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Methodenartikel

Hautbiopsie zur Diagnose des diskoiden Lupus erythematodes

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DOI:

10.3791/67876

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10. Juni 2025

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1Department of Rheumatology, Shanghai Skin Disease Hospital, Tongji University School of Medicine, 2Department of Dermatopathology, Shanghai Skin Disease Hospital, Tongji University School of Medicine

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Hautläsionen sind häufige und wichtige Merkmale bei vielen rheumatischen Erkrankungen, und die Biopsie mit pathologischer Analyse spielt eine entscheidende Rolle bei der Diagnose. Dieser Artikel gibt einen detaillierten Überblick über das standardisierte Verfahren der Hautbiopsie und beleuchtet am Beispiel des diskoiden Lupus erythematodes die wesentliche Rolle der Dermatopathologie bei der Diagnostik rheumatischer Erkrankungen.

Zusammenfassung

Der diskoide Lupus erythematodes (DLE) ist die häufigste Variante des kutanen Lupus erythematodes (CLE). Es betrifft typischerweise die Kopfhaut, das Gesicht, die Ohrmuschel und die Lippen. Wenn sich die Läsionen über diese Bereiche hinaus erstrecken und den Rumpf und die Gliedmaßen betreffen, wird die Erkrankung als disseminierte DLE (DDLE) bezeichnet. Die pathognomonischen Hautläsionen zeigen sich als gut abgegrenzte diskoide erythematöse Plaques mit fest anhaftenden Schuppen oder Krusten, zentraler Atrophie, charakteristischer Narbenbildung und Pigmentveränderungen, die möglicherweise zu irreversiblen narbenbildenden Alopezie führen. Die histopathologische und immunpathologische Untersuchung der Hautläsionen ist für die Diagnose der DLE von entscheidender Bedeutung. Histologisch ist die DLE gekennzeichnet durch Hyperkeratose, follikuläre Verstopfung, fokale epidermale Ausdünnung, vakuoläre Veränderung der dermo-epidermalen Grenzfläche, Verdickung der epidermalen Basalmembran und ein oberflächliches und tiefes perivaskuläres und periadnexales lymphozytäres Infiltrat, oft in Verbindung mit interstitiellem Mucin. Direkte Immunfluoreszenz (DIF) kann Ablagerungen von Immunglobulinen und Komplementen an der dermo-epidermalen Verbindung (DEJ) aufdecken. Der folgende Artikel beschreibt die Protokolle für die Beurteilung von DLE-Läsionen, Hautbiopsieverfahren, histopathologische und immunpathologische Analysen sowie Behandlungsoptionen mit dem Ziel, einen umfassenden, standardisierten und replizierbaren diagnostischen und therapeutischen Prozess bereitzustellen, um klinische Ärzte in der Praxis zu unterstützen.

Einleitung

Hautläsionen sind häufige und entscheidende Manifestationen, die oft als Frühindikatoren bei vielen rheumatischen Erkrankungen dienen. Diese Läsionen spielen eine wesentliche Rolle bei der Diagnose und Überwachung der Krankheit und sind häufig in den Klassifikationskriterien für Erkrankungen wie systemischen Lupus erythematodes, Dermatomyositis, Sklerodermie, Morbus Still im Erwachsenenalter und Morbus Behçetenthalten 1. Eine gründliche Untersuchung der Haut kann zur Früherkennung, wirksamen Behandlung und Überwachung dieser Erkrankungen beitragen und dazu beitragen, schwere Komplikationen zu vermeiden.

Die Hautbiopsie ist eines der am häufigsten durchgeführten diagnostischen Verfahren bei rheumatischen Erkrankungen mit kutanen Manifestationen. Als einfache und kostengünstige diagnostische Methode ermöglicht die Hautbiopsie die Visualisierung morphologischer Merkmale, die mit bloßem Auge nicht sichtbar sind. Die Histopathologie bietet eine detaillierte Untersuchung eines kleinen Teils der Läsion, senkrecht zur Hautoberfläche betrachtet. Dieser Prozess ist sowohl für Kliniker als auch für Pathologen bei der Diagnose von Bindegewebserkrankungen (CTD) von entscheidender Bedeutung.

