Das vorliegende Protokoll beschreibt ein Verfahren zur Induktion der Ausbreitung von Jungtieren im dritten Stadium (Prädauer-Jungtiere, JIII.) von Bursaphelenchus xylophilus in die Kryptobiose durch osmotische Regulation von Kaliumchlorid (KCl)-Ionen. Diese Methode kann die Erforschung der Stressresistenzmechanismen von B. xylophilus technisch unterstützen.
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Methodenartikel
Induktion des Eintritts von Jungtieren aus Bursaphelenchus xylophilus im dritten Stadium der Ausbreitung in die Kryptobiose durch osmotische Regulation
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Kryptobiose ist ein Zustand, in dem Organismen fast ihr gesamtes inneres Wasser verlieren und unter extremem Umweltstress in die Anhydrobiose eintreten. Die ausbreitenden Jungtiere im dritten Stadium (Prä-Dauer-Jungtiere, 
) von Bursaphelenchus xylophilus können durch Dehydration in die Kryptobiose eintreten und sich bei Rehydrierung wieder beleben, wenn sich die Umweltbedingungen verbessern. Die osmotische Regulation ist entscheidend für ihr Überleben in diesem Prozess. In dieser Studie wurden Proben von B. xylophilus von toten Pinus massoniana aufgrund einer Kiefernwelkekrankheit in Ningbo, Provinz Zhejiang, China, gesammelt. Nach dem Eintauchen in 8%ige Kaliumchlorid (KCl)-Lösung ging B. xylophilus nach allmählicher Dehydrierung aufgrund des erhöhten externen osmotischen Drucks durch natürliche Wasserverdunstung in einen kryptobiotischen Zustand über. B. xylophilus konnte dem Stress bei niedrigen Temperaturen bei -20 °C standhalten. B. xylophilus konnte nach Rehydratation wiederbelebt werden, mit einer Überlebensrate von 92,1 %. Dieser Prozess kann den Eintritt von B. xylophilus in die Kryptobiose regulieren und es ihnen ermöglichen, extremen Umgebungen zu widerstehen. Diese in unserer Studie beschriebene Methode ist einfach und zuverlässig und bietet technische Unterstützung für die Untersuchung der Stressresistenzmechanismen von B. xylophilus.
Einleitung
Die Kiefernwelkekrankheit ist eine der schwersten Waldkrankheiten in China1. Der Kiefernfadenwurm Bursaphelenchus xylophilus (B. xylophilus) stellt eine erhebliche Bedrohung für Kiefernarten wie Pinus massoniana (P. massoniana) dar, indem er sich im Wirt fortpflanzt, was zu schnellem Welken und Absterben führt. Unter ungünstigen Umweltbedingungen nach dem Tod des Wirts können die fortpflanzungsfähigen Jungtiere von B. xylophilus in prä-dauer-Jungtiere eindringen (
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Protokoll
1. Sammlung von 
B. xylophilus
- Sammlung infizierter Festplatten von P. massoniana
HINWEIS: Alle Verfahren entsprachen den Verwaltungsmaßnahmen für das Epidemiegebiet der Kiefernwelkekrankheit und das infizierte Holz sowie anderen geltenden Vorschriften. Als Probenstandort wurde ein mit B. xylophilus infizierter P. massoniana-Wald im Kreis Xiangshan, Stadt Ningbo, Provinz Zhejiang, ausgewählt. P. massoniana, der an der Kiefernwelkekrankheit starb, wurde inne....
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Ergebnisse
In der 8%igen KCl-Lösung zeigte B. xylophilus beim Verdampfen des Wassers zunächst ein merkliches "Kräuseln", während es beweglich blieb (Abbildung 1A). Sobald das Wasser vollständig verdunstet war, hörten die Nematoden auf, sich zu bewegen und kräuselten sich, mit eingedrückten Oberflächen und angesammelten Lipidtröpfchen (Abbildung 1B), was auf ihren Eintritt in d.......
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Diskussion
In dieser Studie wurde B. xylophilus aus toten P. massoniana in Ningbo, Provinz Zhejiang, gesammelt. Es ist zu beachten, dass B. xylophilus aus einer gemischten Population mit unterschiedlichen Instadien ausgewählt wurde. Konkret wurden Rundstämme mit einer hohen Dichte an B. xylophilus ausgewählt, gefolgt von .......
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Offenlegungen
Die Autoren haben nichts offenzulegen.
Danksagungen
Diese Forschung wurde von der Central Public-interest Scientific Institution Basal Research Fund des State Key Laboratory of Tree Genetics and Breeding (Fördernummer CAFYBB2020ZY001-2), Enterprise Research Projects (202404016-4320) und der National Natural Science Foundation of China (NSFC 32271896) finanziert.
....Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Glas-Rutsche | Bioland | Nr. GS7101-7525 | 75 mm & mal; 25 mm & mal; 1 mm |
| Langhalsiger Glastrichter | Nanjing Kangluoda Experimentelle Technologie | N/A | ca. 150 mm |
| Mikroskop | Phenix | XSP-35-1600X | PH100-2B41L-IPL |
| Petrischale | Nanjing Kangluoda Experimentelle Technologie | TB-624935792745 | 50 mm & mal; 50 mm |
| Pinchcock | Nanjing Kangluoda Experimentelle Technologie | TB-624973311743 | 36 mm & mal; 11 mm &mal; 55 mm |
| Pipette | Eppendorf | 3123000012 | 10– 100 &Mikro; L |
| Kaliumchlorid (KCL) | Solarbio Lebenswissenschaften | Nr. P9921 | 500 g |
| Gummischlauch | Nanjing Kangluoda Experimentelle Technologie | TB-624923457094 | 7 mm & mal; 5 mm |
| Sterilisator | BinJiang | https://detail.1688.com/offer/644766597053.html?_t=1730892390541&spm= a2615.7691456.co_0_0_wangpu _score_0_0_0_0_1_0_0000_0.0 | 75L |
| Seidenpapier | Herz-zu-Herz-Abdruck | M3 | 22,5 cm &mal; ca. 21,5 cm |
Referenzen
- Li, Y., Zhang, X. Analysis on the trend of invasion and expansion of Bursaphelenchus xylophilus. Forest Pest and Disease. 37 (5), 1-4 (2018).
- Futai, K. Pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus. Annu Rev Phytopathol. 51 (51), ?61(2013).
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Nachdrucke und Genehmigungen
