Grüne CuO/ZnO-Nanopartikel: Reduzierung der AFB-1-Translokation und -Ansammlung im Mais

Zusammenfassung

Diese Studie untersuchte die Wirksamkeit von grün-synthetisierten CuO/ZnO-Hybrid-Nanopartikeln bei der Reduzierung der Ansammlung und Translokation von Aflatoxin B₁ (AFB₁) im Mais und zeigte, dass eine Behandlung mit 125 mg/kg die AFB-1-Spiegel signifikant senkte und die Risiken der menschlichen und tierischen Nahrungsexposition minimierte.

Zusammenfassung

Aflatoxin B₁ (AFB₁) ist ein starkes Karziogen, das von Aspergillus-Arten produziert wird und Maispflanzen kontaminiert und durch die Nahrungsaufnahme erhebliche Gesundheitsrisiken für Menschen und Tiere darstellt. Traditionelles Nacherntemanagement und chemische Maßnahmen sind oft kostspielig oder wirkungslos, um die Übertragung bodenübertragener Toxine während des Wachstums in die Pflanze zu verhindern. Das Hauptziel dieses Protokolls war es, grünsynthetisierte Kupferoxid/Zinkoxid-(CuO/ZnO)-Hybrid-Nanopartikel (NPs) als nachhaltigen Bodenverbesserer vor der Ernte zu bewerten. Die Studie zielte darauf ab, festzustellen, ob diese NPs effektiv die Translokation und Ansammlung von AFB₁ in Maisgeweben hemmen und so die Toxinansammlung in essbaren Getreidearten reduzieren können. Mit einem randomisierten vollständigen Blockdesign über zwei verschiedene Feldstandorte wurde Mais in Böden angebaut, der mit_AFB-1- oder Aspergillus-Flavus-Sporen impfiert und mit unterschiedlichen Konzentrationen von NPs (0–125 mg/kg) behandelt wurde. Das Protokoll verwendete grüne Synthese mit dem Substrat Pleurotus ostreatus, um die Umweltfreundlichkeit zu gewährleisten. Pflanzengewebe wurden in verschiedenen physiologischen Stadien mittels High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) analysiert, um AFB-1-Werte zu messen und Risikobewertungen für Menschen und Vieh zu berechnen. Die Behandlung mit 125 mg/kg grüner hybrider NPs (s. < 0,05 senkte signifikant die_{AFB-1-Konzentration} über alle Wachstumsstadien. Am Standort auf dem Campus wurde AFB₁ im vegetativen Stadium um 68 %, bei der Blüte um 82 % und bei Reife um 76 % im Vergleich zur positiven Kontrolle reduziert. Entscheidend ist, dass die Getreide-AFB-1-Werte auf 6,91 ppb sanken, was die geschätzte tägliche Aufnahme für Menschen deutlich senkte. Weitere Forschung ist jedoch erforderlich, um potenzielle Nanopartikelreste und Langzeittoxizität zu bewerten. Diese Methode zeigt, dass grüne CuO/ZnO-Hybrid-NPs als wirksames Bioremediationsmittel wirken, das den Transport von Toxinen zu essbaren Pflanzenteilen verhindert. Dieser Ansatz bietet eine skalierbare, umweltfreundliche Strategie, um die Ernährungssicherheit zu verbessern und die AFB-1-Exposition in Aflatoxin-anfälligen Regionen zu verringern.

Einleitung

Aflatoxine, insbesondere Aflatoxin_B-1 (AFB₁), gehören aufgrund ihrer Verbreitung, Toxizität und Wirkung auf den Menschen zu den bedeutendsten Mykotoxinen. Sie werden von bestimmten Pilzen produziert, hauptsächlich von denen, die zur Aspergillus-Art ^1,2,3 gehören. AFB₁ wird mit Leberzellkrebs in Verbindung gebracht und ist das gefährlichste aller Aflatoxine⁴. Diese starken Karzinogene infizieren eine Vielzahl landwirtschaftlicher Kulturen, darunter Mais (Zea mays L.), was zu ernsthaften Bedenken hinsichtlich der Lebensmittelsicherheit ^5,6 führt. Das Vorhandensein von AFB₁ im Mais beeinflusst nicht nur den Ernteertrag und die Qualität, sondern stellt auch eine ernsthafte Bedrohung für die menschliche und tierische Gesundheit durch die Ernährungsexposition ^7,8 dar.

