Methodenartikel

Implantation von Elektroenzephalogramm- und Elektrokardiogramm-Telemetriegeräten in Kaninchen-Kits für Neugeborene

DOI:

10.3791/67740

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28. Februar 2025

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1Department of Pediatrics, University of Michigan, Ann Arbor, 2Unit for Laboratory Animal Medicine, University of Michigan, Ann Arbor, 3Department of Pharmacology, University of Michigan, Ann Arbor, 4Department of Neurology, University of Michigan, Ann Arbor

* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

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Die Mechanismen des plötzlichen unerwarteten Todes bei Epilepsie (SUDEP) sind nur unzureichend verstanden und lassen sich nur schwer aus aktuellen Modellen übertragen. Transgene Kaninchen könnten Einblicke in diese Mechanismen geben. Wir beschreiben ein Verfahren für langfristige, kontinuierliche Elektroenzephalographie- und Elektrokardiographie-Aufzeichnungen in transgenen Kaninchen-Kits zur Bewertung schwerwiegender Ereignisse, die zum Tod führen können.

Zusammenfassung

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pathogene Varianten in Ionenkanal-Genen sind mit einer hohen Rate an plötzlichen unerwarteten Todesfällen bei Epilepsie (SUDEP) verbunden. Die Mechanismen von SUDEP sind nur unzureichend verstanden, können aber neben Krampfanfällen auch autonome Dysfunktionen und Herzrhythmusstörungen beinhalten. Einige Ionenkanalgene werden sowohl im Gehirn als auch im Herzen exprimiert, was möglicherweise das Risiko für SUDEP bei Patienten mit Ionenkanalopathien im Zusammenhang mit Epilepsie und Herzrhythmusstörungen erhöht. Transgene Kaninchen, die Epilepsievarianten exprimieren, bieten einen ganzen Organismus, um die komplexe Physiologie von SUDEP zu untersuchen. Wichtig ist, dass Kaninchen die menschliche Herzphysiologie besser nachbilden als Mausmodelle. Bei Kaninchenmodellen sind jedoch zusätzliche gesundheitliche und anästhesietechnische Überlegungen erforderlich, wenn sie sich invasiven Überwachungsverfahren unterziehen. Wir haben eine neuartige Methode entwickelt, um ein Telemetriegerät für die langfristige simultane Überwachung von Elektroenzephalogrammen (EEG) und Elektrokardiogrammen (EKG) in Kaninchen-Kits für Neugeborene chirurgisch zu implantieren. Hier demonstrieren wir chirurgische Methoden zur Implantation eines Telemetriegeräts in P14-Kits (Gewichtsbereich 175-250 g) mit detaillierter Berücksichtigung des chirurgischen Ansatzes, einer angemessenen Anästhesie und Überwachung sowie der postoperativen Versorgung, was zu einer niedrigen Komplikationsrate führt. Diese Methode ermöglicht eine kontinuierliche Überwachung der neuronalen und kardialen Elektrophysiologie während kritischer Punkte in der Entwicklung von Herzrhythmusstörungen, Krampfanfällen und potenziellem SUDEP in Kaninchenmodellen für genetische oder erworbene Epilepsien.

