Hier beschreiben wir eine neue Methode der Rattenfixierung, die Akupunktur und Moxibustion auf dem Rücken von Ratten ermöglicht.
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Methodenartikel
Hier beschreiben wir eine neue Methode der Rattenfixierung, die Akupunktur und Moxibustion auf dem Rücken von Ratten ermöglicht.
Forscher stoßen immer wieder auf das Problem, dass Tiere im Tierversuch im Zusammenhang mit Akupunktur schwer zu kontrollieren sind. Es gibt bereits einige Methoden, um zu verhindern, dass Tiere aus den Behandlungsstellen entkommen. Die Wirkung dieser Fixationsmethoden unterscheidet sich jedoch von der des menschlichen Behandlungszustands. Aus diesem Grund haben wir eine neue Fixierungsmethode entwickelt, um Ratten während der Behandlung liegend, ruhig und wach zu halten.
Die Ausrüstung besteht aus einer porösen Rückhalteplattform aus Kunststoff, einem quadratischen Baumwolltuch und mehreren Rückhaltegurten zur Fixierung von Ratten. Fädeln Sie zunächst die Rückhaltegurte in die Rückhalteplattform ein. Führen Sie jedes Armband durch zwei Löcher in derselben Reihe, wobei Sie zwei Löcher dazwischen lassen. Nachdem Sie den ersten Gurt positioniert haben, führen Sie den anderen Gurt auf die gleiche Weise in die Plattform ein, wobei Sie auf einen vierreihigen Abstand zwischen den beiden Gurten achten. Zweitens, greifen Sie den Schwanz der Ratte und führen Sie ihn in den Kanal, der durch zwei Rückhaltegurte gebildet wird. Decken Sie den Kopf der Ratte mit einem quadratischen Baumwolltuch ab. Drittens: Ziehen Sie den Rückhaltegurt am Hals fest, um den Kopf und die Vordergliedmaßen zu fixieren. Halten Sie dann die Hintergliedmaßen der Ratte fest und ziehen Sie den anderen Gurt fest, um die Taille und die Hintergliedmaßen zu fixieren.
Diese Methode erfordert keine Anästhesie. Das Gerät ist einfach und leicht zu bedienen. Um die Wirksamkeit und Sicherheit zu bewerten, verabreichten wir das Verfahren an 60 Ratten. Alle von ihnen absolvierten die Akupunkturbehandlung ohne Komplikationen. Während 14 Ratten während des Eingriffs kurze Kampfphasen zeigten, wurden keine unerwünschten Wirkungen beobachtet. Die Ergebnisse zeigen, dass die Methode effektiv und sicher in der Anwendung ist.
Sowohl die chirurgische Modellierung als auch die In-vitro-Intervention erfordern geeignete Tierfixationsmethoden. Dies stellt sicher, dass sich die Tiere in der wendigsten und relativ bequemen Position befinden. Wir konzentrieren uns auf die Methode der Tierfixierung für Akupunktureingriffe. Akupunktur ist wirksam bei der Behandlung vieler Krankheiten 1,2. Die Erforschung des Akupunkturmechanismus hat viel Aufmerksamkeit erhalten. Akupunktur und Moxibustion sind derzeit heiße Forschungsthemen im In- und Ausland. Der pathologische Mechanismus der Akupunkturbehandlung muss weiter erforscht werden, und neben klinischen Experimenten ist auch die Unterstützung in der Grundlagenforschung erforderlich 3,4. In der Grundlagenforschung zu Akupunktur und Moxibustion ist die Tierfixierung ein wichtiger technischer Schritt.
Gegenwärtig umfassen die gebräuchlichsten Fixierungsmethoden Bondage, Anästhesie, Schaukeln, hohe Plattform und andere Fixierungsmethoden. Die Vor- und Nachteile dieser Methoden werden im Folgenden skizziert.