Derzeit basiert das Aflatoxin-Management überwiegend auf Nachernte-Strategien, wie ordnungsgemäßes Trocknen, Sortieren beschädigter Körner, chemische Behandlungen (z. B. Ammoniak oder Ozon), Bestrahlung und hermetische Lagerung, um Pilzwachstum während der Lagerung^zu verhindern. Zu den Strategien gehören gutes Pflanzenmanagement, biologische Bekämpfungsmittel (wie Kalk) und verbesserte Lagermöglichkeiten¹⁰. Physikalische und chemische Behandlungen wie Mikrowelle, Ultraviolett (UV), gepulstes Licht, elektrolysiertes Wasser, kaltes Plasma, Ozon, Elektronenstrahl und Gammabestrahlung wurden^{ebenfalls getestet.} Diese Nacherntemethoden sind jedoch oft kostspielig, energieintensiv oder für den weitverbreiteten Einsatz unpraktisch und verhindern nicht die Aflatoxin-Translokation innerhalb der Pflanze während des Wachstums.

Vorernte-Ansätze, die verwendet werden, umfassen agronomische Praktiken wie resistente Sortensorten, rechtzeitige Pflanzung, Bewässerung zur Reduzierung von Dürrestress und Biokontrolle mit aflatoxinen A. flavus-Stämmen (z. B. Aflasafe), die toxigene Stämme wettbewerbsorientiert ausschließen, aber wiederholte Anwendungen erfordern und möglicherweise nicht vollständig bodengetragene Translokationen^abdecken 11,12,13 . Diese Methoden haben oft Einschränkungen: Nachernteinterventionen können die bereits vorhandene Kontamination nicht rückgängig machen, verursachen hohe Kosten für Sortier- und Lagerinfrastruktur in ressourcenbegrenzten Umgebungen, das Risiko von Nährstoffverlust oder Rückständen durch Chemikalien, und die Wirksamkeit der Biokontrolle variiert je nach Umweltbedingungen¹⁴.

Im Gegensatz dazu bieten grün synthetisierte CuO-ZnO-Hybrid-Nanopartikel eine neuartige Bodenverbesserungsstrategie vor der Ernte. Im Gegensatz zu herkömmlichen chemischen NPs vermeidet die grüne Synthese mit Pflanzenextrakten (z. B. Pilzsubstrat) giftige Lösungsmittel, senkt Kosten und erhöht die Biokompatibilität, wodurch sie umweltverträglich sind^15,16. Die CuO-ZnO-Hybridisierung verbessert synergetisch die antimykotische Aktivität, indem sie reaktive Sauerstoffspezies (ROS) erzeugt, die Pilzmembranen stört und eine große Oberfläche für die AFB-1-Adsorption bereitstellt, wodurch die Aufnahme und Translokation in essbare Pflanzenteile wie Getreide verhindert wird. Dies unterscheidet sich von bestehenden Strategien, da eine frühzeitige Intervention an der Boden-Pflanzen-Schnittstelle ermöglicht wird, wodurch eine AFB-1-Reduktion von bis zu 80–99 % bei niedrigen Dosen (z. B. 125 mg/kg) erreicht wird, ohne den Ernteertrag zu beeinträchtigen oder schädliche Rückstände^zu hinterlassen. Wesentliche Vorteile sind die Umweltfreundlichkeit gegenüber chemischen Fungiziden, eine überlegene Wirksamkeit im Vergleich zu Einzelmetall-NPs oder Biokontrolle unter variablen Feldbedingungen sowie die Möglichkeit einer skalierbaren Integration in landwirtschaftliche Praktiken in aflatoxinanfälligen Regionen wie Subsahara-Afrika.

Metalloxid-NPs, insbesondere Zinkoxid (ZnO) und Kupferoxid (CuO), haben unter diesen Materialien wegen ihrer antimykotischen Eigenschaften und ihrer Fähigkeit, Toxine aufzunehmen,^{Aufmerksamkeit} erregt^. Zum Beispiel wurde berichtet, dass Cu NPs ROS erzeugen können, was bakterielle und pilzbiologische Makromoleküle^schädigen kann. Außerdem wurde in einem anderen Experiment gezeigt, dass Pilzstämme eine deutliche Verschiebung mit einer deutlichen Tendenz zu einer Ordnungssteigerung aufweisen, wenn F. Solani mit chitosanbasierten CuO-NPs behandelt wurde, was zum größten Ordnungseffekt²¹ führte. Die grüne Synthese von NPs hat als sicherere und nachhaltigere Alternative zu herkömmlichen chemischen Methoden Aufmerksamkeit erlangt und so toxische Nebenprodukte und Umweltbelastungen minimiert^15,22.