Einleitung

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Der plötzliche unerwartete Tod bei Epilepsie (SUDEP) ist eine der häufigsten Todesursachen bei Patienten mit Epilepsie. Die Mechanismen von SUDEP sind nur unzureichend verstanden, umfassen aber möglicherweise autonome Dysfunktion, Apnoe und Herzrhythmusstörungen zusätzlich zu Anfällen 1,2,3,4,5,6,7. Patienten mit kanalopathiebedingten genetischen Epilepsien gehören zu den höchsten SUDEP-Raten. So tritt SUDEP bei bis zu 20 % der Patienten mit Varianten im spannungsgesteuerten Natriumkanal-Gen SCN1A8 auf, dem Gen, das für das Dravet-Syndrom verantwortlich ist, eine genetische Epilepsie, die im ersten Lebensjahr beginnt. Viele epilepsiegebundene Ionenkanalgene werden sowohl im Gehirn als auch im Herzen exprimiert, wobei Labor- und klinische Daten darauf hindeuten, dass Herzrhythmusstörungen bei Patienten mit kanalopathiebedingten genetischen Epilepsien vorliegen können7, 9,10,11,12, was möglicherweise ihr SUDEP-Risiko aufgrund einer anfallsinduzierten tödlichen Herzrhythmusstörung oder des gleichzeitigen Auftretens von Anfällen und Arrhythmien erhöht. Die Evaluierung von SUDEP im Labor bringt zahlreiche Herausforderungen mit sich. Aus kardialer Sicht unterscheiden sich die kardialen Aktionspotentiale bei Mäusen stark von denen beim Menschen13, und humane iPSC-Herzmyozytenmodelle14 können die Komplexität des gesamten Organismus nicht replizieren. Transgene Kaninchenmodelle genetischer Epilepsien bieten ein ideales System zur Untersuchung von SUDEP, da die Herzphysiologie von Kaninchen die des Menschen besser repliziert13,15, während sie gleichzeitig einen ganzen Organismus zur Untersuchung komplexer Pathophysiologie bieten. Da SUDEP bereits beim ersten Anfall auftreten kann, ist die Bewertung dieser Tiermodelle von einem frühen Zeitpunkt an unerlässlich, um das Auftreten von Anfällen und Herzrhythmusstörungen zu verstehen. Die Videoaufzeichnung während der Neugeborenenperiode ist eine Herausforderung, da sich die Kaninchenbabys oft noch im Nest befinden. Eine kontinuierliche Aufzeichnung eines Elektroenzephalogramms (EEG) oder Elektrokardiogramms (EKG) mit einem herkömmlichen kabelgebundenen System ist nicht möglich, solange sich die Kits beim Muttertier befinden. Es ist unwahrscheinlich, dass bei der intermittierenden Aufzeichnung seltene, terminale Ereignisse im Zusammenhang mit SUDEP erfasst werden. Wir haben uns daher der drahtlosen implantierbaren Telemetrieüberwachung zugewandt, um eine langfristige, kontinuierliche, gleichzeitige EEG- und EKG-Aufzeichnung in Kaninchen-Kits zu ermöglichen.

Der Schlüssel zum Erfolg dieses Protokolls ist eine angemessene Anästhesie und postoperative Unterstützung für diese gefährdeten Tiere. Kaninchen haben im Vergleich zu Hunden und Katzen (0,17-0,24%) aufgrund einzigartiger anatomischer und physiologischer Merkmale ein viel höheres Risiko für den Tod an Anästhetika (1,39%-4,8%) 16,17. Zu den Hauptursachen für dieses erhöhte Anästhesierisiko gehören ein suboptimales Atemwegsmanagement und akute postoperative Komplikationen. Mehrere Faktoren tragen zu den Schwierigkeiten der Intubation bei Kaninchen bei, darunter ein langes, schmales Maul mit breiter Zunge, ein spitzer Winkel zwischen Mund und Kehlkopf, eine dorsale Verschiebung der Epiglottis, eine erhöhte Anfälligkeit für Kehlkopftraumata und eine erhöhte Neigung zu Laryngospasmus 18,19,20. Nach der Sofortanästhesieepisode besteht bei Kaninchen das Risiko, ein lebensbedrohliches gastrointestinales Stauungssyndrom zu entwickeln. Dies ist ein komplexes, multifaktorielles Problem, und es wird postuliert, dass die Anästhesie über direkte Arzneimittelwirkungen, die die Magenmotilität und/oder sekundäre Magersucht nach dem Verfahren hemmen, aus irgendeinem Grund (nicht gelinderte Schmerzen, Übelkeit usw.) dazu beiträgt21. Urheberrecht

