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Methodenartikel

Nicht-aversive Tierfixierung ermöglicht die Erfassung des optomotorischen Reflexes bei Erdhörnchen

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DOI:

10.3791/68335

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25. Juli 2025

 ,  ,  ,  ,  , 
1Retinal Neurophysiology Section, National Eye Institute, National Institutes of Health, 2Department of Ophthalmology, Faculty of Medicine, University of Murcia and Biomedical Research Institute of Murcia (IMIB-Pascual Parrilla), 3Striatech GmbH

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Das Protokoll beschreibt, wie die optomotorische Reaktion bei 13-zeiligen Zieseln gemessen werden kann, einer zapfendominanten Spezies mit Netzhautmerkmalen, die der menschlichen Makula ähneln. Das Plattformdesign verbessert die Handhabung und reduziert Angstzustände, wodurch die Fähigkeit des Tieres, auf der erhöhten Plattform zu bleiben, verbessert wird, was eine nicht-invasive Beurteilung von Veränderungen der Sehfunktion ermöglicht.

Zusammenfassung

Der optomotorische Reflex (OMR) ermöglicht eine Verhaltensbeurteilung der Kontrastempfindlichkeit und der Sehschärfe eines Tieres. Mäuse oder Ratten werden in der Regel direkt von Hand auf eine kleine kreisförmige Plattform gesetzt; Der Umgang mit solchen Tieren kann jedoch Stress und Ängste auslösen, die bei der Interpretation von Daten zu Störfaktoren führen. Es hat sich gezeigt, dass nicht-aversive Handhabungsmethoden, wie das Aufheben von Mäusen oder Ratten in einem vertrauten Tunnel/Röhre, Angstzustände reduzieren können. Dies ist von besonderem Interesse in Studien, in denen Tiere erhöhten Stress, Überaktivität oder motorische Dysfunktion aufweisen, was zu einer Unfähigkeit führt, auf der Plattform zu bleiben. Ein Team unter der Leitung von Dr. Kiyoharu J. Miyagishima und Dr. Francisco M. Nadal-Nicolás hat die herkömmliche OMR-Plattform neu gestaltet, um ein halbgeschlossenes Containment zu ermöglichen. Damit ist es erstmals möglich, den optomotorischen Reflex beim 13-zeiligen Ziesel zu erfassen, das zu den wenigen Säugetieren gehört, die Farben sehen können. Es hat einen visuellen Streifen mit einer hohen Dichte an Zapfen, ähnlich der menschlichen Makula, und bietet ein attraktives Modell für die Untersuchung von Auswirkungen auf das visuelle System des Zapfens.

Einleitung

Ziesel bieten aufgrund ihrer tagaktiven Lebensweise und ihrer zapfendominierten Netzhaut, die das menschliche Sehen genau nachahmt, ein einzigartiges und wertvolles Modell für die Untersuchung der Sehfunktion1. Dies, gepaart mit den praktischen Vorteilen ihrer Verwendung (geringere Größe, geringere Haltungskosten) im Vergleich zu Primaten, macht sie zu einem idealen Modell für die translationale Erforschung von Netzhautverletzungen, Krankheiten oder okulären Nebenwirkungen von Medikamenten auf Veränderungen des Farbsehens 2,3,4,5,6. Die präklinische Forschung zu Netzhauterkrankungen beruht auf der Fähigkeit, beurteilen zu können, ob ein Tier sehen kann. Der optomotorische Reflex (OMR) bietet eine klinisch relevante Methode zur Beurteilung der Sehfunktion bei Tieren ohne Anästhesie, die eine genaue Messung der Sehschärfe ermöglicht 7,8. Bei diesem Test folgt das Tier mit seinem Blick einem rotierenden Streifenmuster. Die rotierenden Streifen induzieren die Wahrnehmung einer globalen Bewegung in der Umgebung und lösen eine unwillkürliche Kopfbewegung aus - die OMR. Dieser Reflex dient der visuellen Stabilisierung der Umgebung und kann verwendet werden, um zu quantifizieren, wie gut ein Tier sehen kann, indem die Ortsfrequenz oder der Kontrast des Reizes schrittweise angepasst wird. Wenn der Reiz schwieriger wahrzunehmen ist, wird die OMR schließlich nicht ausgelöst, so dass die Sehschärfe oder die Kontrastschwelle bestimmt werden kann. Der Vorteil der OMR ist, dass es sich um einen Reflex handelt. Somit ist keine Schulung erforderlich und eine Kopffixierung oder Operation ist nicht erforderlich. Der Reflex ist bereits bei sehr jungen Tieren (beim Öffnen der Augen)9,10 vorhanden, was es ermöglicht, früh einsetzende Krankheiten zu untersuchen. Da es sich um eine nicht-invasive Operation handelt, können außerdem Längsschnittmessungen durchgeführt werden, die es ermöglichen, das Fortschreiten der Krankheit zu verfolgen.