Die Hybridisierung von CuO- und ZnO-NPs vereint die vorteilhaften Eigenschaften beider Metalle und erhöht potenziell ihre Wirksamkeit beim Abbau oder Adsorbieren von AFB₁^23,24. Derzeit werden diese grünsynthetisierten NPs hauptsächlich zur Steuerung der AF-Produktion in Pilzstämmen in In-vitro-Experimenten eingesetzt; so untersuchten Sheik und Awad beispielsweise die Auswirkungen von AgNPs, AuNPs und deren Mischung auf das Wachstum und die Aflatoxin-B1-Ansammlung des aflafotigen A. flavus-Stamms ²⁵. Die Konzentration, die zur Kontrolle des Wachstums von A. flavus erforderlich ist, ist jedoch unbekannt. Daher besteht ein entscheidender Bedarf, grüne CuO-ZnO-Hybride unter feldrelevanten Bedingungen hinsichtlich ihrer Auswirkungen auf die AFB-1-Translokation von bodenveränderten Quellen in Maisgewebe im Vergleich zu herkömmlichen NPs zu bewerten. Daher war die Zielsetzung dieser Studie, die Wirkung unterschiedlicher Konzentrationen von CuO/ZnO-grünen Hybrid-NPs auf die AFB₁/A.-Flavus-Konzentration im Maisgewebe zu bestimmen und das Risiko von AFB₁ zu bewerten im Mais, nachdem der Mais mit CuO/ZnO-grünen Hybrid-NPs behandelt wurde. Forschungshypothesen sollten eine mechanistische Grundlage für die beobachtete Wirksamkeit grün-synthetisierter CuO-ZnO-Hybrid-NPs liefern. Diese Studie testet folgende messbare Hypothesen: 1) Die Antimykotenhemmungshypothese, bei der hybride NPs die A. flavus-Sporulation und die anschließende de-novo-AFB-1-Produktion im Boden im Vergleich zu Einzelmetall-NPs signifikant reduzieren sollten, was durch geringere Pilzbelastung und Toxinwerte am Molelwane-Standort identifiziert wurde. 2) Die Adsorptions-Translokationshypothese: Bei der vorhandene Toxine (Campus-Standort) vorhanden sind, sollten die NPs eine hohe Bindungsaffinität für AFB₁ nachweisen, was die Toxintranslokation vom Boden in das Maiswurzelsystem signifikant verringert. 3) Die Biokompatibilitätshypothese (Phytotoxizität): Wonach grünsynthetisierte hybride NPs zu einer geringeren Restansammlung von Metallen und reduzierten oxidativen Stressmarkern im Maisgewebe im Vergleich zu herkömmlichen chemischen Benchmarks führen sollten, wodurch die Biosicherheit der Pflanzen verbessert wird.

Protokoll

Versuchsstandorte
Die Versuche wurden an zwei Standorten durchgeführt, die 7 km voneinander entfernt lagen; Die Stellen wurden mit unterschiedlichen Behandlungsmethoden geimpft. Im ersten Versuch wurde eine Netzhausanlage mit 40 % Schatten auf der Molelwane, North-West University (NWU) Research Farm (25,810°S, 25,630°E, 1276 m) in der Nordwestprovinz Südafrikas eingerichtet. Der rote sandige Lehmboden wurde als Hutton-Form kategorisiert und enthielt 75 % Sand, 4 % Schlamm und 21 %^Ton-25. Das zweite Experiment wurde auf der Netzhausanlage des NWU Mafikeng Campus (25,8278 °S, 25,6079 °O, 1276 m) durchgeführt. Die Böden an der zweiten Stelle wiesen sandigen Lehm mit 82 % Sand, 3 % Schlamm und 15 % Ton aus und wurden zuvor als Arcadia Form²⁵ klassifiziert. Die CuO/ZnO-grünen Hybrid-NPs wurden im Labor der Abteilung für Chemie, School of Physical and Chemical Sciences, Fakultät für Natur- und Agrarwissenschaften, NWU, in Südafrika synthetisiert.