Die formalinfixierte, in Paraffin eingebettete Technik ist weithin etabliert und bietet mehrere Vorteile, wie z. B. die Möglichkeit, Proben langfristig zu archivieren und das Potenzial für eine immunhistochemische Verarbeitung. Die Hämatoxylin- und Eosin-Färbung (HE) ist die am häufigsten verwendete Färbung für die Histopathologie, da sie sowohl normale als auch abnormale Zell- und Gewebekomponenten hervorheben kann. Die Hämatoxylin-Komponente bindet an saure Strukturen wie DNA und RNA und färbt sie blau. In der Haut färbt dies Zellkerne, raues endoplasmatisches Retikulum und Ribosomen2. Eosin färbt eosinophile Strukturen, die typischerweise aus intrazellulären oder extrazellulären Proteinen bestehen (z. B. Zytoplasma und die meisten Bindegewebsfasern), in unterschiedlichen Rottönen. Dadurch werden alle relevanten Gewebestrukturen in der Probe effektiv gefärbt3.

Die Immunfluoreszenz (IF) ist ein wichtiges diagnostisches Instrument bei der Beurteilung von Patienten mit Verdacht auf autoimmune, vaskulopathische und kutane vesikobulöse Erkrankungen, da sie hilft, antigengebundene Antikörper in Geweben oder Körperflüssigkeiten zu identifizieren. Es gibt zwei Haupttypen von IF-Assays: direkte IF (DIF) und indirekte IF (IIF). Der gebräuchlichere DIF-Assay verwendet Fluorochrom-markierte Antikörper, um die Ablagerung von Immunreaktanten in der Haut des Patienten nachzuweisen. Es wurde eine Reihe von Antikörpern verwendet, die auf Immunglobulin (Ig) G, IgA, IgM und Komplement C3 abzielen4.

Der diskoide Lupus erythematodes (DLE) ist die häufigste Form des kutanen Lupus erythematodes (CLE) und betrifft typischerweise Bereiche wie Kopfhaut, Gesicht, Ohrmuschel und Lippen. Wenn sich die Läsionen über diese Regionen hinaus erstrecken und den Rumpf und die Gliedmaßen betreffen, wird die Erkrankung als disseminierte DLE (DDLE) bezeichnet5. Charakteristische Hautläsionen erscheinen als gut abgegrenzte diskoide erythematöse Plaques, oft begleitet von fest anhaftenden Schuppen oder Krusten, zentraler Atrophie, charakteristischer Narbenbildung und Pigmentveränderungen, die zu irreversiblen narbenbildenden Alopezie führen können, wenn sie auf der Kopfhaut auftritt. Obwohl viele Patienten asymptomatisch bleiben, kann es bei einigen Patienten zu leichtem Juckreiz kommen 6,7. DLE-Läsionen sind typischerweise durch epidermale Atrophie, follikuläre Verstopfung, Basalmembranverdickung und lymphozytäre Infiltration gekennzeichnet. DIF weist die Ablagerung von Immunglobulin und Komplementen entlang des dermo-epidermalen Übergangs nach, die sowohl in läsionaler als auch in nicht-läsionaler Haut vorhanden sind, bekannt als Lupus-Band-Test 8,9. Die Diagnose der DLE basiert in erster Linie auf dem klinischen Erscheinungsbild sowie auf histopathologischen und immunpathologischen Befunden. Wenn histopathologische und immunpathologische Informationen notwendig sind, wird eine Hautbiopsie unerlässlich.

Die Wahl der Biopsieart und des Biopsieortes hat einen erheblichen Einfluss auf die histologische Beurteilung. Das Verständnis des richtigen Zeitpunkts, des Ortes und der Technik der Biopsie ist entscheidend, um genaue pathologische Ergebnisse zu erhalten. Um eine präzise Diagnose zu gewährleisten, müssen mehrere Faktoren berücksichtigt werden, was unterstreicht, wie wichtig es ist, potenzielle Herausforderungen im Biopsieprozess anzugehen, um sowohl die Qualität der Biopsie als auch die Genauigkeit der Diagnose zu verbessern. Dieser Artikel bietet einen detaillierten Überblick über das standardisierte Hautbiopsieverfahren am Beispiel der DLE und hebt wichtige Überlegungen hervor, um eine genaue und effektive Diagnose zu gewährleisten.

