Diese Studie wurde vom Ethikkomitee für klinische Forschung der Universität Ordu genehmigt (Genehmigungsnummer: 11.09.2017–138). Die Studie wurde gemäß den relevanten institutionellen und nationalen ethischen Leitlinien durchgeführt, einschließlich der Erklärung von Helsinki. Von allen in der Studie eingeschlossenen Teilnehmer wurde eine schriftliche informierte Zustimmung eingeholt. Die eingeholfene Zustimmung umfasst ausdrücklich die Durchführung von Hausbesichtigungen und das Entnehmen von Hausstaubproben aus Wohnungen.
1. Studiendesign
Dies ist eine querschnittsbezogene, beschreibende Studie zur Verbreitung von Hausstaubmilben, die in der Provinz Ordu, Türkei, durchgeführt wurde. Haushaltsstaubproben wurden von bestimmten Innenflächen entnommen, auf denen üblicherweise eine Milbenansammlung erwartet wird. Die Probenahme erfolgte aus Matratzen, Bettzeugmaterialien (Kissen und Quilts), Teppichen und gepolsterten Möbeln in Schlafzimmern und Wohnzimmern. Der Staub wurde mit einem tragbaren Staubsauger gesammelt, und Proben von verschiedenen Orten im selben Haushalt wurden zusammengelegt, um eine zusammengesetzte Haushaltsstaubprobe zu bilden.
2. Studienpopulation und klinische Kohortendefinition
Die Studienpopulation besteht aus Personen, die wegen Asthma und/oder Allergie-Beschwerden die Ambulanz für Hals-Nasen-Ohren- und Innere Medizin am Fakultät für Medizin der Fakultät für Medizin und Forschung der Universität Ordu besucht haben. Die Einschlusskriterien für die Teilnehmer waren, dass sie mindestens 18 Jahre alt waren, der Entnahme von Staubproben aus ihrer Wohnumgebung zustimmten und dem Fragebogen zustimmten. Personen, die einem Hausbesuch nicht zugestimmt haben, keine schriftliche Zustimmung gegeben haben oder für die nicht genügend Hausstaubproben erhalten werden konnten, wurden von der Studie ausgeschlossen. Die klinischen Diagnosen wurden anhand der Selbstberichte der Patienten und der Gründe für Ambulanzbesuche bewertet; Es wurden keine klinische Verifizierung oder diagnostische Tests durchgeführt. Jeder Patient wurde einem Haushalt zugeordnet, und die Analysen wurden auf Haushaltsebene durchgeführt. Die Provinz Ordu liegt in der östlichen Schwarzmeerregion der Türkei und zeichnet sich durch ein feuchtes, gemäßigtes Klima mit ganzjährig hoher Luftfeuchtigkeit aus, Bedingungen die das Überleben und die Verbreitung von Hausstaubmilben begünstigen können.
3. Stichprobeneinheit und Stichprobenmethode
Die primäre Stichprobeneinheit für diese Studie war der Haushalt. Mehrere Unterstaubproben wurden von verschiedenen Innenräumen in jedem Haushalt entnommen, mit besonderem Fokus auf Schlafzimmer und Wohnbereiche. Obwohl diese Teilproben separat entnommen wurden, wurden sie im Labor zusammengefasst und als eine einzige Haushaltsstaubprobe analysiert, um die gesamte Milbenexposition im Innenraum darzustellen. Zur Abschätzung der Milbendichte wurde etwa 1 g Staub aus jeder zusammengesetzten Haushaltsprobe mit der Milchsäure-Ausfällungsmethode verarbeitet. Alle in den vorbereiteten mikroskopischen Objektträgern aus dieser Staubprobe beobachteten Milben wurden gezählt. Die Gesamtzahl der entdeckten Milben wurde dann als Anzahl der Milben pro Gramm Hausstaub angegeben.