Der erste Schritt bei der Durchführung der Anästhesiefixationsmethode besteht darin, die Ratten zu betäuben. Bei dieser Methode laufen die Forscher Gefahr, dass die Ratten sterben könnten. Es ist auch möglich, nach der Narkose direkt und ohne Einschränkung zu operieren5. Bei der Fixierungsmethode der Socken-Kaninchen-Plattform stecken die Forscher den Kopf der Ratte in eine getrimmte Socke, strecken ihre Vordergliedmaßen durch die Löcher und befestigen ihre Beine mit Gummibändern an der Kaninchenplattform. Diese Methode erleichtert die Auswahl des Akupunkturpunkts an den Gliedmaßen. Die Forscher müssen die Socke entsprechend der Akupunkturstelle zuschneiden, aber das Verfahren ist etwas komplex6. Einige Forscher haben eine Moxibustions-Fixierungsvorrichtung entwickelt, die aus drei Teilen besteht: Fixierungssitz, Fixierungsclip und Moxa-Stick-Halter. Dieses Gerät ermöglicht es Forschern, Moxibustion an mehreren Akupunkturpunkten gleichzeitig durchzuführen und dabei eine relativ konstante Temperatur aufrechtzuerhalten. Der feste Zustand dieser Methode unterscheidet sich jedoch deutlich von der klinischen Behandlung des Menschen7. Das Einwickeln der Ratten mit einem Tuch und das Aufhängen mit Klammern kann den Einfluss der Fixierung erheblich verringern. Das aufgehängte Tuch muss jedoch vorher geschnitten werden, um die Akupunkturpunkte freizulegen, was es unpraktisch macht, die Behandlungsstelle8 freizulegen. Einige Forscher verwenden Gurte, Seile und eine kleine Jacke mit einem selbstverriegelnden Velcro-Band, um Ratten auf einer netzartigen Käfigabdeckung zu sichern. Das Gerät bietet niedrige Produktionskosten, eine hohe Praktikabilität und eine einfache Bedienung. Es wird jedoch mehr als eine Person benötigt, um den Fixierungsprozessabzuschließen 9. Einige Forscher konstruieren einen Körperhaltezylinder aus Drahtgeflecht, sichern die Beine der Ratten mit Halteklammern und fixieren ihre Hälse mit einem Haltestock. Diese Methode sorgt für einen festen Rückhalt. Mit dieser Methode können Forscher besser an Ratten operieren, da die Akupunkturpunkte am ganzen Körper freigelegt werden. Das Problem ist, dass der Zylinder möglicherweise nicht mit der Größe der Ratte kompatibel ist. Darüber hinaus übt diese Methode im Vergleich zu anderen Techniken mehr Stress aus, so dass Ratten anfälliger für Erstickung sein können10. Die Methode der Hochplattform-Fixierung macht sich die Höhenangst der Ratten zunutze. Forscher platzieren Ratten auf dem hohen Pedal 50 cm über dem Boden. Die Ratten verharren in einer natürlichen Bauchlage, ohne dass zusätzliche Fixierungen erforderlich sind. Diese Methode ermöglicht es, den Kopf und Rücken von Ratten zu nadeln. Diese Methode simuliert die Behandlungsumgebung authentisch, so dass die experimentellen Ergebnisse einen guten Referenzwert haben. Da Ratten Höhenangst haben, wird ihr psychischer Zustand abnormal, wenn sie in solchen Höhen platziert werden. Dies macht die Methode für die Erforschung psychischer Erkrankungen ungeeignet und könnte die experimentellen Ergebnisse beeinflussen11. Einige Forscher verwenden eine verstellbare Rückhalteplattform und Gurte, um Ratten zu fixieren, wodurch ein großer Behandlungsbereich freigelegt wird. Die Replikation des klinischen Szenarios bleibt jedoch eine Herausforderung12.
Es besteht ein dringender Bedarf, das Problem anzugehen, dass Fixationsmethoden klinische Behandlungsbedingungen nicht genau simulieren können. Wir haben alle Anstrengungen unternommen, um die Bedingungen der klinischen Behandlung beim Menschen zu replizieren. Die in diesem Artikel beschriebene Methode fällt unter die Kategorie der Bondage-Methode. Die bei dieser Methode verwendete Ausrüstung umfasst eine Rückhalteplattform und Rückhaltegurte sowie ein Baumwolltuch zur Unterstützung des Verfahrens. Das Gerät ist relativ einfach zu bedienen. Im Vergleich zu anderen Methoden legt diese Methode die Akupunkturpunkte auf dem Rücken von Ratten besser frei und erhöht die Behandlungseffizienz.