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Protokoll

Dieses Protokoll wurde von der Ethikkommission des Shanghai Dermatology Hospital genehmigt, und es wurde eine schriftliche Einverständniserklärung der Teilnehmer für die Veröffentlichung klinischer Bilder und Daten eingeholt. Eine Hautbiopsie bezieht sich in der Regel auf die traditionelle Exzision von Hautläsionen mit einer fusiformen Technik mit einem chirurgischen Skalpell. Am Beispiel der Exzisionsbiopsie bietet das folgende Protokoll eine detaillierte Beschreibung des chirurgischen Verfahrens zur Durchführung einer Hautbiopsie (Abbildung 1).

Die Teilnehmer kamen für die Aufnahme in Frage, wenn sie deutliche Hautläsionen aufwiesen, die eine Biopsie für die endgültige Diagnose erforderten, eine normale Gerinnungsfunktion zeigten und keine Anzeichen einer akuten Infektion oder eitrigen Läsionen an der vorgesehenen Biopsiestelle zeigten. Zu den Ausschlusskriterien gehörten eine bekannte Neigung zur keloiden oder hypertrophen Narbenbildung, die langfristige Einnahme von Immunsuppressiva oder andere Erkrankungen, die die Wundheilung beeinträchtigen könnten. Schwangere oder stillende Frauen wurden aufgrund möglicher Risiken ausgeschlossen. Patienten, die aufgrund einer psychischen Erkrankung oder anderer Faktoren nicht in der Lage waren, zu kooperieren, wurden ebenfalls von der Studie ausgeschlossen. Alle Teilnehmer gaben eine schriftliche Einverständniserklärung ab und stimmten freiwillig zu, sich der Hautbiopsie zu unterziehen. Die Details zu den Reagenzien und den verwendeten Geräten sind in der Materialtabelle aufgeführt.

1. Vorbereitung des Patienten

  1. Überprüfen Sie die Identität des Patienten, einschließlich Name, Nummer der Krankenakte und der Biopsiestelle.
  2. Führen Sie eine gründliche Überprüfung der Krankengeschichte des Patienten durch, einschließlich Blutungsneigung, Bluthochdruck, Diabetes, Herzerkrankungen und der aktuellen Einnahme von Antikoagulanzien oder Thrombozytenaggregationshemmern.
  3. Durchführung präoperativer Untersuchungen, einschließlich routinemäßiger Blutuntersuchungen, Bewertungen der Gerinnungsfunktion und Screening auf Indikatoren für Infektionskrankheiten10,11.
  4. Erklären Sie dem Patienten und seiner Familie klar den Zweck, die Methode, mögliche Komplikationen und Vorsichtsmaßnahmen, die mit der Hautbiopsie verbunden sind.
  5. Stellen Sie sicher, dass der Patient die Einwilligungserklärung unterschrieben hat.

2. Vorbereitung von Geräten und Materialien

  1. Bereiten Sie ein steriles Biopsie-Kit vor, das alle notwendigen Instrumente enthält, einschließlich Skalpell, Pinzette, Schere und andere erforderliche Werkzeuge. Stellen Sie sicher, dass alle Instrumente ordnungsgemäß sterilisiert sind.
  2. Bereiten Sie eine antiseptische Lösung (z. B. Alkohol, Jodophor oder Chlorhexidin), ein Lokalanästhetikum (z. B. Lidocain), eine sterile Injektionsspritze, sterile Nadeln, sterile Nähte, sterile Handschuhe, sterile Gaze und Verbandsmaterialien vor. Ordnen Sie alle notwendigen Instrumente und Medikamente griffbereit an, um die Effizienz zu maximieren.

3. Vorbereitung der Biopsiestelle

  1. Wählen Sie die Biopsiestelle sorgfältig aus, insbesondere wenn mehrere Läsionen vorhanden sind. Wählen Sie eine unbehandelte, nicht traumatisierte, voll entwickelte Läsion, die ausgeprägte charakteristische Merkmale aufweist. Stellen Sie sicher, dass die Biopsie tief genug ist, um die gesamte Dicke der Läsion zu erfassen, einschließlich der Epidermis, der Dermis (insbesondere der tiefen Dermis) und eines kleinen Teils des angrenzenden normalen Gewebes, um als Kontrolle zu dienen.
  2. Markieren Sie den geplanten Exzisionspfad vor dem Eingriff, um die Präzision zu gewährleisten. Rasieren Sie bei Bedarf alle Haare um die Operationsstelle.
  3. Machen Sie Fotos sowohl von den Läsionen als auch von der Biopsiestelle, um später bei der medizinischen Entscheidungsfindung und Behandlungsplanung darauf zurückgreifen zu können.
  4. Positionieren Sie den Patienten richtig und stellen Sie sicher, dass die Biopsiestelle gut freiliegt und parallel zum Boden ausgerichtet ist.

