Etablierung und Evaluierung eines Candida albicans-induzierten Extrakt-induzierten Mausmodells der Kawasaki-Krankheit-assoziierten Koronararteriitis

Jingjing Dai; Ying Zheng; Wenguang He; Yuanyuan Zhang; Wubi Zhou; Junwen Cai; Xiang Wang

doi:10.3791/69041

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Methodenartikel

Etablierung und Evaluierung eines Candida albicans-induzierten Extrakt-induzierten Mausmodells der Kawasaki-Krankheit-assoziierten Koronararteriitis

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DOI:

10.3791/69041

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7. November 2025

Jingjing Dai¹ , Ying Zheng² , Wenguang He³ , Yuanyuan Zhang¹ , Wubi Zhou³ , Junwen Cai¹ , Xiang Wang⁴^,⁵

¹Department of Medical Laboratory, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University, ²Department of Anesthesiology, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University, ³Department of Pathology, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University, ⁴4Department of Pediatrics, Huai'an First People's Hospital, Huai'an Clinical College of Xuzhou Medical University, ⁵Department of Pediatrics, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University

Korrespondierende Autoren: Wubi Zhou <hayyzhouwubi@njmu.edu.cn)>, Junwen Cai <2597187901@qq.com>, Xiang Wang <hayywangx@njmu.edu.cn>

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Das CAWS-induzierte Mausmodell simuliert effektiv das Fortschreiten der Kawasaki-Krankheit von einer akuten Entzündung zu einer chronischen Fibrose, zeigt wichtige pathologische und immunpathologische Merkmale auf und kann die Entwicklung gezielter therapeutischer Strategien für die Kawasaki-Krankheit erleichtern.

Zusammenfassung

Die Kawasaki-Krankheit (KD) ist eine systemische Vaskulitis, die hauptsächlich Kinder betrifft, wobei die Läsionen der Koronararterien die schwerwiegendste Komplikation darstellen. In dieser Studie wurde ein optimiertes Maus-KD-Modell unter Verwendung des wasserlöslichen Extrakts von Candida albicans (CAWS) etabliert. Myokardentzündungen und damit verbundene pathologische Veränderungen wurden mittels HE-Färbung und Masson-Trichrom-Färbung bewertet. Die Immunfluoreszenztechnik detektierte die Infiltration von Immunzellen in Herzgewebe. Die Expression und Lokalisation des VDAC1-Proteins im Myokardgewebe wurde immunhistochemisch nachgewiesen. In vitro wurde ein phagozytisches Modell durch Co-Kultivierung von RAW264.7-Makrophagen mit Candida albicans-Sporen etabliert, und die Bildung und Funktion von Autophagolysosomen wurde mittels LC3-Immunfluoreszenzfärbung und einer Lyso-Tracker-Red-Sonde untersucht. Durch Dosis-Screening wurde festgestellt, dass 8 mg die optimale Modellierungsdosis für die Induktion einer Koronararterienentzündung war, mit einer moderaten Mortalitätsrate bei dieser Dosis. Die HE-Färbung zeigte, dass die CAWS-Injektion stabil Koronararterienläsionen induzierte, die mit den Merkmalen der menschlichen Kawasaki-Krankheit bei Mäusen übereinstimmten. Die Masson-Färbung bestätigte, dass es in der CAWS-Gruppe von Mäusen eine signifikante Ablagerung von Kollagenfasern um die Koronararterien und die Aorta gab, die eng mit dem Entzündungsbereich übereinstimmte, und es wurde ein statistisch signifikanter Unterschied zur Kontrollgruppe nach 14 Tagen beobachtet (p < 0,001). Die Immunfluoreszenz zeigte, dass am 14. Tag der Modellierung die Infiltration mehrerer Immunzellen in das Herzgewebe der CAWS-Gruppe signifikant zugenommen hatte (p < 0,001). Die immunhistochemischen Ergebnisse zeigten, dass am 28. Tag der Modellierung die Expression des VDAC1-Proteins im Myokardgewebe der CAWS-Gruppe signifikant hochreguliert war (p < 0,001). In-vitro-Experimente haben gezeigt, dass bei Makrophagen, die mit Candida albicans-Sporen infiziert sind, die Bildung von Autophagolysosomen im Frühstadium zunimmt, während der Autophagenfluss im späteren Stadium blockiert wird, was auf eine Funktionsstörung hindeutet.

Einleitung

Die Kawasaki-Krankheit (KD), eine Form des mukokutanen Lymphknotensyndroms, ist eine Autoimmunerkrankung, die bei Kindern unter 5 Jahren auftritt und von einer fieberhaften Vaskulitis begleitet wird ^1,2,3. Studien deuten darauf hin, dass unbehandelte oder Behandlungsverläufe, die länger als 10 Tage bei schwerer KD verlaufen, anfällig für schwerwiegende kardiovaskuläre Komplikationen sind, vor allem einschließlich Koronarangorysmen und Koronararterienstenose ^4,5. Die Ruptur von koronar....