Die meisten OMR-Tests werden mit benutzerdefinierten oder kommerziellen Systemen durchgeführt, die aus einer erhöhten Plattform bestehen, auf der das Tier platziert wird, umgeben von vier Bildschirmen mit rotierenden schwarzen und weißen Streifenmustern. Die Streifen bewegen sich in eine Richtung (im Uhrzeigersinn oder gegen den Uhrzeigersinn) und erzeugen einen Bewegungsreiz, der eine visuelle Tracking-Reaktion des Tiereshervorruft 10,11,12,13,14,15,16. Über der Testarena ist eine Kamera angebracht, die die visuell evozierten Kopfbewegungen des Tieres als Reaktion auf den rotierenden Reiz erfasst. Diese Kopfbewegungen werden verfolgt und analysiert, um die Fähigkeit des Tieres zu bestimmen, Bewegungen wahrzunehmen und darauf zu reagieren, wodurch seine Sehschärfe beurteilt wird.

Obwohl die OMR routinemäßig bei Mäusen und Ratten eingesetzt wird, war die Messung der optomotorischen Reaktion bei 13-zeiligen Zieseln aufgrund ihrer Hyperaktivität und ihrer Unfähigkeit, selbst bei vorheriger Konditionierung auf erhöhten Plattformen zu bleiben, eine Herausforderung. Um dies zu umgehen, haben wir eine Plattform entwickelt, die eine halbe Eindämmung bietet und so den Transfer der Tiere in die Arena erleichtert. Ziel dieser Methode ist es, die Zeit für die Anpassung der Tiere an die Versuchsumgebung zu verkürzen, die Erfassung von Tieren zu ermöglichen, die unkooperatives Verhalten zeigen oder Schwierigkeiten haben, auf der Plattform zu bleiben, und die Einbeziehung von Tieren in Studien zu verbessern. Wir haben auch ein Protokoll zur Messung der Sehschärfe bei Eichhörnchen mit einer experimentell definierten Kontrasteinstellung definiert und die Kameraeinstellungen angepasst, um die Bildergebnisse zu verbessern und eine automatisierte Analyse und Verfolgung zu ermöglichen.

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Protokoll

Die Eingriffe mit Tieren wurden in Übereinstimmung mit den Gesetzen der Vereinigten Staaten und den Vorschriften des Landwirtschaftsministeriums durchgeführt. Alle Tierversuche wurden nach Protokollen durchgeführt, die vom Tier- und Pflege- und Verwendungsausschuss des National Eye Institute an den National Institutes of Health genehmigt wurden. Männliche und weibliche 13-Linien-Ziesel (im Alter von 6-8 Monaten), die in dieser Studie verwendet wurden, wurden von der Oshkosh Squirrel Colony der University of Wisconsin gekauft. Die in dieser Studie verwendeten Mäuse (rd10: 1 Monat, CX3CR1GFP/+: 6,5 Monate) wurden in unserer Tierhaltung gezüchtet. Die Tiere und ihre Käfige wurden nach dem Zufallsprinzip ausgewählt und in Versuchsgruppen eingeteilt.