Jeder Haushalt wurde nur einmal beprobt, und es wurde keine wiederholte Stichprobe durchgeführt. Haushaltsstaubproben wurden mit Einwegstaubbeuteln entnommen, die jedem Probebereich zugeordnet waren, sowie einem tragbaren Staubsauger mit einer Saugkraft von 1200 W. Die Probenahme erfolgte mit einer standardisierten Rate von etwa 2 Min/m2 , um Konsistenz und Reproduzierbarkeit in allen Haushalten sicherzustellen.
4. Laborverfahren und Milbenerkennung
Nachdem die Proben ins Labor gebracht wurden, wurden sie gesiebt, um grobe Partikel zu entfernen. Die Proben wurden mit der Milchsäure-Präzipitationsmethode untersucht. Die Milchsäure-Ausfällungsmethode wurde verwendet, um Staubproben durch Auflösen organischer Ablagerungen zu klären, was die Trennung und Sichtbarkeit der Milben erleichterte und eine zuverlässige mikroskopische Detektion sowie morphologische Identifikation ermöglichte. Ein Gramm Hausstaub wurde 5 ml 90 % Milchsäure in Reagenzgläsern zugesetzt. Die Röhrchen wurden vorsichtig vermischt und 1 Stunde lang inkubiert. Nach der Inkubation wurden Proben, die sowohl von der Oberfläche als auch vom Boden der Flüssigkeit entnommen wurden, zwischen einem Objektträger und einem Deckschicht montiert und unter einem Lichtmikroskop mit 100×, 200× und 400× Vergrößerungen15 untersucht. Die Artenidentifikation erfolgte anschließend an Staubproben, in denen Milben nachgewiesen wurden.
Proben, in denen Milben nachgewiesen wurden, wurden als "Milbenpositiv" definiert. Das Vorhandensein von mindestens einer Milbe in einem Entwicklungsstadium (Larve, Nymphe oder erwachsenes Tier) in einer Behausung wurde als ausreichend angesehen, um die Behausung als milbenpositiv zu gelten. Zur Artbestimmung in positiven Proben wurden unter einem Stereomikroskop sichtbare Milben nach der Filtration vom Supernatanten auf das Filterpapier mit einer feinspitzigen Insulinspritzennadel entnommen und in Hoyers Medium montiert. Präparierte Exemplare wurden unter einem Lichtmikroskop zur morphologischen Identifikation untersucht. Statistische Analysen wurden mit statistischer Analysesoftware durchgeführt: 16,17,18,19,20. Exemplare wurden je nach Entwicklungsstadium und Verfügbarkeit diagnostischer Merkmale auf Arten-, Gattungs- oder höher taxonomische Ebenen identifiziert. Dermatophagoides-Arten umfassen Larven-, Protonymphen- und Deutonymphenstadien, die auf Artebene nicht zuverlässig identifiziert werden konnten. Oribatida stellt auf Ordnungsebene identifizierte Milben dar. Unidentifizierte Larve und Nymphe beziehen sich auf unreife Exemplare, unidentifizierte Imago auf adulte Exemplare, die aufgrund unzureichender oder beschädigter morphologischer Eigenschaften nicht taxonomisch klassifiziert werden konnten. Die Gesamtzahl stellt die kumulative Anzahl aller Milbenindividuen dar, die über positive Proben hinweg nachgewiesen wurden.
5. Vermessungsanwendung und Variablendefinitionen
Eine Umfrage mit Fragen zu demografischen Merkmalen, Wohnstruktur, Umweltfaktoren und Allergiebeschwerden wurde bei den Teilnehmern durchgeführt. Die Daten wurden anhand der Aussagen der Teilnehmer bewertet und nicht klinisch überprüft.
6. Statistische Analyse
Die Verbindung zwischen kategorialen Variablen wurde mit dem Chi-Quadrat-Test untersucht, und die Veränderung der Milbendichte entsprechend demografischen und vitalen Eigenschaften wurde mit den Mann-Whitney U- oder Kruskal-Wallis-Tests untersucht. Die binäre logistische Regression wurde verwendet, um die Verbindung zwischen der abhängigen Variable (Milbenpositivität) und den unabhängigen Variablen zu untersuchen. Odds Ratios (ORs) mit 95%-Konfidenzintervallen (KI) wurden berechnet.