Co-Kulturmodell mit zwei Arten von adhärenten Zelllinien

Zhuo Song; Lisha Zhao; Jingwen Hu; Xi Zheng; Yingyu Liu; Hao Wang; Xiaoyan Chen

doi:10.3791/67314

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Methodenartikel

Co-Kulturmodell mit zwei Arten von adhärenten Zelllinien

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DOI:

10.3791/67314

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8. November 2024

Zhuo Song^*¹ , Lisha Zhao^*¹ , Jingwen Hu^*¹ , Xi Zheng² , Yingyu Liu¹ , Hao Wang¹ , Xiaoyan Chen¹

¹Maternal-Fetal Medicine Institute, Department of Obstetrics and Gynecology, Shenzhen Baoan Women's and Children's Hospital, Shenzhen University, ²The First Clinical Medicine College, Southern Medical University

^* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Das Protokoll zeigt ein neuartiges experimentelles In-vitro-Modell , das die Biologie von zwei Arten von adhärenten Zelllinien mit einem dreidimensionalen (3D)-gedruckten Gerüst rekapitulieren kann. Der Aufbau dieses Modells und die Arbeitsabläufe, von der Zellpräparation über die Zellkultur bis hin zur Analyse und Auswertung, werden beschrieben.

Zusammenfassung

Die Einnistung des Embryos wird durch die Wechselwirkungen zwischen verschiedenen Zelltypen in der Mutter-Embryo-Schnittstelle beeinflusst. Die direkte und indirekte Kommunikation zwischen verschiedenen Zelltypen innerhalb der Dezidua ist entscheidend für die Regulierung der Empfänglichkeit des Endometriums; Die molekularen Mechanismen, die diese Wechselwirkung vermitteln, sind jedoch noch unklar. In diesem Zusammenhang wird ein Modell zur Untersuchung des Implantationsprozesses benötigt, um ein umfassendes In-vitro-Modell zu etablieren, das die Biologie der Interaktion zwischen Endometriumepithel und Stroma rekapitulieren kann. Dieses Modell besteht aus regulären Zellkulturplatten und einem passenden Gerüst, das durch dreidimensionalen (3D) Druck aus kostengünstigen Materialien erzeugt wird. Im Folgenden stellen wir eine Reihe von Protokollen für die Modellkonstruktion, die Zellvorbereitung, die Zellaussaat, die Zellkultur, die Beobachtung und die Bewertung vor. Darüber hinaus haben wir repräsentative Ergebnisse mit Zellen unter dem Mikroskop einbezogen, die gute Wachstumsbedingungen aufweisen. Ziel dieser Studie war es, In-vitro-Modelle zu entwickeln, die die Interaktion zwischen endometrialen Stromazellen und Epithelzellen sowie zwischen Trophoblastzellen und Endometriumzellen nachahmen.

Einleitung

Trotz umfangreicher Forschung über die Schwangerschaft beim Menschen sind die molekularen Mechanismen an der Schnittstelle zwischen Mutter und Fötus während der Implantation und der frühen Schwangerschaft nach wie vor wenig verstanden¹. Das menschliche Endometrium besteht hauptsächlich aus zwei Zelltypen: Endometriumepithelzellen (EECs) und Endometriumstromazellen (ESCs). Die Einnistung verläuft in drei Phasen: Apposition, Anheftung und Invasion, die zur Entwicklung eines kompetenten Embryos und eines rezeptiven Endometriums führen². In Anbetracht der ethischen Zwän....