1. Vorbereitung der Prototyp-Plattform und des modifizierten Handhabungstunnels

HINWEIS: Runde, flache Plattformen werden üblicherweise in Systemen eingesetzt, die zur Messung der optomotorischen Reaktion13 ausgelegt sind. Hyperaktive Nagetiermodelle, wie z. B. Eichhörnchen, haben jedoch oft Schwierigkeiten, die Stabilität auf diesen Plattformen aufrechtzuerhalten. Dieses Design bietet einen halbgeschlossenen Raum, der den Tieren hilft, sich schnell zu gewöhnen und angstähnliche Verhaltensweisen zu reduzieren. Diese Verbesserung verbessert die Konzentrationsfähigkeit des Tieres und minimiert Ungleichgewichte oder Stürze während der Aufnahmen.

  1. Entwerfen Sie in einer CAD-Zeichnungssoftware (z. B. OpenSCAD oder FreeCAD) die Plattform (grau) und das Gehäuse (rot), wie in Abbildung 1 gezeigt.
    1. Stellen Sie sicher, dass die Schlüsselabmessungen für die Eichhörnchenplattform beibehalten werden: Länge und Breite (L x B): 129 mm x 81 mm, Dicke: 7 mm und Höhe der Wand, die sich um den Umfang erstreckt: 8 mm. Verwenden Sie die bereitgestellte kostenlose CAD-Standarddokumentdatei für die Prototyp-Plattform (Eichhörnchen), die in dieser Proof-of-Concept-Studie verwendet wurde (Supplementary Coding File 1).
    2. Stellen Sie sicher, dass die Schlüsselabmessungen für das abnehmbare obere Gehäuse (von oben nach unten) wie die Länge (119,5 cm) und Breite (76,2 cm), die Höhe der Seiten (50,8 mm) und die Dicke des Teils (3 mm) beibehalten werden. Verwenden Sie die bereitgestellte kostenlose CAD-Standarddokumentdatei, um das in dieser Proof-of-Concept-Studie verwendete abnehmbare obere Gehäuse (Eichhörnchen) zu replizieren (Supplementary Coding File 2).
  2. Passen Sie den Durchmesser des Durchgangslochs in der Basis der Plattform nach Bedarf an den Sockel an, der zum Anheben der Plattform verwendet wird. Der abgebildete Durchmesser beträgt 40 mm.
  3. Drucken Sie die Plattform mit einem weißen, undurchsichtigen Filament. Dies bietet einen maximalen Kontrast für die Kamera, so dass die Tracking-Software die Kontur des Tieres auf der Plattform korrekt erkennen kann.
  4. Bedrucken Sie das abnehmbare obere Gehäuse mit undurchsichtigem dunklem Filament (z. B. rot). Dies gibt den Nagetieren ein Gefühl des Schutzes, was es ihnen erleichtert, sie in den Tunnel zu führen, bevor sie angehoben und in die Arena gebracht werden.
  5. Lassen Sie das extrudierte klare Vierkantrohr aus Acryl von einem Maschinisten mit einer Tischkreissäge so zuschneiden, dass das lange Ende ~ 101,6 mm lang ist. Achten Sie darauf, eine Schutzbrille und einen Schiebestock zu verwenden, um das Acryl durch die Klinge zu führen, während Sie Ihre Hände vor möglichen Verletzungen schützen.
  6. Entfernen Sie mit der Tischkreissäge oder einem handgeführten Rotationswerkzeug, das mit einer Schleifscheibe ausgestattet ist, eine der langen rechteckigen Flächen. Dadurch entsteht ein offenes Oberteil, durch das die darüber montierte Kamera einen ungehinderten Blick auf die Position und die Kopfbewegungen des Tieres hat.
  7. Reinigen Sie alle Kanten mit einer Handfeile oder Schleifpapier. Montieren Sie den modifizierten Handhabungstunnel mit dem extrudierten durchsichtigen Vierkantrohr aus Acryl, das mit dem 3D-gedruckten, abnehmbaren oberen Gehäuse auf Länge geschnitten wurde, indem Sie das Gehäuse auf die offene Fläche legen.

