Das Protokoll beschreibt die Entwicklung von zwei Nagetiermodellen, die geschlechtsbejahende Hormontherapien durch subkutane Verabreichung von Testosteron oder Östradiol plus Cyproteronacetat (wird in Humantherapien für Transgender-Menschen verwendet) nachahmen: Festlegung der Dosen, Identifizierung relevanter Biomarker und Bewertung der Wirkungen.
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Methodenartikel
Etablierung von Rattenmodellen, die geschlechtsangleichende Hormontherapien nachahmen
* These authors contributed equally
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Transgender-Personen (TG) sind Personen, deren Geschlechtsidentität und Geschlecht, das bei der Geburt zugewiesen wurde, nicht übereinstimmen. Sie unterziehen sich häufig einer geschlechtsbejahenden Hormontherapie (GAHT), einem medizinischen Eingriff, der den Erwerb sekundärer Geschlechtsmerkmale ermöglicht, die besser auf ihre individuelle Geschlechtsidentität abgestimmt sind, und konsistente Ergebnisse bei der Verbesserung zahlreicher sozialpsychologischer Variablen liefert. GAHT zielt jedoch auf verschiedene Körpersysteme ab, und einige Nebenwirkungen sind aufgezeichnet, wenn auch noch nicht vollständig identifiziert und charakterisiert. Daher können TG-Patienten, die sich einer GAHT unterziehen, als empfängliche Untergruppe der Bevölkerung angesehen werden, und im Rahmen der Risikobewertung sollte besondere Aufmerksamkeit gewidmet werden, z. B. durch die Verwendung gezielter Tiermodelle. Die vorliegende Arbeit beschreibt die Verfahren zur Implementierung von zwei Rattenmodellen, die GAHT nachahmen: das demaskulinisierende-feminisierende Modell (dMF), das das GAHT für TG-Frauen nachahmt, und das defeminisierend-maskulinisierende Modell (dFM), das das GAHT für TG-Männer nachahmt. Die Modelle wurden durch die Verabreichung der gleichen Hormone implementiert, die für die menschliche GAHT verwendet werden, nämlich β-Estradiol plus Cyproteronacetat für dMF und Testosteron für dFM, auf den gleichen Expositionswegen für einen Zeitraum von 2 Wochen. Die Ratten werden während der Behandlung täglich untersucht, um den Gesundheitszustand und potenziell aggressives Verhalten zu beurteilen. Bei der Tötung wurden Blutproben und Zielgewebe entnommen und für biochemische, molekulare und histopathologische Analysen gelagert. Geschlechtsspezifische Parameter, nämlich die Spermienzahl und die Klitorisabmessungen, wurden ebenfalls ausgewertet. Darüber hinaus werden CYP450-Isoformen, die ausschließlich und/oder bevorzugt in männlicher und weiblicher Rattenleber exprimiert werden, als neuartige Biomarker identifiziert und charakterisiert, um den Erfolg von GAHT zu verifizieren und das Modell festzulegen. Die Beteiligung der Schilddrüse wurde auch als ein wichtiges Ziel im endokrinen System untersucht.
Einleitung
Die psychologische Wahrnehmung des Individuums, männlich, weiblich, keines von beiden, beides oderirgendwo dazwischen zu sein, wird als Geschlechtsidentität bezeichnet. Es kann dem biologischen Geschlecht entsprechen (cisgender) oder unterschiedlich sein (transgender - TG). Ein TG-Mann ist ein Individuum, das als Frau geboren wurde, sich aber als Mann identifiziert. Eine TG-Frau wird als Mann geboren, identifiziert sich aber als Frau2. Es wird geschätzt, dass es derzeit weltweit 25 Millionen TG-Menschengibt 3, von denen die meisten an Geschlechtsdysphorie leiden, ....
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Protokoll
Die Studien werden gemäß der Richtlinie 2010/63/EU, dem italienischen Gesetzesdekret Nr. 26 vom 4. März 2014 und den OECD-Grundsätzen der Guten Laborpraxis (GLP) durchgeführt. Das Studienprotokoll wurde vom italienischen Gesundheitsministerium genehmigt (Zulassungsnummer 806/2021-PR). Hier werden 16 junge geschlechtsreife Sprague-Dawley-Ratten beiderlei Geschlechts (304 ± 13 g männliche Ratten und 190 ± 7 g weibliche Ratten, 8-9 Wochen alt) gekauft und unter Standard-Laborbedingungen (22 ± 0,5 °C, 50%-60% relative Luftfeuchte, 12 h Dunkel-Licht-Wechsel mit 12-14 Luftwechseln pro Stunde) mit Wasser und Futter ad libitum unterg....