Um die Zuverlässigkeit des Gerätes zu testen, wurden insgesamt 60 Ratten für das Experiment verwendet. Alle 60 Ratten wurden in zwei Gruppen mit jeweils 30 Ratten eingeteilt: die Elektroakupunkturgruppe und die warme Akupunkturgruppe. Die Ratten blieben während des Behandlungsprozesses ruhig und ihre Bewegung hatte nur minimale Auswirkungen auf den Eingriff. In der Elektroakupunktur-Gruppe beendeten 22 Ratten die Behandlung ruhig und ohne Schwierigkeiten. Insgesamt 8 Ratten hatten während der Operation zu kämpfen, und 6 lösten die Nadeln. Insgesamt 24 Ratten in der warmen Akupunkturgruppe blieben während der Behandlung ruhig. Die anderen 6 Ratten zeigten ein Kampfverhalten, aber keine löste die Moxa-Kugeln. Diese Ratten, die Schwierigkeiten hatten, konnten sich auch beruhigen, nachdem sie zugedeckt und getröstet worden waren. Letztendlich schlossen alle Ratten die Behandlung erfolgreich ab.
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Diese Arbeit wurde von der National Natural Science Foundation of China (Nr. 82205287) unterstützt. Die in dieser Studie verwendeten Versuchsprotokolle wurden vor der Durchführung von Experimenten von der Ethikkommission für Tierversuche und -verwendung der Universität für Chinesische Medizin Peking (Nr. BUCM-2024052704-2223) überprüft und genehmigt. Alle nachgewiesenen Verfahren müssen vom Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) genehmigt werden.
Einzelheiten zu den in der Studie verwendeten Geräten sind in der Materialtabelle aufgeführt. Das Protokoll kann in vier Abschnitte unterteilt werden: Vorbereitung des Experiments, Befestigungsprozess, Behandlungsbetrieb und Demontage des Geräts.
1. Vorbereitung des Experiments (Abbildung 1)

Abbildung 1: Für den Betrieb erforderliche Geräte. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
2. Prozess der Befestigung

Abbildung 2: Montage der Rückhalteplattform und des Rückhaltegurtes. Die Rückhalteplattform mit den eingelegten Rückhaltegurten ist in der Abbildung dargestellt. Jedes Band wird über zwei Löcher in der gleichen Reihe im Abstand von zwei Löchern eingeführt, wobei die Gurte vier Reihen voneinander entfernt sind. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 3: Der Fixationsprozess einer Ratte. (A) Halten Sie den Schwanz der Ratte fest. (B) Lass die Ratte nach vorne in den Kanal flüchten. (C) Decken Sie den Kopf der Ratte mit einem Baumwolltuch ab. Drücke seinen Hals und greife nach seinem Schwanz und seinen Hintergliedmaßen. (D,E) Ziehen Sie den Gurt auf dem Rücken fest. (F,G) Ziehen Sie den Riemen an der Taille fest. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Abbildung 4: Akupunkturoperation an einer Ratte. DU20, BL17 und BL23 wurden als Akupunkturpunkte für dieses Akupunkturverfahren ausgewählt. (A) Drehen Sie die Nadel in die Akupunkturpunkte. (B,C) Hier ist die Ratten-Abschlussbehandlung zu sehen. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
3. Elektroakupunktur-Behandlung

Abbildung 5: Elektroakupunktur-Operation an einer Ratte. (A) Stellen Sie den Parameter auf Dauerstrich und stellen Sie die Stromstärke und die Frequenz ein. (B,C) Koppeln Sie BL17 und BL23 auf der gleichen Seite. (D,E) Wickeln Sie den Schwanz mit salzgetränkter Gaze ein und verbinden Sie ihn mit DU20. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
4. Warme Akupunkturbehandlung

Abbildung 6: Warme Akupunkturoperation an einer Ratte. (A) Nehmen Sie ein quadratisches Papier und stechen Sie mit einer Nadel in die Mitte. (B) Führen Sie die Nadeln in die Akupunkturpunkte ein. (C) Legen Sie die Moxa-Kugeln auf die Nadeln. (D,E) Hier ist die Ratten-Abschlussbehandlung zu sehen. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
5. Demontage des Gerätes
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Um die Wirksamkeit der Fixationsmethode zu bewerten, führten wir einen Versuch an insgesamt 60 Ratten durch, die in zwei Gruppen eingeteilt wurden: 30 Ratten in der Elektroakupunkturgruppe und 30 Ratten in der warmen Akupunkturgruppe. Die Behandlungsoperationen umfassten Elektroakupunktur bzw. warme Akupunktur.