2. Einrichten der OMR-Arena

  1. Desinfizieren Sie die Plattform und die Vierkantrohrgehäusebaugruppe mit einem Reinigungs-/Desinfektionsmittel vor und zwischen den Tieren, um unerwünschte Geruchsreize zu entfernen.
    HINWEIS: Obwohl Lederhandschuhe für den Umgang mit den Tieren verwendet werden und in direkten Kontakt mit ihnen kommen, werden sie während der Aufnahmen nicht getragen und verursachen keine dauerhaften oder beobachtbaren Störeffekte.
  2. Reißen Sie ein kleines Stück Papiertuch mit den Maßen ca. 50 mm x 50 mm ab und falten Sie es, um die Oberseite des Stelzlagers zu bedecken. Legen Sie die 3D-gedruckte Plattform mit dem Stück Papiertuch auf den Sockel (14 Zoll hoch).
    HINWEIS: Das Papier passt die Presspassung der Plattform an, verhindert unbeabsichtigte Bewegungen, bietet einen gleichmäßigen weißen Hintergrund für die Bildgebung (wenn die Oberfläche des Sockels nicht weiß ist) und fungiert als absorbierende Schicht für den Fall, dass das Tier während der Aufnahme uriniert, um zu verhindern, dass die Plattform rutschig wird.
  3. Führen Sie das Tier mit Arbeitshandschuhen aus Leder vorsichtig in die Vierkantrohrgehege.
  4. Bringen Sie das Tier in die Arena, indem Sie die Gehegebaugruppe auf die Plattform stellen (Abbildung 1J).
  5. Nehmen Sie das abnehmbare obere Gehäuse vorsichtig ab und lassen Sie das Tier in dem extrudierten, durchsichtigen Vierkantrohr aus Acryl auf der Plattform. Schließen Sie die Tür zum OMR-System

3. Einrichten der OMR-Softwareparameter

HINWEIS: Das abgebildete OMR-System verwendet eine kompakte Industriekamera mit einem IR-empfindlichen 1/3"-CMOS-Sensor mit einem Global Shutter bei 25 Bildern pro Sekunde (fps). Die Kamera ist mit einem F1,6-Weitwinkelobjektiv ausgestattet, das eine vollständige Draufsicht auf die Arena ermöglicht. Vorläufige Sehschärfetests, die an Eichhörnchen mit der Standard-Kontrasteinstellung von 100 % durchgeführt wurden, zeigten, dass die Sehschärfe der Eichhörnchen die Auflösungsgrenzen der Hardware überschritt. Die im Setup verwendeten 23,8" Full-HD-In-Plane-Switching-Bildschirme haben eine Auflösung von nur 1920 Pixeln in der Breite, und die Software ist daher mit einer maximalen Ortsfrequenz von 2 cyc/° fest codiert. Zum Vergleich: Die Sehschärfe von C57Bl/6-Mäusen beträgt etwa 0,3-0,5 cyc/°. Bei 2 cyc/° ist jeder Streifen durchschnittlich 5,3 Pixel breit. Bei einer Rotationsgeschwindigkeit von 12°/s und einer Bildrate von 60 Bildern pro Sekunde verschiebt sich das Muster um 0,2° pro Bild, was bei gleichbleibender Pixelgeschwindigkeit 4,2 Pixeln pro Bild entspricht. Bei Ortsfrequenzen nahe 2 cyc/° nähert sich das Streifenmuster der Auflösungsgrenze, an der Aliasing auftreten kann, wodurch das Muster so aussieht, als würde es sich rückwärts bewegen. Um dieses Artefakt zu verhindern, ist die Software so hartcodiert, dass die Ortsfrequenz auf 2 cyc/° begrenzt wird.