Die einzigartige Physiologie von Kaninchen-Neugeborenen und Säuglingen verschärft die Herausforderungen, die mit Anästhesie und Operation verbunden sind. Kaninchen haben altriciale Jungtiere, die mit unterentwickelten Mechanismen für physiologische Homöostase und besonderen anatomischen Überlegungen geboren werden. Der intravenöse Zugang und die Überwachung sind schwierig, da die meisten kommerziellen Produkte nicht für die geringe Gefäßgröße, die hohe Ruheherzfrequenz und die pigmentierte Haut von Kaninchen-Kits mit holländischem Gürtel und neuseeländischem Weißkreuz optimiert sind. Da das Herzzeitvolumen bei Neugeborenen im Wesentlichen von der Herzfrequenz abhängt22 und die Arzneimittelclearance über die Nieren oder Leber im Vergleich zu Erwachsenen im Allgemeinen verringert ist23, sind Überlegungen zur geeigneten Arzneimittelauswahl und Dosierung von entscheidender Bedeutung. Es wird angenommen, dass die Hauptursache für den Tod von Anästhetika bei Kaninchen sekundär zu Atemdepression und Apnoe ist. Zusätzlich zu den bereits bei allen Kaninchen diskutierten Problemen des Atemwegsmanagements haben Neugeborene angesichts von Hypoxämie und Hyperkapnie einen verminderten Atemantrieb, was diesen ohnehin schon schwierigen Aspekt der Anästhesie noch riskanter macht24.

In diesem Protokoll beschreiben wir eine erfolgreiche Methode zur Implantation von EEG- und EKG-Telemetrie (Abbildung 1) in einem neonatalen Kaninchenmodell der Epilepsie mit einer hohen chirurgischen und anästhetischen Überlebensrate. Diese Informationen werden es anderen Forschern ermöglichen, anspruchsvolle Kaninchenmodelle für Neugeborene anzugehen, um die Forschung zu Epilepsie, Herzrhythmusstörungen und verwandten neurologischen Entwicklungsstörungen voranzutreiben.

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Protokoll

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Alle beschriebenen Arbeiten wurden vom Institutional Animal Care and Use Committee der University of Michigan im Rahmen eines genehmigten Tierverwendungsprotokolls überprüft und genehmigt und stehen in Übereinstimmung mit den einschlägigen Bundesgesetzen und -richtlinien, einschließlich des USDA Animal Welfare Act und der NIH Public Health Service Policy. Die University of Michigan ist eine AAALACi-akkreditierte Institution.

1. Vorbereitung der Tiere

  1. Grobrasur-Sets (Alter P14-P19, Gewicht >175 g) 1-2 Tage vor dem Eingriff, um die Narkosezeit am Tag der Operation mit einer Haarschneidemaschine zu minimieren.
  2. Autoklavieren oder gassterilisieren Sie alle chirurgischen Instrumente und Materialien (so weit wie möglich) zur Vorbereitung des Eingriffs.
  3. Induzieren Sie eine Anästhesie mit Ketamin (10 mg/kg IM), Buprenorphin HCl (0,01 mg/kg IM) 0,3 mg/ml, verdünnt auf 0,03 mg/ml, und Sevofluran und Sauerstoff über eine Maskenanästhesie unter Verwendung eines nicht rückatmenden Kreislaufs.
  4. Legen Sie einen 26 G 3/4" intravenösen (IV) Katheter in die Ohrvene (bevorzugt) oder die Kopfvene und spülen Sie ihn mit heparinisierter Kochsalzlösung 10 Einheiten/ml.
  5. Rasieren Sie Bauch, Brust, Rücken, Nacken und Kopf mit einer Klinge #40 oder #50 so nah wie möglich an der Haut.
  6. Tragen Sie eine nicht medikamentöse Gleitsalbe auf, um Hornhautgeschwüre zu verhindern.
  7. Verabreichen Sie Analgetika (Carprofen 4 mg/kg SQ - verdünnt auf 25 mg/ml) und perioperatives Antibiotikum (Cefazolin 20 mg/kg i.v., verdünnt auf 50 mg/ml). Verabreichen Sie Antibiotika alle 90-180 Minuten der Operationszeit erneut.

