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Hier beschreiben wir ein standardisiertes Protokoll, das entwickelt wurde, um die zellulären und molekularen Mechanismen aufzuklären, die dem Knochenumbau während der OTM zugrunde liegen. Ein gründliches Verständnis dieser Mechanismen bei Mäusen erfordert ein akribisch geplantes Protokoll, um Genauigkeit und Zuverlässigkeit zu gewährleisten 7,11. Studien, die von unserer Forschungsgruppe durchgeführt wurden, haben gezeigt, dass dieses Protokoll die Variabilität des Bedieners effektiv reduziert, indem es ein Zugkraftmessgerät und eine speziell entwickelte Vorrichtung enthält, wodurch 0,35 N als optimale Kraft für OTM in einem Mausmodellfestgelegt werden 4,16,17,18,19,20 . Um die Wirksamkeit experimenteller Verfahren zu verbessern und die Verwendung von Tierproben zu maximieren, können Proben, die für die Mikro-CT-Analyse verwendet werden, auch für die Routine-Histologie verarbeitet werden. Anschließend kann OTM in 5-μm-Schnitten ausgewertet werden, wobei der CEJ als Referenzpunkt für die Messungenverwendet wird 16,19. Hämatoxylin- und Eosin-Färbung dienen neben speziellen Techniken wie der tartratresistenten sauren Phosphatase (TRAP) und dem Masson-Trichrom auch als wirksame Methoden zur Beurteilung der Wurzelintegrität und zur Quantifizierung von Osteozyten, Osteoklasten und Osteoblasten in den interessierenden Regionen 4,5,16.
Die dynamischen Veränderungen in der Mikrostruktur des Alveolarknochens während der OTM bei Nagetieren wurden mit Hilfe von Mikro-CT-Systemen untersucht. Diese Auswertungen zielen darauf ab, wertvolle Erkenntnisse für die klinische kieferorthopädische Behandlung zu liefern14,15. Die Mikro-CT ist eine Analysetechnik, die in der Lage ist, innere Strukturen mit hoher Auflösung und Präzision im Mikrometerbereich zu erfassen. Dieses Verfahren ermöglicht die Rekonstruktion kleinmaßstäblicher Proben in detaillierte 3D-Bilder, was eine genaue qualitative und quantitative Analyse von Proben ermöglicht22. In Übereinstimmung mit früheren Studien wurde die OTM durch Quantifizierung der linearen Diskrepanz zwischen dem CEJ des ersten und zweiten Molaren des rechten Hemi-Maxilla im Vergleich zum linken Hemi-Maxilla 17,18,19,20 bewertet. Im Rahmen der dentalen Bildgebung bietet die Mikro-CT mehrere Vorteile. Es kann kleine Defekte an Wurzeloberflächen identifizieren, lineare Zahnveränderungen präzise messen und die Morphologie des trabekulären und kortikalen Knochens beurteilen22,23. Es ist bemerkenswert, dass die aktuelle Leitlinie zur Beurteilung der Knochenmikrostruktur bei Nagetieren mittels Mikro-CT den minimalen Satz von Variablen betont, die für die Beschreibung der trabekulären und kortikalen Knochenmorphometrie empfohlenwerden 23. Darüber hinaus ist es wichtig, das Auftreten von OIIRR, einer schwerwiegenden Komplikation während der kieferorthopädischen Behandlung, zu analysieren16,21. Die Forscher sollten die Intensität der Wurzelresorption bewerten, da das Vorhandensein von OIIRR darauf hindeutet, dass die ausgeübte Kraft übermäßig sein kann, was Anpassungen erforderlich macht16,21.
Die Einhaltung kritischer Schritte in der OTM-Forschung in Tiermodellen ist unerlässlich, um zuverlässige Ergebnisse zu erhalten. Dazu gehört eine sorgfältige Auswahl der Tiere unter Berücksichtigung von Faktoren wie Stamm, Alter, Knochenstoffwechsel, Wachstumsrate und genetischem Hintergrund. Die Wahl der Tiermodelle hat einen erheblichen Einfluss auf die Studienergebnisse, da Variationen dieser Faktoren die Knochenphysiologie und die Reaktion auf kieferorthopädische Kräfte beeinflussen6. Der Zeitpunkt der Euthanasie von Tieren ist ebenfalls von entscheidender Bedeutung, da er bestimmte Stadien des Knochenumbaus als Reaktion auf kieferorthopädische Kräfte erfasst. Zum Beispiel führten Taddei et al.4 molekulare Analysen nach 0, 12 und 72 Stunden durch, mit histopathologischen Analysen nach 6 Tagen, was die Beurteilung zeitlicher Veränderungen der Knochenumbaumarker während der OTM ermöglichte. Darüber hinaus wurden altersbedingte Variationen der OTM untersucht, um zu verstehen, wie sich das Altern auf Knochenumbauprozesse auswirkt23.
Die Verwendung einer NiTi-Schraubenfeder ist zwar wirksam bei der Induktion von Zahnbewegungen, birgt jedoch gewisse Nachteile, die sich auf das Wohlergehen der Tiere und die Versuchsergebnisse auswirken können. Das Einsetzen einer NiTi-Schraubenfeder erweist sich im Vergleich zu alternativen Methoden, wie z. B. der Verwendung von Gummibändern7, als zeitaufwändiger und technisch anspruchsvoller. Diese erhöhte Komplexität kann zu einem höheren Verletzungsrisiko während des Einsetzens führen, was wiederum nachteilige Auswirkungen wie einen höheren Verlust an Körpergewicht nach dem Eingriff und eine erhöhte Sterblichkeitsrate bei den Tieren zur Folge habenkann 7. Unserer Erfahrung nach haben sich die tägliche Überwachung der Tiere und die Umsetzung unterstützender Maßnahmen, wie z. B. weiches Futter, als hilfreich erwiesen, um die mit dem Einsatz von NiTi-Schraubenfedern für OTM im Tiermodell verbundenen Nebenwirkungen zu minimieren. Diese Maßnahmen tragen nicht nur zum Wohlergehen der Tiere bei, sondern verbessern auch die Zuverlässigkeit und Validität der Versuchsergebnisse, indem sie Störfaktoren reduzieren und die Konsistenz der Forschungsprotokolle gewährleisten 4,16,17,18,19,20.
Der Einsatz von OTM bei Mäusen, kombiniert mit Mikro-CT-Analysen, bietet ein geeignetes Modell für die Untersuchung von Mechanismen der Knochenanpassung, der Wurzelresorption und der zellulären Reaktionen auf mechanische Kraftreize. Dieser integrierte Ansatz bietet wertvolle Einblicke in die komplizierten Prozesse, die der kieferorthopädischen Behandlung zugrunde liegen, und erleichtert die Entwicklung neuartiger therapeutischer Strategien und Interventionen.