4. Verfahren der Biopsie

  1. Desinfizieren Sie den Biopsiebereich
    1. Desinfizieren Sie den Biopsiebereich gründlich mit einer geeigneten antiseptischen Lösung. Decken Sie einen Durchmesser von mindestens 15 cm ab. Reinigen Sie in kreisenden Bewegungen, beginnend an der chirurgischen Schnittstelle und nach außen. Lassen Sie das Antiseptikum vollständig trocknen.
      HINWEIS: Verwenden Sie ein jodfreies Antiseptikum für Patienten mit bekannten Allergien.
  2. Tragen Sie ein steriles OP-Abdecktuch auf
    1. Tragen Sie nach der Desinfektion ein steriles OP-Tuch auf, um das Operationsfeld zu isolieren.
  3. Lokalanästhesie verabreichen
    1. Verwenden Sie eine 1%-2%ige Lidocainlösung für die Lokalanästhesie. Subkutan an der Biopsiestelle mit einer feinen Nadel injizieren (gemäß institutionell anerkannten Protokollen). Warten Sie 2-3 Minuten, bis die volle Wirkung entfaltet ist. Tasten Sie die Stelle vorsichtig ab, um zu bestätigen, dass keine Schmerzen vorhanden sind.
      HINWEIS: Bei Kindern oder ängstlichen Patienten sollten Sie zusätzlich oder anstelle eines injizierbaren Anästhetikums ein topisches Anästhetikum in Betracht ziehen.
  4. Führen Sie die Inzision und Gewebeexzision durch
    1. Verwenden Sie ein steriles Skalpell, um einen vertikalen, schiffchenförmigen Schnitt zu machen, der sich bis zur tiefen Dermis oder zum Unterhautfett erstreckt. Verwenden Sie eine Biopsiezange, um das Gewebe sanft zu stabilisieren oder anzuheben.
    2. Exzidieren Sie einen repräsentativen Teil der Läsion, einschließlich eines kleinen Randes des umgebenden normalen Gewebes, für eine umfassende histopathologische Beurteilung. Streben Sie eine Gewebegröße von 3-5 mm an.
    3. Üben Sie 2-3 Minuten lang gleichmäßigen Druck mit steriler Gaze aus oder bis die Blutung vollständig aufhört.
    4. Verwenden Sie bei Bedarf resorbierbare Nähte oder Elektrokauter für größere Gefäße12.
      HINWEIS: Bereiten Sie hämostatische Werkzeuge für Hochrisikopatienten im Voraus vor.
  5. Vernähen Sie die Exzisionsstelle, um die Heilung zu fördern und das Infektionsrisiko zu verringern. Verwenden Sie für Gesichts- oder Halswunden 6-0 monofile nicht resorbierbare Nähte. Verwenden Sie für Wunden am Rumpf oder an den Gliedmaßen 5-0 nicht resorbierbare Nähte. Führen Sie die Nadel vertikal ein, wobei Sie einen Abstand zwischen dem Eintrittspunkt und dem Wundrand einhalten, der der Wundtiefe entspricht.
  6. Legen Sie einen sterilen Verband über die Biopsiestelle und befestigen Sie ihn mit Klebeband.
  7. Raten Sie dem Patienten, die Wunde 24-48 Stunden lang trocken zu halten. Geben Sie detaillierte Pflegeanweisungen nach dem Eingriff, einschließlich Richtlinien für Verbandswechsel und Aktivitätseinschränkungen.
    HINWEIS: Vereinbaren Sie Nachsorgetermine für Hochrisikopatienten, um die Wundheilung zu überwachen.