Synthese von CuO/ZnO-grünen Hybrid-NPs
Zehn (10) g getrocknetes Pleurotus ostreatus Pilz-Substrat (SMS) wurden zu 100 ml entionisiertem Wasser gegeben, bei 70 °C erhitzt und 2 Stunden²⁶ lang gerührt. Die Mischung wurde dann auf Raumtemperatur abgekühlt, gefiltert, und 30 ml Filtrat wurden einer Lösung zugegeben, die 2,5 g Kupferacetat und 2 g Zinkacetat in 30 ml destilliertem Wasser enthielt. Der pH-Wert dieser Lösung wurde mit Natriumhydroxid (NaOH) auf 8 eingestellt, auf 80 °C für 2 Stunden erhitzt, nach der Reaktion zentrifugiert, über Nacht im Ofen getrocknet und 2 Stunden²⁶ bei 650 °C kalziniert. Die synthetisierten NPs wurden als CuO/ZnO-grüne Hybrid-NPs charakterisiert und bestätigt.

Bodenprobenentnahme und -analyse
Bodenproben wurden von der University Farm in Molelwane und dem Versuchsgelände des Campus in Tiefen von 0–15 cm und 15–30 cm entnommen. Sie wurden anschließend kategorisiert und auf ihre physikalischen und chemischen Eigenschaften untersucht, wie es von²⁷ beschrieben wurde.

Versuchsdesign
Die Studie verwendete ein faktorielles Experiment, das in einem randomisierten vollständigen Blockdesign (RCBD) mit drei Replikaten angeordnet war. Um die Wirksamkeit grün-synthetisierter CuO-ZnO-Hybrid-NPs unter unterschiedlichen Kontaminationsszenarien zu bewerten, wurden zwei unabhängige Expositionsmodi an verschiedenen Standorten etabliert: Standort 1 (North-West University Campus) stellte ein exogenes Kontaminationsmodell dar, bei dem Boden mit extrahiertem AFB₁ mit einer Rate von 160 ppb/kg besprüht wurde, um die direkte Adsorption und Translokationsschirmung der NPs zu bewerten. Standort 2 (Molelwane Research Farm): Darstellte ein biologisches Infektionsmodell, bei dem Boden mit A. flavus-Sporen mit 160 Sporen/kg impfiert wurde, um die antimykotische Wirkung der NPs auf die de-novo-Mykotoxinproduktion und die anschließende Pflanzenaufnahme zu untersuchen. Die pulverartigen NPs wurden nach der Impfung gewogen und gleichmäßig mit 1 kg Boden in einer Pflanzplastiktüte (AFB₁ oder A. flavus-Sporen) vermischt. Jede Behandlung wurde separat durchgeführt und die Hände zwischen den Behandlungen desinfiziert. Anschließend wurden zunächst vier Maissamen in jedem Topf gepflanzt (9 cm oberer Durchmesser, 6,5 cm unterer Durchmesser). Um drei gesunde Setzlinge pro Topf zu halten, wurden die Setzlinge eine Woche nach dem Schlüpfen geschnitten. Gemäß den Empfehlungen zur optimalen Maisproduktion aus der Bodenanalyse wurde der Boden gedüngt. Die Töpfe wurden in Zwischen- und Reihenabständen von 0,75 m × 0,3 m platziert, insgesamt 216 Töpfe. Die Erde in Töpfen wurde nach der Aussaat auf 60 % Feldkapazität bewässert. Boden- und Pflanzenproben wurden in drei Entwicklungsstadien entnommen: V10 (Entwicklung), R1 (Blüte) und R6 (Reife). Die Proben wurden dann in einer mit Eis gefüllten Kühlbox ins Labor gebracht und bei -20 °C für weitere Untersuchungen aufbewahrt. Braune Papiertüten wurden verwendet, um die restlichen Pflanzenproben für AFB-1-Konzentrationen und andere Tests zu lagern und einzufrieren. Die übrigen Pflanzenproben für AFB-1-Konzentrationen und andere Analysen wurden in braunen Papiertüten aufbewahrt und bis zur Analyse tiefgefroren.