Nach dem Einführen der Nadeln in die Akupunkturpunkte führte der Akupunkteur Hebe-, Stoß- und Rotationsmanipulationen an jeder Nadel durch, um Deqi zu ...
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Ratten neigen dazu, dunkle Umgebungen zu bewohnen. Sie fühlen sich geborgen, wenn sie geschützt sind, reagieren gelassen auf Reize, wodurch sie einen geringeren Stresspegel aufweisen. Die hier beschriebene Methode nutzt diese Ratteneigenschaften. Die Vorteile dieser Fixationsmethode lassen sich wie folgt zusammenfassen: (i) Diese Methode kann die Stressreaktion und den Schmerz von Versuchstieren minimieren. Es steht im Einklang mit den 3R-Prinzipien der Tierethik, nämlich Reduktion, Verf...
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Alle Autoren haben keine potenziellen Interessenkonflikte deklariert.
Diese Arbeit wurde von der National Natural Science Foundation of China (Nr. 82205287) unterstützt.
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| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Akupunkturnadeln | Beijing ZhongYan TaiHe Medical Instrument Co., Ltd. | 20222200133 | Die Spezifikationen der Akupunkturnadeln betragen 0,25 mm Durchmesser und 25 mm Länge. |
| Anti-Schneidhandschuhe | Fabrik für Arbeitsschutzprodukte in der Stadt Lanshan im Bezirk Lanshan, Linyi City | H0315103941 | entwickelt, um Forscher während des Experiments vor Rattenbissen zu schützen. |
| Elektroakupunktur-Instrument | Suzhou Medical Appliance Factory Ltd. | 20172200675 | Dieses Gerät wird zur Durchführung von Elektroakupunkturverfahren eingesetzt. |
| Latexhandschuhe in Laborqualität | Zhonghong Pulin Medical Products Co., Ltd. | 268237719221 | Diese Handschuhe stellen die grundlegende Schutzmaßnahme des Versuchs dar. |
| Moxa | Beijing Tongrentang Xing'an Health Technology Co., Ltd. | 152200000000613 | Moxa dient als Material für die Herstellung von Moxa-Kugeln mit einem Durchmesser von 5 mm, die für die anschließende Moxibustionstherapie verwendet werden. |
| Poröse Kunststoff-Rückhalteplattform | Chuzhou Huaxin VinyIIndustry Co., Ltd. | 341124000005877 | Die Rückhalteplattform ist 500 mm lang, 300 mm breit und 5 mm hoch. Die Löcher darauf sind 7 mm lang und 3,2 mm breit. Der Abstand zwischen zwei benachbarten Löchern beträgt 7 mm. Dieses Gerät dient als Plattform zum Fixieren von Ratten. |
| Rückhaltegurte | Zhejiang Litai Plastic Co., Ltd. | 331003000001553 | Jeder Rückhaltegurt misst 300 mm in der Länge und 4,8 mm in der Breite. Die Rückhaltegurte sind gezahnt und verfügen über eine Schnalle an der Spitze, die nach dem Einsetzen arretiert werden kann. |
| Quadratisches Baumwolltuch | MUJI (SHANGHAI) Company Limited | WYLP20241105_1 | Das quadratische Baumwolltuch misst 30 cm und ist 30 cm lang. Es wird verwendet, um den Versuchstieren die Sicht zu versperren. |
| Quadratische Papiere | DELI Group Co., Ltd. | 7752-1114 | Um Verbrühungen bei den Ratten zu verhindern, schneiden die Forscher einige quadratische Papiere mit den Maßen 2 cm und 2 cm zu. |
| Sterile Gaze | Jiangxi Zhonggan Medical Devices Co., Ltd. | 20172140084 | Die sterile Gaze wird aufgetragen, um den Schwanz der Ratte zu umwickeln und so die elektrische Leitfähigkeit während der Elektroakupunkturbehandlung zu gewährleisten. |
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