Zuerst haben wir die durchschnittlichen ereigniskorrelierten Potentiale (ERPs) für jeden auditiven Stimulus bei den Weißbüschelaffen aufgetragen (Abbildung 2). Das auditiv evozierte Potential (AEP) war in der Geräuschbedingung ausgeprägt, was den deutlichen Beginn der Reize widerspiegelt (siehe Abbildung 1D). Um die gemittelten ERPs zwischen Ruftypen und Lärmreizen zu vergleichen, haben wir eine unidirektionale Varianzanalyse (ANOVA) mit Stimuli als Faktor zwischen den Probanden in der Cz-Reaktion angewendet. Wir fanden einen signifikanten Haupteffekt von Stimuli auf die Cz-Aktivität bei 13-18 ms, 28-36 ms bzw. 45-88 ms nach Stimulusbeginn (p < 0,05). Post-hoc-Mehrfachvergleichsanalysen mit Tukeys Methode zeigten, dass der Unterschied zwischen Lärm und anderen Rufen bestand (p < 0,05), aber es gab keinen Unterschied zwischen den Ruftypen der Weißbüschelaffen. Das Ergebnis deutet darauf hin, dass Unterschiede in der Gehirnaktivität je nach Ruftyp nicht allein anhand der ereigniskorrelierten Potentiale beobachtet werden konnten.
Als nächstes führten wir für jedes Subjekt eine Zeit-Häufigkeits-Analyse durch. Abbildung 3 zeigt ein Beispiel für die Zeit-Häufigkeits-Karten für den Tsik-String-Ruf , die von Subjekt R (älter, Abbildung 3A) und Subjekt Y (jünger, Abbildung 3B) aufgenommen wurden. Wir fanden heraus, dass die ereigniskorrelierte spektrale Leistung bei einer niedrigeren Frequenz von etwa 20-50 Hz unmittelbar nach Stimulusbeginn zunahm. Diese Reaktionen waren in der Cz. Im Gegensatz dazu nahm die Leistung des Gamma-Bereichs (über 30 Hz) nach Einsetzen des Stimulus im Vergleich zur Ausgangsperiode ab. Zudem hielt dieser Rückgang 1 s an. Bei älteren Personen über 8 Jahre wurde keine Abnahme der ereigniskorrelierten Leistungsfähigkeit beobachtet. In diesen Beispielen zeigten die älteren Personen eine stärkere anfängliche Reaktion auf den Ruf in der Vertex-Region (Cz), während die jüngeren Personen eine anhaltende Abnahme der γ-Band-Aktivität während der Rufpräsentation zeigten. Die Ergebnisse deuten darauf hin, dass es je nach Alter des Probanden Unterschiede in den anfänglichen und anhaltenden Reaktionen gibt.
Schließlich untersuchten wir die Beziehung zwischen dem Alter der Probanden und der ereigniskorrelierten spektralen Störungsleistung (ERSP) in der anfänglichen Einschwingreaktion (Abbildung 4A) und der anhaltenden Reaktion (Abbildung 4B). Eine bidirektionale ANOVA mit dem Stimulustyp als Faktor innerhalb des Subjekts und dem Alter als Faktor zwischen den Subjekten wurde durchgeführt, um den Beitrag der Art des auditiven Stimulus und des Alters des Probanden zur EEG-Aktivität zu bestimmen. Die anfänglichen, transienten Reaktionen in der Fz zeigten signifikante Haupteffekte des Stimulustyps (F (3,24) = 9,020, p < 0,001) und des Alters (F (8,24) = 3,934, p = 0,004). Es gab jedoch keine signifikante Wechselwirkung zwischen dem Stimulustyp und dem Alter (p = 0,144). In den transienten Reaktionen in Cz gab es einen signifikanten Haupteffekt des Stimulustyps (F (3,24) = 8,533, p < 0,001), aber keinen Effekt des Alters (F (8,24) = 2,215, p = 0,073) und keine Wechselwirkung (p = 0,228). Für anhaltende Reaktionen gab es signifikante Haupteffekte sowohl des Stimulustyps als auch des Alters (F (3,24) = 9,020, p < 0,001; F (8,24) = 3,934, p = 0,004) auf Fz. Es wurde keine signifikante Wechselwirkung beobachtet (P = 0,144). Die anhaltenden Reaktionen in Cz zeigten einen signifikanten Haupteffekt des Stimulustyps (F (3,24) = 8,533, p < 0,001), aber keinen Haupteffekt des Alters (F(8,24) = 2,215, p = 0,073) oder der Interaktion (p = 0,228). Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass im mittleren frontalen Bereich (Fz) die anfänglichen transienten Reaktionen auf Ruf- und Lärmreize mit zunehmendem Alter stark variierten, während die anhaltenden Reaktionen in jüngeren Altersgruppen unterdrückt wurden. Diese können die funktionelle Reifung der Stirnregion widerspiegeln.