Analyse von Maisaflatoxinen
Maisentwicklungskomponenten (Wurzel, Stängel, Blatt und Getreide) wurden in verschiedenen Wachstumsstadien in sterilen Plastiktüten gesammelt, sorgfältig beschriftet und ins Labor transportiert. Um die Integrität der Wachstumsdaten zu wahren und unabhängige Beobachtungen für jede Entwicklungsstufe sicherzustellen, wurde ein destruktives Stichprobenprotokoll implementiert. Um Kreuzkontaminationen zwischen Nanopartikelkonzentrationen und Impftypen zu vermeiden, wurden Erntewerkzeuge und Handschuhe mit 70 % Ethanol gereinigt und zwischen jeder Behandlungsgruppe mit deionisiertem Wasser abgespült. Mit einem Mörser und Stößel wurden 10 g Pflanzenmaterial und 1 g Natriumchlorid (NaCl) 10 Minuten lang in 25 ml 80 % Methanol und 20 % destilliertem Wasser pulverisiert. Für Maisgetreide und Maiskern wurden 25 g gemahlene Probe und 2,5 g NaCl mit 100 ml 80 % methanol:20 destilliertem Wasser bei hoher Geschwindigkeit für 10 Minuten gemischt. Anschließend wurde der homogenisierte Extrakt durch einen Glas-Mikrofaserfilter gefiltert, gefolgt von einer Reinigung mit 20 ml 20 % Tween-2 in phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS). Aflatoxine wurden nach der Eluation mit einer Flussrate von einem Tropfen pro Sekunde aus der Immunaffinitätssäule extrahiert, und das Supernatant (Zytoplasma) wurde in ein bernsteinfarbenes Fläschchen aufgenommen. Anschließend wurden AFB₁ und andere Aflatoxine nach der Flüssigchromatographiemethode²⁸ gemessen, bei der Aflatoxine mit einer O-Phthaldialdehydlösung derivatiert und die derivatierten Verbindungen in ein Hochleistungsflüssigkeitschromatographiesystem (HPLC) injiziert wurden. Das HPLC-System war mit einem Jasco FP-920 Fluoreszenzdetektor ausgestattet, der auf 362 nm Anregung und 425 nm Emission eingestellt war. Die AFB₁ war physiologisch von Natur aus so strukturiert, dass sie bei einer Anregungswellenlänge von 362 nm detektiert werden konnte. Eine Hichrom-Säule (4,6 mm × 150 mm) mit 5 μm-Partikeln wurde verwendet, und der Derivatisationsreaktor war ein KOBRA-Zell-Programm bei 100 μA. Trennungen chromatographischer Spitzen wurden in einer Hichrom-Säule durchgeführt, in die eine Vorsäule mit ähnlicher stationärer Phase angebracht war. Die Inertsil-ODS-3 und ODS-3 V wurden jeweils als Schutz- und Analysepatronen verwendet, während der Einspritzer aus einem Autosampler mit Reodynventil bestand. Die mobile Phase bestand aus Wasser: Methanol (65:35, v/v), Kaliumbromid (119 mg) und 4 M Salpetersäure (350 μL) pro Liter und wurde in einem isokratischen Programm mit einer Durchflussrate von 1,0 mL/min gepumpt. Die Detektion von Aflatoxin wurde für jeden Peak zu einer Retentionszeit ähnlich wie jedem Standard und in einer Höhe angesehen, die fünfmal höher war als das Basisrauschen^{von 29}.

Nachweisgrenzwerte (LOD), Quantifizierungsgrenze (LOQ) und prozentuale (%) Rückgewinnung wurden berechnet, um den analytischen Ansatz des HPLC unter Verwendung der Gleichungen 1, 2 bzw. 3 zu bestätigen. Der LOD ist die niedrigste Aflatoxinkonzentration, die zuverlässig vom Hintergrundrauschen unterschieden werden kann, während LOQ die niedrigste Aflatoxinkonzentration ist, die quantitativ mit akzeptabler Präzision und^{Genauigkeit von 30} gemessen werden kann. AFB₁ und seine Metaboliten wurden durch das Hinzufügen von 10 μL Gesamtaflatoxin-Standards (AFB₁, AFB₂, AFG₁ und AFG₂) zu den negativen Maiskontrollproben in dreifachem Exemplar gewonnen. Die Proben wurden anschließend mittels HPLC unter Verwendung der zuvor genannten Verfahren entnommen.

LOD = X + 3s 1

LOQ = X + 10s 2

3

Dabei ist: "X" die mittlere Konzentration der verstärkten Stichproben-Blankwerte, und "s" die Standardabweichung der Stichprobe.