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Ergebnisse
Wie von Tassinari et al.14 und von Tammaro et al.33 gezeigt, zeigten die folgenden Ergebnisse den Erfolg von GAHT an Ratten und die Angemessenheit der Modelle.
Es werden keine Mortalität oder abnormales Verhalten wie Aggressivität aufgezeichnet, und es werden keine klinischen Anzeichen von Toxizität oder Leiden (z. B. verminderte Aktivität, Piloerektion und ein ungepflegtes Aussehen) beobachtet14.
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Diskussion
Die Implementierung von Nagetiermodellen, die GAHT nachahmen, ist entscheidend für die Untersuchung der potenziellen spezifischen Anfälligkeit und Vulnerabilität von TG-Menschen und der langfristigen Ergebnisse der Therapien, die in der Regel ihr ganzes Leben andauern.
Angesichts der geringen Anzahl ähnlicher Studien in der Literatur ist der kritische Punkt dieses Experiments die Auswahl der Dosen zum Festlegen der Modelle; Diese Dosen sollten niedrig genug se.......
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Offenlegungen
Die Autoren erklären, dass die Forschung ohne kommerzielle oder finanzielle Beziehungen durchgeführt wurde, die möglicherweise zu einem Interessenkonflikt führen könnten.
Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Analysenwaage ABJ 320-4NM | Kern | Z741091 | |
| Bouin | Biooptica | 05-M01008 | |
| Zentrifuge 5415 R | Eppendorf | Für eppendorf | |
| Cyproteron Acetat | Sigma-Aldrich | C3412 | |
| D-MEM Medium | Gibco | ||
| ExcelTaq 2X Fast Q-PCR Master Mix (SYBR, ROX), 200 RXN | Smobio | TQ1210 | |
| Formalinlösung, neutral gepuffert, 10% | Sigma-Aldrich | HT501128 | |
| GraphPad Prism Software Version 5.0 für Windows | GraphPad Software | ||
| Hämatoxylin | Biooptica | 05-06002/L | |
| Heosin | Biooptica | 05-10007/L | |
| Imaging Software | Nikon | NIS-BR | |
| JMP 10 Statistiksoftware | SAS Institute | ||
| Microm | Thermo Scientific | HM 325 | |
| Mikroskopie | Nikon Microphot FX | ||
| Maus/Ratte Testosteron ELISA | Biovendor | RTC001R | 96T |
| NanoDrop 1000 Spektralphotometer | Thermo Scientific | ND-1000 | |
| Paraffina | Biooptica | 087910 | |
| Tragbare Waagen SCOUT STX2202 | OHAUS | br/> 30253064 | |
| Primer | Life Technologies | Entwickelt von PrimerBlast | |
| Rat Estradiol ELISA | Biovendor | RTC009R | 96T |
| Ratte TSH (Schilddrüsenstimulierendes Hormon) ELISA Kit | ELK Biotechnologie | ELK2283 | 96T |
| Ratte TSH (Schilddrüsenstimulierendes Hormon) ELIS Kit | ELK Biotechnologie | ELK2283 | 96T |
| SensiFASTcDNA Synthesekit | Bioline | BIO-65053 | 50 Reaktionen |
| Sesamöl | ACROS | AC241000010 | |
| Sprague Dawley Ratten männlich und weiblich | Envigo | 8/9 Wochen alt | |
| Standarddiäten | Mucedola | 4RF18 | |
| T4 (Thyroxin) ELISA Kit | ELK Biotechnologie | ELK8716 | 96T |
| Testosteron Enanthate | Sigma-Aldrich | T3006 | |
| Thermal Cycler LineGene 9600 Plus Bioer | Aurogene | ||
| Tissue processor | Shandon Excelsior ES, Thermo Scientific) | ||
| Totale RNA-Aufreinigung KIT | Norgen | 17200 | 50 |
| Spalten Victor 3 Multilabel-Lesegerät | Perkin Elmer | ||
| β-Östradiol 17-valerat | Sigma-Aldrich | E1631 |
Referenzen
- Rokach, A., Patel, K. Human sexuality: Function, dysfunction, paraphilias, and relationships. , Academic Press. (2021).
- American Psychological Association. Guidelines for psychological practice with transgender and gender nonconforming people. Am Psychol. 70 (9), 832-864 (2015).
- Ammari, T., Sluiter, E. C., Gast, K., Kuzon, W. M.
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Nachdrucke und Genehmigungen