2. Chirurgische Vorbereitung (Abbildung 2)

  1. Bringen Sie das Narkoseset auf den Operationstisch und legen Sie es in Rückenlage auf ein Infrarot-Heizkissen, das über ein Rektalthermometer gesteuert wird.
  2. Legen Sie Nase und Mund in eine maßgeschneiderte 3D-gedruckte Gesichtsmaske, die mit einem Drehanschluss an einen nicht rebreathenden Jackson-Rees-Kreislauf (0,5-l-Beutel) angeschlossen ist, und halten Sie die Sevofluran-Anästhesie (1,5 %-7 % zur Wirkung) mit einem Sauerstofffluss von 2 l/min aufrecht.
  3. Halten Sie die Anästhesie mit Sevofluran aufrecht und überwachen Sie die Narkosetiefe mit einem Pulsoximeter entweder am Ohr oder an der Pfote und/oder einem Doppler an der Oberschenkelarterie oder direkt am Herzen.
  4. Passen Sie die Anästhesie während des gesamten Eingriffs an, um die Herzfrequenz (HF) zwischen 180 und 260, die Sauerstoffsättigung >85 % und die Atemfrequenz zwischen 10 und 50 Atemzügen pro Minute zu halten (direkte Visualisierung von Auslenkungen oder Bewegungen des Atembeutels).
    HINWEIS: Halten Sie Notfallmedikamente bereit (Glycopyrrolat, Adrenalin, Doxapram).
  5. Befestigen Sie das Set an der Gesichtsmaske, indem Sie die vorderen Gliedmaßen vorsichtig mit der Maske verbinden.
  6. Positionieren Sie das Set in einer leicht rechtsseitlichen Position, indem Sie das linke Hinterbein locker auf dem Operationstisch befestigen.
  7. Bereiten Sie den gesamten Bauch mit einem erwärmten chirurgischen Peeling vor, das abwechselnd Betadin und sterile Kochsalzlösung enthält.
    HINWEIS: Auf Wunsch kann eine zusätzliche chirurgische Lösung verwendet werden, um das Peeling zu beenden. Der Chirurg, der spezielle Kittel, Haarhauben und Schuhüberzieher trägt, schrubbt aseptisch und zieht sterile Kittel und Handschuhe an, um den Eingriff unter sterilen Bedingungen durchzuführen.
  8. Legen Sie selbstklebende OP-Tücher auf beide Seiten des Sets und decken Sie es mit einem großen OP-Tuch ab. Schneide ein Loch in geeigneter Größe, um Bauch und Brust freizulegen.
  9. Öffnen Sie das Implantat auf das Operationsfeld und platzieren Sie nicht resorbierbare Ankernähte in jedes der Implantatankerlöcher. Lassen Sie die Naht mit einem 5-6 cm langen Schwanz befestigt (Abbildung 3A). Legen Sie das Implantat in eine Schüssel mit erwärmter, steriler Kochsalzlösung.

3. Platzierung des Implantats im Bauch

  1. Nachdem Sie für eine ausreichende Anästhesie gesorgt haben, machen Sie mit einem Skalpell einen 3 cm langen Schnitt durch die Haut entlang der Linea alba.
  2. Machen Sie einen vorsichtigen Schnitt durch den Muskel, um die Bauchhöhle zu öffnen.
  3. Platzieren Sie das Implantat in den kranialen Teil der Bauchhöhle und positionieren Sie es links vom Schnitt.
  4. Verwenden Sie einen Trokar, um den negativen EKG-Draht etwa 2 cm rechts des Schnitts aus der Bauchhöhle und der Haut zu tunneln. Tunneln Sie die restlichen 3 Drähte 3-4 cm links vom Schnitt, damit das Implantat bequem in der Bauchhöhle sitzen kann.
  5. Befestigen Sie das Implantat mit den Ankernähten an der ventralen Wand der Bauchhöhle, um sicherzustellen, dass kein Darmeinschluss entsteht (Abbildung 3B).
  6. Verschließen Sie die Bauchdecke mit einer resorbierbaren Naht in einem kontinuierlichen Muster.
  7. Verschließen Sie den Hautschnitt mit einer nicht resorbierbaren Naht in einem unterbrochenen Muster.