Frühere neurophysiologische Studien haben über neuronale Reaktionen im primären auditorischen Kortex während der Vokalisation bei Weißbüschelaffen berichtet 9,38. Darüber hinaus zeigen mehr als die Hälfte dieser Neuronen eine inhibitorische Reaktion, die während der Vokalisation anhält 9,38. Darüber hinaus haben frühere elektrophysiologische Studien an nichtmenschlichen Primaten und Menschen gezeigt, dass eine hohe Gammabandenaktivität im lokalen Feldpotential (LFP) und ECoG gut mit den Feuerraten in Neuronen korreliert 39,40,41,42. Das Kopfhaut-EEG ist eine räumlich-zeitlich geglättete Version des LFP, die über eine Fläche von 1 cm2 oder mehr integriertist 43. Obwohl die High-Gamma-Komponente des EEG eine geringere Korrelation mit den Feuerraten aufweist als LFP und ECoG, geht man davon aus, dass sie das Ausgangssignal als integrierten Bereich von mehreren Zentimetern kodiert. Daher könnte die anhaltende Abnahme der Gammabandenleistung, die in unseren Experimenten bei Cz beobachtet wurde, die Aktivität neuronaler Cluster widerspiegeln, die während der Rufemission eine unterdrückte Aktivität zeigen, die in den auditorischen Kortexen zu finden ist. Im Gegensatz dazu haben frühere elektrophysiologische Studien berichtet, dass mehr Neuronen im frontalen Kortex, hauptsächlich im prämotorischen Kortex, während der Ruflautäußerung erregende Reaktionen zeigen13. Interessanterweise wurde in unseren Experimenten auch dann eine anhaltende inhibitorische Aktivität beobachtet, wenn das Fz im frontalen Bereich platziert wurde, obwohl unterschiedliche neuronale Mechanismen zwischen der stimmlichen Wahrnehmung und der Produktion beobachtet wurden. Eine kürzlich durchgeführte fMRT-Studie hat außerdem mehrere Subregionen im frontalen Kortex, einschließlich des anterioren cingulären Kortex sowie des prämotorischen Kortex, als "stimmliche Flecken" identifiziert, die auf artspezifische Rufe bei Weißbüschelaffen reagieren19. Unsere Ergebnisse spiegeln die gesamte Gehirnaktivität in diesen Regionen wider.
Im aktuellen Experiment haben wir nur Mittellinienpositionen für die Explorationselektroden (Fz, Cz, Pz und Oz) verwendet; daher können wir keine Unterschiede zwischen der rechten und linken EEG-Aktivität der auditiven Verarbeitung erwähnen. In Zukunft müssen wir die Lateralität der neuronalen Aktivität untersuchen, die der Stimmverarbeitung zugrunde liegt.
Frühere Studien haben berichtet, dass eine geringe Gamma-Aktivität im LFP und ECoG durch synaptische Inputs in Pyramidenzellen erzeugt wird. Somit reflektiert eine hohe Gammaaktivität eine Signalkomponente, die näher am Ausgang liegt, während eine niedrige Gammaaktivität diejenigen reflektiert, die näher am Eingang39 liegen. In der vorliegenden Studie beobachteten wir eine vorübergehende Aktivität in den Beta- und niedrigen Gamma-Banden unmittelbar nach der Exposition gegenüber einem Ruf. Diese Reaktionen können sensorische Eingangssignale an den Kortex reflektieren. Der Vorteil unserer Methode besteht darin, dass sie die Gehirnaktivität verschiedener neuronaler Populationen als dynamische Veränderungen mit hoher zeitlicher Auflösung erfassen kann. Unseres Wissens ist dies die erste Studie, die zeigt, wie sich die EEG-Signale der Kopfhaut während der artspezifischen Stimmwahrnehmung bei Weißbüschelaffen verändern. Die vorliegenden Ergebnisse liefern neue Einblicke in die Integration neuronaler Repräsentationen durch Aufzeichnungen einer Vielzahl von Hirnregionen.