5. Handhabung der Proben

  1. Teilen Sie das exzidierte Gewebe mit einem sterilen Skalpell oder einer Schere in zwei Portionen, bevor Sie die Probe in das entsprechende Transportmedium legen. Beschriften Sie jeden Behälter deutlich mit den Identifikationsinformationen des Patienten und der Biopsiestelle. Füllen Sie das Antragsformular für Pathologie vollständig aus.
  2. Legen Sie eine Hälfte des Gewebes in einen Behälter mit einem Fixiermittel (z. B. 10%ige Formalinlösung) und senden Sie es zur Hämatoxylin- und Eosin-Färbung an das Pathologielabor.
  3. Transportieren Sie die andere Hälfte entweder auf in eiskalter physiologischer Kochsalzlösung getränkter Gaze zur sofortigen Verarbeitung oder legen Sie sie zur verzögerten Verarbeitung in Michels Medium. Die Probe ist so bald wie möglich für die direkte Immunfluoreszenzanalyse (DIF)13 vorzubereiten.
    HINWEIS: Unter diesen Optionen ist das schnelle Einfrieren die am häufigsten verwendete Methode. Lagern Sie Hautbiopsieproben nicht länger als 24 Stunden in mit Kochsalzlösung getränkter Gaze oder länger als einen Monat in Michels Medium bei 4-8 °C14.

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Ergebnisse

Histologisch ist die DLE gekennzeichnet durch Hyperkeratose, follikuläre Verstopfung, Abflachung der epidermalen Leisten, fokale epidermale Ausdünnung, vakuoläre Veränderung der dermo-epidermalen Grenzfläche, Verdickung der epidermalen Basalmembran und ein oberflächliches und tiefes perivaskuläres und periadnexales lymphozytäres Infiltrat, oft in Verbindung mit interstitiellem Mucin 5,15 (Abbildung 2). DIF kann die Ablagerung von Imm...

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Diskussion

Die Hautbiopsie ist für die Bestätigung von Diagnosen und die Unterscheidung verschiedener Erkrankungen unerlässlich, da sie die Untersuchung histologischer Merkmale ermöglicht, die einen entscheidenden diagnostischen Beweis für die Früherkennung und Behandlung verschiedener Erkrankungen liefern. Eine genaue Diagnose ermöglicht es Ärzten, wirksame Behandlungspläne zu formulieren und so unangemessene Therapien zu verhindern, die sich aus Fehldiagnosen ergeben könnten. Aufgrund seiner Bede...

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Offenlegungen

Es gibt keine Interessenkonflikte, die offengelegt werden müssen.

Danksagungen

Wir danken den folgenden Personen herzlich für ihre Unterstützung und Beiträge zum Videoproduktionsprozess: Lili Ma, Ke Xue, Jiaping Qi und Ruilian Lin von der Abteilung für Rheumatologie, Shanghai Skin Disease Hospital, Tongji University School of Medicine.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Injektionsspritze 1 mLShanghai Mishawa Medical Industry Co., Ltdwww.misawa-medical.co.jp/products.html1 mL
Neutrales Formalin-Fixiermittel 10%Beijing Solaibao Technology Co., LtdNr. G216310%
Physiologische Kochsalzlösung 10 mLChina Otsuka Pharmaceutical Co., Ltdwww.chinaotsuka.com.cn/class/110 mL
Primacain-Adrenalin (Primacain)Französische Firma Bi LanCIP: 34009564697101,7 ml: 68 mg Articainhydrochlorid mit 17 g Adrenalintartrat (als Adrenalin)
Sterile HandschuheYingke Medical Technology Co., Ltdwww.made-in-china.com/showroom/b7976b8c634a372c/
Chirurgische KlingeShanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co., Ltdwww.sh-jinhuan.com
OP-Abdecktücher und GazenGenecome Medical Technology Co., Ltdwww.made-in-china.com/manufacturers/surgical-drapes.html
Chirurgische Instrumente (Skalpellgriff, Pinzette, Schere)Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. Fabrik für chirurgische Instrumentewww.smicc.com/en/index.aspx
Chirurgische NadelnähteShanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co., Ltdwww.sh-jinhuan.com1/2 Bogenmaß, 5&fach; 12, 19mm, 4-0 Naht,
Topischer Jodophor 1%Verifizierter Lieferant - Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., Ltdwww.shopshipshake.com/product-detail/haishi-hainuo-iodophor-disinfection-solution-6566012341551%

Referenzen

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