4. Platzierung der EKG-Ableitungen

  1. Tunneln Sie die negative EKG-Leitung subkutan zur rechten oberen Brust auf Höhe der ersten Rippe.
  2. Präparieren Sie stumpf eine subkutane Tasche, um etwa 10 cm Draht locker aufzuwickeln.
    HINWEIS: Enge Spulen unter der Haut können zu Hauterosion und Drahtfreilegung führen.
  3. Schneiden Sie den überschüssigen Draht ab und erstellen Sie eine Schlaufe mit dem freiliegenden Draht, indem Sie das Ende mit einer nicht resorbierbaren Naht an den isolierten Draht binden.
  4. Befestigen Sie die Schlaufe mit 2 nicht resorbierbaren Nähten am Muskel.
  5. Den Bauchfellmuskel rechts um den Draht herum mit 1-2 resorbierbaren Nähten in einem unterbrochenen Muster verschließen.
  6. Verschließen Sie die Haut an der rechten oberen Brust und am rechten Bauch mit 2-3 nicht resorbierbaren Nähten in einem unterbrochenen Muster.
  7. Tunneln Sie die positive EKG-Leitung zur linken unteren Rippe und wiederholen Sie die obigen Schritte, um sie am Muskel zu befestigen und den Schnitt zu schließen.
  8. Tunnel: Das EEG führt subkutan so weit wie möglich zur linken lateralen Seite in das Operationsfeld.
  9. Fügen Sie dem Peritonealmuskel links um die austretenden Drähte herum 1 resorbierbare Naht hinzu. Verschließen Sie die Haut mit einer nicht resorbierbaren Naht in einem unterbrochenen Muster.
  10. Wickeln Sie die freiliegenden EEG-Drähte mit steriler Alufolie ein.

5. Vorbereitung der Rückenfläche

  1. Ein unsteriler Assistent entfernt dann das sterile Abdecktuch und die Beinfessel.
  2. Drehen Sie das Kit in die Bauchlage (Abbildung 2B) und stellen Sie sicher, dass die Gesichtsmaske sicher an Ort und Stelle bleibt, indem Sie den Drehanschluss zwischen Gesichtsmaske und Schaltung verwenden. Passen Sie die Pulsox- und/oder Dopplermonitore nach Bedarf an, um eine kontinuierliche Anästhesieüberwachung zu gewährleisten.
  3. Bereiten Sie das Operationsfeld mit einem Betadin-Peeling vor, das den Kopf, den Hals und den gesamten Rücken umfasst, wobei Sie darauf achten, den Bereich der austretenden Drähte auf der linken Seite zu schrubben.
  4. Der Chirurg legt dann ein steriles Klebetuch unter die linke Seite, während das Aluminiumfolienpaket mit den Drähten von einem unsterilen Assistenten gehalten wird.
  5. Entfernen Sie steril und vorsichtig die Drähte aus der Aluminiumpackung und legen Sie sie auf das sterile Feld. Zum Schluss mit sterilen Handtüchern drapieren.
  6. Decken Sie es mit einem sterilen Tuch ab und schneiden Sie ein Fenster aus, das groß genug ist, um das gesamte sterile Feld freizulegen.