Daher haben wir für Eichhörnchen ein Protokoll entwickelt, bei dem wir den Sehschärfetest durchführen, aber mit einem viel geringeren Kontrast. Wir wählten eine Kontrasteinstellung (12,78%), bei der die Eichhörnchen das Streifenmuster bei 2 Zyklen/° nicht sehen konnten.

  1. Stellen Sie im Live-Video-Panel sicher, dass sich das Tier gut an die neue Umgebung anpasst und anfängt, sich weniger zu bewegen und sich zu beruhigen.
    1. Bei 2 cyc/° ist jeder Streifen durchschnittlich 5,3 Pixel breit. Stellen Sie die Rotationsgeschwindigkeit auf 12°/s und eine Bildrate von 60 Bildern pro Sekunde ein. Das Muster verschiebt sich um 0,2° pro Frame, was bei gleichbleibender Pixelgeschwindigkeit 4,2 Pixeln pro Frame entspricht. Stellen Sie die Ortsfrequenzen auf einen Wert von 2 cyc/° ein, sodass sich das Streifenmuster der Auflösungsgrenze nähert, an der Aliasing auftreten kann, wodurch das Muster so aussieht, als würde es sich rückwärts bewegen. Um dieses Artefakt zu vermeiden, codieren Sie die Software hart, um die Ortsfrequenz auf 2 cyc/° zu begrenzen.
      HINWEIS: Für Eichhörnchen haben wir ein Protokoll entwickelt, bei dem wir den Sehschärfetest durchführen, jedoch mit einem viel geringeren Kontrast. Wir wählten eine Kontrasteinstellung (12,78%), bei der die Eichhörnchen das Streifenmuster bei 2 Zyklen/° nicht erkennen konnten.
  2. Laden Sie die ergänzende Codierungsdatei herunter 3. Öffnen Sie die OptoDrum-Software.
  3. Klicken Sie auf der Registerkarte Einstellungen auf Einstellungen importieren. Laden Sie die ergänzende Codierungsdatei 3.
  4. Legen Sie auf der Registerkarte Einstellungen den Schwellenwert für den Hintergrundversatz auf 17, die minimale Tiergröße [px] auf 30 und die maximale Schwanzbreite [% der Größe] auf 1 fest.
  5. Lassen Sie in den Kameraeinstellungen die Option "Video umkehren" und "Manuelle Kamerasteuerung" deaktiviert und IR-Licht aus.
  6. Erweitern Sie die Position und Größe des für die Verfolgung interessierenden Bereichs, um das Eichhörnchen aufzunehmen, wenn es sich außerhalb der Öffnung des Rohrs lehnt. Die vorgeschlagenen Werte sind: Position: X: 359, Y: 237, Größe: X: 570, Y: 455. Verlängern Sie den ROI nicht über den Bildschirm "Stimuli", da dies zu Fehlalarmen führen kann.
  7. Wählen Sie im oberen Bereich die Option Sitzungskonfiguration aus (Abbildung 2A).
    1. Legen Sie für die Treppe die geschätzte räumliche Sehschärfe wie folgt fest. Die erwartete Sehschärfe auf 1.800 cyc/° (648 Zyklen) einstellen; Stellen Sie die optimale Stimulusauflösung auf 0,5 cyc/° (180 Zyklen) ein. Stellen Sie die Messauflösung auf 0,100 cyc/° (36 Zyklen) ein.
    2. Legen Sie für die Treppe die Anzahl der erforderlichen Bestätigungen wie folgt fest. Für fehlgeschlagene Versuche auf 3 festgelegt; Bereit für erfolgreiche Versuche bis 2.
      HINWEIS: Die Anzahl der erfolgreichen Studien kann erhöht werden, um das Auftreten falsch positiver Bestätigungen weiter zu reduzieren. Mit dem Einsatz dieser Plattform und einem modifizierten Handling-Tunnel bleibt die Fehlerquote jedoch akzeptabel niedrig. Dies liegt vor allem an der relativen Stille der Eichhörnchen und der Seltenheit von rotierenden Kopfbewegungen, abgesehen von denen, die durch visuell evozierte Reize hervorgerufen werden.