AFB1-Expositionsschätzung
Die mittleren Aflatoxinwerte in der Maisdiät, die tägliche Maisaufnahme und das durchschnittliche Körpergewicht (Kinder, Erwachsene, Rinder, Milchkühe und Küken) wurden zur Berechnung der geschätzten Tagesaufnahme (EDI) verwendet. Der EDI für mittlere Aflatoxine wurde gemäß Gleichung 2 berechnet und ausgedrückt in (ng/kg Körpergewicht/Tag); für die Berechnung des Hazard Index (HI) wurden EDI-Werte auf ng/kg Körpergewicht/Tag (1 ppb/kg/Tag = 1.000 ng/kg Körpergewicht/Tag) umgerechnet, um mit den Einheiten von TD5032³¹ übereinzustimmen.

4

Risikobewertung und Charakterisierung
Der Gefahrenindex (HI) wurde berechnet, indem der EDI durch den TD50 geteilt und mit einem Sicherheitsfaktor von 50.000 multipliziert wurde. Die mittlere toxische Dosis (TD) 50 ist die notwendige Dosierung (ng/kg/Körpergewicht/Tag), um bei 50 % der Versuchstiere Tumore zu verursachen, die bei null Dosis ^31,32 keine Tumore entwickelt hätten.

Datenanalyse
Die Analyse der Varianz erfolgte auf Basis der gesammelten Wachstums- und Ertragsdaten mit dem RCBD-Verfahren in SAS 9.4 (SAS Institute Inc., Cary, NC, USA). Mehrere Vergleiche der kleinsten Quadrat-Mittelwerte wurden mit Tukeys Honestly Significant Difference (HSD) Test³³ durchgeführt.

Ergebnisse

Aflatoxinkonzentration in Wachstumskomponenten
Die Ergebnisse zeigten, dass Aflatoxinkonzentrationen in den Wachstumskomponenten und in Maiskörner, die mit grün synthetisierten CuO/ZnO-NPs behandelt wurden, nachgewiesen wurden, was auf das Vorhandensein aller wichtigsten Aflatoxintypen (AFG₂, AFG₁, AFB₂ und AFB₁) hinweist. Die zur Berechnung der Aflatoxinkonzentrationen verwendeten Kalibrier...

Diskussion

Der Erfolg dieses Protokolls bei der Reduzierung der AFB-1-Translokation und -Ansammlung im Mais hängt von mehreren kritischen Schritten ab, die sowohl die biologische Wirksamkeit als auch die analytische Zuverlässigkeit sicherstellen^16,27. Die Ergebnisse zeigen, dass 125 mg/kg grün-synthetisierte CuO-ZnO-Hybrid-NPs die AFB-1-Konzentrationen in beiden experimentellen Modellen signifikant reduzierten, wenn auch durch po...

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Kupfer(II)-Acetat [Cu(CO2CH3)2]	Sigma-Aldrich Pty, St. Louis, MO, USA	10,53,753	Dunkelblau-grüner kristalliner Feststoff (98 % Reinheit)
Glas-Mikrofaserfilter	Sigma-Aldrich Pty, St. Louis, MO, USA	1703965	Borosilikatglas
Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie (HPLC)-System	Shimadzu	20H2	Zur Trennung und Quantifizierung von Analyten
HPLC-Qualitäts-Ethanol	Sigma-Aldrich Pty, St. Louis, MO, USA	34923	Farbloses Lösungsmittel mit hoher Reinheit ( ≥ 99 %)
HPLC-Qualitäts-Methanol	Merck KGaA, Darmstadt, Deutschland	322415	Farbloses Lösungsmittel mit hoher Reinheit ( ≥ 99 %)
Säule der Immunaffinität	Shimadzu	KJ524	Zur selektiven Reinigung von Zielanalyten
Maissamen von PAN 5R-590R	NWK	N/A	Kleine, harte Körner mit weißem Koluor
Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS)	Merck KGaA, Darmstadt, Deutschland	3526580	Eine isotone Pufferlösung
Plastiktüten	Eco-Agro Enterprise (Pty) Ltd	N/A	Perforiert
Gereinigte AFB1, AFB2, AFG1, AFG2 und AFs – insgesamt in situ	Trilogie Analytical Laboratory, Inc (Vossbrink Drive, WA, USA)	TAS-M12DA1-10	Weißer bis cremefarbener kristalliner Festkörper
Natriumchlorid (NaCl)	Sigma-Aldrich Pty, St. Louis, MO, USA	N/A	Weißer kristalliner Festkörper
Zinkacetat [Zn(CH3COO2)2H2O]	VWR Chemicals	2331 210 2	Weißer kristalliner Festkörper (99 % Reinheit)