6. Platzierung der EEG-Elektroden

  1. Machen Sie einen 3 cm langen Schnitt durch die Kopfhaut an der Mittellinie, um den Schädel freizulegen.
  2. Verwenden Sie einen Trokar, um die EEG-Ableitungen von der linken Seite zum Schädel subkutan zu tunneln.
  3. Reinigen und kratzen Sie das Periost mit einem Skalpell von den freiliegenden Scheitelknochen ab.
  4. Setzen Sie einen Handbohrer in eine sterile Ultraschallabdeckung ein. Führen Sie einen 1,0 mm Bohrfräser in den Bohrer ein.
  5. Bohren Sie bilaterale Fräslöcher in die Scheitelknochen etwa 0,5 cm vor dem Lambda und 0,5 cm lateral der sagittalen Naht.
    HINWEIS: Vorsicht bei dem auf den dorsalen Schädel ausgeübten Druck, da dies die ventralen Atemwege verschließen kann, daher ist die Atemüberwachung an dieser Stelle des Eingriffs von entscheidender Bedeutung. Ein stetiger oder signifikanter Abfall der Herzfrequenz kann auf einen Atemverschluss (Bradykardie als Folge einer Apnoe) hinweisen und sollte eine sofortige Beurteilung und Maßnahmen erforderlich machen.
  6. Setze mit einer feinen Pinzette eine Schraube in das Fräsloch. Mit dem Schraubendreher etwa zur Hälfte einführen (Abbildung 3C).
  7. Sezieren Sie stumpf eine subkutane Tasche entlang des Nackens, um etwa 10 cm Draht locker aufzuwickeln.
  8. Schneiden Sie den überschüssigen Draht ab. Entfernen Sie die Isolierung von der Spitze und dehnen Sie den Draht.
  9. Erstellen Sie eine Schlaufe am Ende des freiliegenden Drahtes, indem Sie einen Knoten binden und eine kleine Schlaufe aufbewahren. Lege die Schlaufe über die Schraube und ziehe die Schraube am Schädel fest, wobei du darauf achtest, dass der Draht die Schraube berührt. Verlegen Sie das Erdungskabel auf der linken Seite und das Aufzeichnungskabel auf der rechten Seite.
  10. Bewerten Sie die Telemetriesignale in der Analysesoftware auf Genauigkeit, sobald alle Kabel an Ort und Stelle sind. Das EEG-Signal erscheint mit einer niedrigen Amplitude, während das Kit sediert ist.
  11. Befestigen Sie die Schrauben und Drähte mit Zahnacryl am Schädel und lassen Sie ihn vollständig aushärten.
  12. Verschließen Sie die Haut mit einer nicht resorbierbaren Naht am Kopf und an der linken Flanke.
  13. Injizieren Sie Bupivacain (Höchstdosis 2 mg/kg von 5 mg/ml, verdünnt auf 2,5 mg/ml) subkutan bei jedem Einschnitt. Decken Sie jeden Schnitt mit einer kleinen Menge Hautkleber ab, der mit einer Tuberkulinspritze verabreicht wird.

7. Wiederherstellung der Anästhesie

  1. Schalten Sie die Sevofluran-Anästhesie aus und geben Sie mindestens 5 Minuten lang nur Sauerstoff, während Sie das restliche Klebeband, das Abdecken und die Anästhesieüberwachung entfernen.
  2. Überprüfen Sie den Blutzuckerspiegel mit einem Blutzuckermessgerät und verabreichen Sie erwärmte subkutane Flüssigkeiten in einer Menge von 10 % des Körpergewichts (kg).
  3. Sobald das Tier auf einen schmerzhaften Reiz (Zehenkneifen) reagiert, begeben Sie sich in einen Erholungsinkubator mit 37-38 °C.
    HINWEIS: Oft sinkt die Temperatur des Kits während dieser Übertragung erheblich ab. Es kann von Vorteil sein, das Kit wieder in das Biofeedback-Infrarot-Heizkissen zu stecken oder zusätzliche Wärme zuzuführen.
  4. Überwachen Sie kontinuierlich visuell und zeichnen Sie alle 10-15 Minuten die Rektaltemperatur, die Pulsoximeter-Messwerte, die Herzfrequenz und die Atemfrequenz auf.
  5. Sobald das Tier durchgehend gehfähig und wach ist, entfernen Sie den intravenösen Katheter und üben Sie Druck auf die Stelle aus, bis die Blutung aufhört.