Abbildung 1: Versuchsaufbau. (A) Ein Beispielbild eines Probanden während der Aufnahme. Der Weißbüschelaffe sitzt auf einem Stuhl und der Kopf wird durch eine Maske am Stuhl fixiert. Der Mund wird offen gehalten, um das Atmen und Trinken von Belohnungsflüssigkeiten zu erleichtern, und die Elektroden wurden an der Oberseite des Kopfes befestigt. (B) Ausstattung: Schallreize werden über einen Lautsprecher dargestellt. Außerdem wurden ein Verstärker, eine Elektrodeneingangsbox und eine Überwachungskamera installiert. (C) Position der Elektroden: Die Elektroden wurden gemäß dem Internationalen 10-20-System auf Fz, Cz, Pz, Oz, A1 und A2 platziert. Wir definierten die Position der Elektroden anhand der Inion-, Nasion- und bilateralen präaurikulären Punkte als anatomische Orientierungspunkte. Als Masseelektrode wurde die Elektrode C3 oder C4 verwendet. (D) Sonogramme (linkes Feld) und Spektrogramme (linkes Feld) für alle Audio-Stimuli. Der Phee-Ruf ist ein einzelner langer Ruf, der weniger als 2 s dauert. Der Tsik-Ek-Ruf ist eine Kombination aus einem Tsik gefolgt von einem Ek. Zwei Sätze des zusammengesetzten Rufs zeigten ungefähr 1 s. Der Tsik-String-Ruf ist ein sich wiederholender Ruf von Tsik5, und vier Tsik wurden ungefähr für 1 s im Stimulus präsentiert. Als Nicht-Ruf-Stimulus verwendeten wir ein weißes Rauschsignal, das von einem benutzerdefinierten Skript erzeugt wurde und etwa 1 s dauerte. Die Latenzen des Tonbeginns wurden mit einem digitalen Audio-Editor visuell überprüft. Die roten Pfeile zeigen jede Latenz an, der Phee-Aufruf 49 ms, der Tsik-Ek-Aufruf 35 ms, der Tsik-String-Aufruf 16 ms und das weiße Rauschen 0 ms. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 2: Grand-Averaged-Event-bezogene Potenziale für die Phee-, Tsik-Ek- und Tsik-String-Rufe und das Rauschen . (n = 9) Die Aktivität wurde auf den Beginn jedes Rufs oder des weißen Rauschens ausgerichtet. Der schwarze horizontale Pfeil zeigt die Periode für die Stimuluspräsentation an. Der Phee-Ruf dauerte etwa 2 s, der Rest dauerte 1 s. Die roten horizontalen Linien bei Cz zeigen die Perioden mit signifikanten Unterschieden zwischen den auditiven Reizen. Alle diese Rufe betrafen den Noise und die anderen Anrufe, und es gab keine Unterschiede zwischen den Anrufen. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 3: Beispiel für Zeit-Häufigkeits-Karten für Rufe. (A) Die ERSP-Karte für den Tsik-String-Ruf bei Subjekt R (145 Monate alt); (B) Die EPSP-Karte für denselben Tsik-String-Aufruf bei Subjekt Y (23 Monate alt). Das linke und rechte Feld zeigen die von den Fz- bzw. Cz-Elektroden aufgezeichneten Daten. Die roten vertikalen Linien zeigen den Zeitpunkt des Beginns der Hördatei an, nicht den Beginn des Anrufs. Abkürzung: EPSP = ereigniskorrelierte spektrale Störung. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 4: Beziehung zwischen der mittleren ereigniskorrelierten Leistung und dem Alter der Probanden. (A) Beziehung zwischen der mittleren ereigniskorrelierten Leistung im α- und β-Band und dem Alter der Probanden. Die mittlere ERSP-Leistung wurde bei 8-29 Hz über einen Zeitraum von 1-150 ms nach jedem Stimulusbeginn im Vergleich zu denen in der Baseline-Periode (-200 bis 0 ms vor Stimulusbeginn) berechnet. Das linke und rechte Feld zeigen die von den Fz- bzw. Cz-Elektroden aufgezeichneten Daten. (B) Beziehung zwischen der mittleren ereignisbezogenen Leistung im γ-Band und dem Alter der Probanden. Die mittlere ERSP-Leistung wurde bei 30-100 Hz aus einem Zeitraum von 151-950 ms nach jedem Stimulusbeginn im Vergleich zu denen in der Baseline-Periode (-200 bis 0 ms vor Stimulusbeginn) berechnet. Negative ERSP-Werte deuten also auf eine Abnahme der Leistung im Vergleich zu der vor der Stimuluspräsentation hin. Abkürzung: ERSP = ereigniskorrelierte spektrale Störung. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
Ergänzende Datei 1: Eine ZIP-Datei mit vier Audiodateien, die in den Experimenten verwendet wurden. Die PH.wav Datei enthält einen Stimulus mit einem langen Phee-Ruf ; TE.wav enthält zwei Tsik-Ek-Aufrufe mit einem Intervall zwischen ihnen; MB.wav enthält einen Tsik-String-Call-Stimulus mit vier aufeinanderfolgenden Tsik (auch Mobbing-Call genannt); NO.wav enthält ein programmgeneriertes weißes Gaußsches Rauschen. Bitte klicken Sie hier, um diese Datei herunterzuladen.
Ergänzende Datei 2: Eine ZIP-Datei mit Nachbearbeitungscode. Bitte klicken Sie hier, um diese Datei herunterzuladen.