  8. Legen Sie auf der Registerkarte Treppe (Abbildung 2B) das Antialiasing auf width auf 3 px fest, und lassen Sie die Option sinusförmig deaktiviert.
  9. Für die Testkriterien sperren Sie den Kontrast auf 12,78 % und die Drehzahl auf 12 °/s.
    HINWEIS: Bei der Kontrasteinstellung von 12,78 % ist die räumliche Sehschärfe der Eichhörnchen auf etwa 1,5-1,8 cyc/° begrenzt. Diese Konfiguration überschreitet nicht mehr die maximalen Hardwareeinstellungen und ermöglicht die Beurteilung der räumlichen Sehschärfe als Reaktion auf Krankheiten oder Verletzungen.
  10. Sobald zwei der drei Parameter gesperrt sind, wird die Option Parameter automatisch festlegen aktiv (nicht mehr ausgegraut). Aktivieren Sie das Kontrollkästchen neben Automatisches Festlegen der Parameter.
  11. Legen Sie die Drehrichtung fest, je nachdem, ob eine Sehbehinderung in einem oder beiden Augen zu erwarten ist. Beachten Sie, dass für jedes Auge nur eine Bewegung in temporal-nasaler Richtung die Verfolgung auslöst. Beurteilen Sie daher die Verletzung des linken Auges mit Hilfe der Stimulation im Uhrzeigersinn (CW), da von einer Stimulation gegen den Uhrzeigersinn (CCW) zu erwarten ist, dass sie normale Reaktionen hervorruft. Bei Degeneration oder Verletzung, die in beiden Augen zu erwarten ist, kann eine Drehung des Stimulus in beide Richtungen verwendet werden.
  12. Klicken Sie auf Versuch starten , um mit der Präsentation des Stimulus zu beginnen. Die Kamera oben beginnt mit der Aufzeichnung und Verfolgung der Kopfbewegungen der Tiere. Während der Stimulus präsentiert wird, klicken Sie auf die Registerkarte Analyse , um die Parameter Winkelgeschwindigkeiten (Kopfdrehung), Spurqualität und Score in Echtzeit anzuzeigen. Am Ende jeder Stimuluspräsentation entscheidet die Software automatisch, ob sie zum nächsten Cyc/° (gekennzeichnet durch das grüne Häkchen) vorrückt, den Versuch wiederholt oder Cyc/° reduziert (gekennzeichnet durch das rote X).
  13. Wenn die Tracking-Software während der Aufnahme die Markierungen für die Nase (rot) und das Heck (grün) falsch umdreht, drücken Sie die Strg-Taste auf der Tastatur, um die manuelle Überschreibung zur Korrektur der Kopf-Heck-Ausrichtung zuzulassen.
  14. Wenn das Tier von der Plattform fällt, pausieren Sie den Versuch, indem Sie auf Auswertung pausieren drücken oder auf die Leertaste klicken. Entfernen Sie den Handhabungstunnel von der Plattform und verwenden Sie ihn mit dem Deckel für eine sichere Handhabung des Tieres, um es wieder auf die Plattform zu setzen. Sobald das Tier bereit ist, klicken Sie auf Bewertung fortsetzen , um den Versuch fortzusetzen.
  15. Wenn alle Versuche abgeschlossen sind, klicken Sie auf die Registerkarte Zusammenfassung , um die erfolgreichen Versuche in Grün und die erfolglosen Versuche in Rot anzuzeigen. Der grün eingekreiste Versuch zeigt die Sehschärfeschwelle für das Eichhörnchen mit einem Kontrast von 12,78 % an. Bringen Sie das Tier vorsichtig in seinen Heimatkäfig zurück.