8. Postoperative Pflege und Überwachung

  1. Geben Sie das Kit an die Mutter und die Wurfgeschwister zurück. Stellen Sie sicher, dass Nistmaterial und zusätzliche Nahrung (Materialtabelle) im Käfig verfügbar sind, um die Wärmeregulierung und Regeneration zu unterstützen.
  2. Überprüfen Sie das Kit täglich für 7-10 Tage nach der Operation, wiegen Sie täglich und geben Sie zusätzliche Nahrung im Käfig.
  3. In den ersten 2 Tagen nach der Genesung (D1 und D2) alle 24 Stunden zusätzliche Analgetika (Carprofen 4 mg/kg SQ - verdünnt auf 5 mg/ml) und subkutane Flüssigkeiten (5-7 ml) verabreichen.
  4. Überprüfen Sie das Kit in den ersten 3 Tagen nach der Genesung (D1, D2 und D3) zweimal täglich und untersuchen Sie es auf Anzeichen von Schmerzen, Gehfähigkeit, Inzisionsaussehen und Flüssigkeitszufuhr. Messen Sie während dieses Zeitraums einmal täglich die Temperatur des Kits, um sicherzustellen, dass keine Anzeichen einer Infektion vorliegen und die Wärmeregulierung angemessen ist.
  5. Entfernen Sie die Nähte, wenn die Schnitte nach 7-10 Tagen ordnungsgemäß verheilt sind.

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Ergebnisse

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Das erfolgreiche Ergebnis dieses Projekts erforderte die Entwicklung mehrerer Parameter im Implantatverfahren und im Aufzeichnungsprotokoll. Eine Implantatoperation wurde an 16 Kaninchen-Kits versucht oder durchgeführt, wobei 14 den Eingriff erfolgreich überlebten. Von diesen überlebten 12 bis zum experimentellen Endpunkt. In Tabelle 1 sind die Gründe für den intraoperativen oder postoperativen Tod aufgeführt, zusammen mit Verfahrensmodifikationen, die einen zukünftigen Erfolg beim Erreichen des experime...

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Diskussion

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Das beschriebene Protokoll für die Induktion, Überwachung und Unterstützung von Anästhetika gleicht den Forschungsbedarf an chirurgischen Ansätzen und Leichtigkeit mit den Goldstandards der tierärztlichen Versorgung aus. Bevor das Labor das beschriebene Protokoll als Standardverfahren anwendete, wurden mehrere andere potenzielle Verfeinerungen getestet, einschließlich der dorsalen subkutanen Implantatinsertion, der Verwendung eines Endotrachealtubus oder einer Larynxmaske und der Verwend...

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Offenlegungen

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Die Autoren haben nichts offenzulegen.

