie relevant sind, und ist Mitglied des wissenschaftlichen Beirats von Sylvatica Biotech Inc., einem Unternehmen, das sich auf die Entwicklung von Technologien zur Organkonservierung konzentriert. Alle konkurrierenden Interessen werden von der MGH und Partners HealthCare in Übereinstimmung mit ihren Richtlinien für Interessenkonflikte verwaltet. AR und AAO erhalten Forschungsförderung von Paragonix Technologies Inc.

Danksagungen

Wir danken für die Finanzierung von SNT durch das US National Institute of Health (K99/R00 HL1431149; R01HL157803; R01DK134590; R24OD034189), der National Science Foundation unter der Grant No. EEC 1941543, den Claflin Distinguished Scholar Award im Namen des MGH Executive Committee on Research und den Polsky Family Award for Leaders in Surgery. Wir danken der AAO für die Forschungsförderung durch die Hassenfeld Family Foundation, das MGH Executive Committee on Research und das MGH Center for Diversity and Inclusion. Wir danken der Sarnoff Cardiovascular Research Foundation für die Forschungsförderung von GO.

....

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
4-Wege-AbsperrhahnSmiths Medical 
4-0 Prolene Nähte Ethicon 8711
5-0 NahtmaterialFine Scientific Tools18020-50
Aortenkonnektor VentriFLO Inc Maßgeschneiderte
AortenwurzelkanüleMedtronic Inc 10012
RinderserumalbuminSigmaA7906
CalciumchloridSigmaC7902
ZellschonerMedtronic Inc ATLG
Cell Saver Kassetten Medtronic Inc ATLS00
DextranSigma31389
EKG-Epikardableitungen VentriFLO Inc 
Maßgeschneiderte Ausrüstungsständer und Halterungen VentriFLO Inc Maßgeschneiderter
externer HerzschrittmacherMedtronic Inc 5392
Falcon Konische Röhrchen mit hoher Klarheit 50 mlFisher Scientific14-432-22
Durchflusssonden TranSonic Sytems inc 1828
Heparin-Natrium-InjektionMedplusG-0409-2720-0409-2721
Hohlfaser-Oxygenator und Venenstoff  ReseviorMedtronic Inc BBP241Affinity Pixie, 1L
HTP 1500  WärmetherapiepumpeHTP6826619
InsulinHumulin RMGH Apotheke
Iworx DatenerfassungssystemIworxIX-RA-834
Krebs-Henseleit PufferSigmaK3753
LeukozytenfilterHaemoneticsSB1E
OrgankammerVentriFLO Inc Maßgeschneiderte
Stimulationsdrähte BiopolarMedtronic Inc 6495
Penicillin-StreptomycinThermoFisher Scientific15140122
Druckwandler IworxBP100
PulspumpeVentriFLO Inc 2100-0270
PVC-Schläuche Medtronic Inc 
Rechtwinklige Kanüle mit Metallspitze 20FMedtronic Inc 67318
NatriumbicarobonatSigma5761
Standard PHD ULTRA CP SpritzenpumpeHarvard Aparatus88-3015
Tourniquet Kit 7in Medtronic Inc 79006
Transsonic Flow-BoxTranSonic Sytems Inc T402
Venöse Resevior Medtronic Inc CB841Affinity Fusion, 4L
WIndKessel TascheVentriFLO Inc Maßgeschneidertes
Y-NetzteilMedtronic Inc Nr. 10005
MX9341LHY10Z49R9

Referenzen

  1. Khush, K. K., et al. The international thoracic organ transplant registry of the international society for heart and lung transplantation: Thirty-fifth adult heart transplantation report-2018; Focus Theme: Multiorgan Transplantation. J Heart Lung Transplant. 37 (10), 1155-1168 (2018).
  2. Colvin, M., ....

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Nachdrucke und Genehmigungen

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