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Ergebnisse

OMR gilt als erfolgreich, sobald die Software die visuelle Schwelle identifiziert, die durch die Leistung des Tieres in Versuchen zur räumlichen Frequenzunterscheidung bestimmt wird. Konkret wird der Schwellenwert wie folgt definiert: zwei erfolgreiche Versuche bei einer gegebenen Ortsfrequenz (gemessen in cyc/°), gefolgt von drei fehlgeschlagenen Versuchen bei der nächsthöheren Ortsfrequenz. Die OMR wurde an 13-linigen Zieseln (im Alter von 6-8 Monaten) unter Verwendung der runden flachen Standardplattform (

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Diskussion

Kritische Schritte

Erleichterung des Tunneleintritts - Ein wichtiger Punkt, den es zu beachten gilt, ist, dass die Eichhörnchen die 3D-gedruckte Gehegebaugruppe benötigen, um als temporärer Deckel für den rechteckigen Acryltunnel zu dienen. Ohne sie werden sie nicht ohne weiteres eintreten. In unserer Anlage werden die 13-fach gefütterten Ziesel regelmäßig mit einem roten rattengroßen Zylinder (Länge: 15,24 cm, Durchmesser: 7,62 cm) untergebra...

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Offenlegungen

Kiyoharu Miyagishima, Francisco Nadal-Nicolás, John Ball und Wei Li erklären, dass sie keine konkurrierenden finanziellen Interessen haben. Thomas Münch ist Inhaber und Geschäftsführer für Forschung und Entwicklung bei der Striatech GmbH. Boris Benkner ist Gründer und Geschäftsführer der Striatech GmbH.