Danksagungen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Die Autoren sind dankbar für die Finanzierung durch die NIH R61NS130070 an LLI.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
1 Zoll elastische Umhüllung - Coban oder Vetwrap3Mhttps://www.3m.com/3M/en_US/p/d/b00003186/
4-0 PDS Monofil NahtEthiconhttps://www.jnjmedtech.com/en-US/company/ethicon/all-products
5-0 Ethilon Nylon NahtEthiconhttps://www.jnjmedtech.com/en-US/company/ethicon/all-products
AkquisitionscomputerDell
Selbstklebende OP-TücherN/AN/A
Anästhesiekreislauf - Jackson-Reevs mit 0,5 L AtembeutelJorVetJ0248GA
Betadine PeelingN/AN/A
Bupivicain (0,5%)N/AN/A Vorder Verabreichung auf 2,5 mg/ml verdünnt
Buprenorphin (0,3 mg/ml)N/AN/AVor der Verabreichung auf 0,03 mg/ml verdünnt 
Mahlwerk - 1,00 mmCell Point Scientific60-1000zum Bohren von Schädeln
Cafazolin (1 g lypholisiert)N/AN/AVerdünnt auf 50 mg/mL
Carprofen (50 mg/ml)MWI VeterinärVerdünnt auf 25 mg/mL vor der Verabreichung
Applikatoren mit WattespitzeN/AN/A
Benutzerdefinierte 3D-gedruckte GesichtsmaskeN/A
Dental AcrylN/AN/A
Diät Gel Criticare KlarH2O72-05-5042Ernährungsunterstützung 
Dopper Gel - AquasonicPatterson 07-890-5542
Doppler - Vet-Dop2Patterson07-888-8986
Doxapram (20 mg/ml)MWI VeterinärN/ANur Notfall
Dumont #5 Feine PinzetteFine Science Tools11254-20Zum Halten von Schrauben
Duraprep3M8630Endvorbereitung
des EKGsAutomatische Datenanalysesoftwareemka technologiesN/A
Epinephrin (1:1000)MWI VeterinaryN/ANur Notfall
GazeN/AN/A
Glukometer ipet ProMWI Veterinary63867Überwachen Sie bei schlechter Genesung
Glycopyrrolat (0,2 mg/ml)MWI VeterinaryN/ANur Notfall
GrammwaageN/AN/A
HemostatsFine Science Tools13008-12Halten Sie Drahtschlaufen fest, während Sie die Schlaufe an Ort und Stelle binden
Idealer MikrobohrerCell Point Scientific67-1204Zum Bohren von Schädeln
InkubatorDRE-veterinary (Infantia - NB1)N/A
InduktionsboxVetEquip941444
Infared Heizkissen - RightTemp JrKent Scientific CorporationRT-0502
IOX2 Datenerfassungssoftwareemka technologiesN/A
IV Katheter - Covidein Monoject 26 G, 3/4 Zoll PTFE Patterson 07-836-8494
Ketamin (100 mg/ml)MWI VeterinaryN/A
MedicalN/AN/A
Narrow Pattern Pinzette - Gerade/12cm Fine Science Tools11002-12
Stetheskop für NeugeboreneUltrascope N/A
Olsen-Hegar Nadelhalter mit Schere - 12 cmFine Science Tools12002-12Zum Nähen
Augensalbe PuralubeMWI Veterinary N/AWährend der Anästhesie auf beide Augen verabreicht
Opthalmic Lubricant - Paralube VetPatterson 07-888-2572
Pulsoximeter (AccuWave Portable )Patterson07-892-9128Zur Vorbereitung und Genesung; misst HR bis zu 400
Pulsoximeter (SDI - Vet/Ox plus 4700)HeskaN/AIntraoperativ; nicht mehr produziert
Empfängeremka technologiesN/A1 Empfänger pro 4 Telemetrieimplantate
RektalthermometerN/AN/A
ScalpelFine Science Tools10003-12
SchereFine Science Tools14002-12Zum Schneiden von Abdecktüchern
Schraubendreher - 1,0 mmN/AN/AVon Mini-Schraubendreher-Set für Elektronik
Schrauben 00-96 x 3/32 (2,4 mm)Protech International8L0X3905202F
SevofluranMWI Veterinärpflege Anästhesie
Sevofluran Vaporizer und AnästhesiegerätN/AN/A
Hautkleber, GlutureMWI Veterinary34207Sparsam mit Spritze auftragen
Kleine SchereFine Science Tools14084-08
Sterile AluminiumfolieN/AN/AZum Umwickeln von Drähten vor dem Drehen des Tieres 
Steriler PinselN/AN/AZum Auftragen von Dentalacryl 
Sterile KochsalzlösungN/AN/A
Sterile OP-HandschuheN/AN/A
Sterile UltraschallabdeckungN/AN/AZur Abdeckung des Bohrers
Steriles WasserN/AN/AFür die Rekonstitution von Cefazolin
Chirurgische Klinge Nr. 15N/AN/A
Chirurgisches TuchN/AN/A
OP-MantelN/AN/A
Drehverbinder - Jorgensen LabsPatterson 07-802-2349Zum Anschließen eines Anästhesiekreislaufs an die Gesichtsmaske
Telemetrieimplantatemka technologies  easyTEL+_M1_EETA_B_35
TrokarSAITRO-10-6Zum Tunneln von Drähten
https://www.dell.com/en-ushttps://www.thingiverse.com/thing:923725 tape

Referenzen

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