Danksagungen

Diese Forschung wurde [teilweise] durch das Intramural Research Program des NIH, National Eye Institute, unterstützt. Diese Arbeit wurde auch vom Büro des stellvertretenden Verteidigungsministers für Gesundheitsangelegenheiten und der Defense Health Agency J9, Direktion für Forschung und Entwicklung, durch das Vision Research Program unter der Auszeichnung Nr. (CDMRPL-18-0-VR180205). Meinungen, Interpretationen, Schlussfolgerungen und Empfehlungen sind die des Autors und werden nicht unbedingt vom Verteidigungsministerium unterstützt. Die Autoren danken Dr. Wenxin Ma für die Bereitstellungder rd 10 und CX3CR1GFP/+ Mäuse, Dr. Haohua Qian (Visual Function Core, NEI, NIH) für die aufschlussreiche Diskussion und technische Unterstützung mit dem OMR, der NIMH/NINDS/NICHD-Maschinenwerkstatt für die Hilfe bei der Komponentenherstellung und Charles King (NIH Library) für die Unterstützung beim 3D-Druck.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
12 V max. Lithium-Ionen-Akku-RotationswerkzeugsatzDremel 8220F0138220JAZum Schneiden und Polieren des Acryl-Vierkantrohrs.
https://www.dremel.com/us/en/p/8220-1-28-f0138220aa
6-0 BESCHICHTETES VICRYL (Polyglactin 910) NahtEthikonJ670GZum Vernähen des Augenlids.
https://www.ethicon.com/na/epc/code/j670g?lang=en-default
Klares farbloses Acryl-Vierkantrohr (2" x 12")Zentrum für KanalkunststoffeRT-300161Durchsichtiger rechteckiger Tunnel (für Maus).
https://www.canalplastic.com/products/clear-colorless-acrylic-square-tube
Klares farbloses Acryl-Vierkantrohr (3" x 12")Zentrum für KanalkunststoffeRT-300168Klarer rechteckiger Tunnel (für Eichhörnchen).
https://www.canalplastic.com/products/clear-colorless-acrylic-square-tube
DREMEL EZ SpeedClic: Kunststoff-TrennscheibenDremelNr. SC476Zum Schneiden des Acryl-Vierkantrohrs
F270 3D-DruckerStratasysUm 3D-Modelle der Plattformen in technischer Qualität zu drucken.
https://support.stratasys.com/en/printers/fdm-legacy/uprint
Fluriso (Isofluran)VetOne 502017Allgemeinanästhesie. Flüssigkeit zur Inhalation.
http://vetone.net/Default/GetFile?id=7dda0c60-45fa-e711-bf2e-0024e8785118
FreeCAD 1.0 Open-Source-parametrischer 3D-Modellierer
Igor Pro Software Version 6.3.7.2WaveMetrics, IncZum Zeichnen der Diagramme. https://www.wavemetrics.com/
Low-Profile-Anästhesiemasken für herkömmliche Vaporizer
  für SomnoFlo. Extra Large (Tiere über 300 g)		Kent Scientific CorporationSOMNO-0804Zur Vollnarkose.
https://www.kentscientific.com/products/low-profile-anesthesia-masks-for-somnosuite/
MakerBot Print für Windows Version 4.10.1.2056MakerBot Industrie, LLCSoftware zum Ausrichten der Teile für den Druck
MakerBot Replicator Desktop-3D-Drucker (5. Generation)MakerBot Industrie, LLCMP05825Für den 3D-Druck von Prototyp-Versionen der Plattformen.
https://www.rnd-tech.com/product/makerbot-replicator-desktop-3d-printer-5th-gen/
Microsoft ExcelMicrosoftTabellenkalkulationssoftware zur Analyse der Daten. microsoft.com/en-us/microsoft-365/excel
Mehrzweck-Arbeitshandschuhe aus LederSteiner BranchenSPC02Um mit Eichhörnchen umzugehen.
https://www.steinerindustries.com/leather-palm/product/steiner-spc02-leather-palm-work-glove
OptoDrum PlusRIEFE. TECHKommerzielles Gerät zur Messung des optomotorischen Reflexes (Sehschärfe und Kontrastempfindlichkeit) https://stria.tech/products/optodrum/ 
OptoDrum Software Version 1.7.3RIEFE. TECHSoftware zur Durchführung automatisierter Messungen des optomotorischen Reflexes.
Peroxigard Gebrauchsfertig (Reinigungs-/Desinfektionsmittel) PeroxigardPRTU242101Zur Reinigung/Desinfektion der Plattform und des Acryl-Vierkantrohrs zwischen den Experimenten.
https://peroxigard.com/product-information/rtu/
Pureline M6000 Anästhesiegerät
mit O2-Konzentrator		Penn Veterinärversorgung, Inc.SUPM6000Für die Tieranästhesie.
https://www.pennvet.com/customer/portal/catalog/home?urile=wcm:path%3APennVet+Catalog/Product+Catalog/SUPM6000/Pureline+M6000+Anesthesia+Mach+w_O2+Conc
uPrint SE Plus 3D-DruckerStratasysUm 3D-Modelle der Plattformen in technischer Qualität zu drucken.
https://www.makerbot.com/makerbot-print/
Weißes, undurchsichtiges MakerBot PLA Filament,
Große Spule für Replicator+ (0,9kg, 2lb)		MakerBot Industrie, LLCMP05780Filament zum 3D-Druck der Plattformen.
https://store.ultimaker.com/3d-printer-materials/replicator-series-materials/makerbot-pla-material-large-spool-for-replicator
Pharmakologische Behandlung
Neomycin- und Polymyxin-B-Sulfate
und Bacitracin-Zink-Augensalbe, USP		Bausch & LombRX-0069Dreifaches ophthalmisches Antibiotikum zur Vorbeugung von Augeninfektionen
Proparacainhydrochlorid 0,5%Akorn17478-263-12Lokalanästhetikum zur ophthalmologischen Instillation

Referenzen

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