Multimodale verhaltensbezogene Phänotypisierung stressbedingter depressionähnlicher Zustände bei Drosophila melanogaster

Zusammenfassung

Dieses Protokoll bietet einen Rahmen zur Bewertung stressinduzierter Verhaltensänderungen bei Drosophila melanogaster. Die Kombination komplementärer Assays ermöglicht die Quantifizierung von Aktivität, Erkundung und Entscheidungsfindung für einzelne Fliegen. Der Ansatz ist flexibel und kann an eine Vielzahl von Studien angepasst werden, die Stressbiologie, Stoffwechsel und neurobehaviorale Funktionen untersuchen.

Zusammenfassung

Metabolische, neurodegenerative und stressbedingte Störungen gehen häufig mit veränderter Fortbewegung, beeinträchtigter Entscheidungsfindung und verminderter Verhaltensflexibilität einher. Zugängliche multimodale Verhaltensrahmen zur Quantifizierung dieser Phänotypen bei Drosophila melanogaster bleiben jedoch begrenzt. Hier wird ein Protokoll vorgestellt, das erzwungene Schwimmexposition, Y-Labyrinth-Drehverhalten und -händigkeit, Phototaxis und Aktivitätsbewertung im FlyVac-System, offene Felderkundung und langfristige Lokomotorüberwachung mit dem Drosophila Activity Monitor integriert. Diese komplementären Assays erfassen mehrere Verhaltensdimensionen, darunter motorischer Output, Motivation, Entscheidungsstruktur und Verhaltensvariabilität, als funktionelle Messungen neuronaler und metabolischer Zustände. Die Pipeline ist skalierbar, reproduzierbar und anpassungsfähig an pharmakologische, genetische und Umweltmanipulationen und bietet einen vielseitigen Rahmen zur Erkennung stress-, metabolischer und neurodegenerationsbezogener Verhaltensphänotypen bei Drosophila.

Einleitung

Verhaltensänderungen wie Veränderungen in der Fortbewegung, Entscheidungsfindung und explorativen Aktivitäten werden häufig als Indikatoren auf Organismusebene für den neuronalen und physiologischen Zustand verwendet. Über Taxa hinweg äußert sich neuronale Dysfunktion oft in veränderter Bewegungsstruktur, verminderter Explorationsmotivation, beeinträchtigtem sensorisch gesteuertem Entscheidungsverhalten und Veränderungen in der Verhaltensvorhersehbarkeit. Da diese Ausgaben auf Organismusebene neuronale, metabolische und physiologische Zustände integrieren, liefern sie skalierbare Anzeigen zur Erkennung krankheitsrelevanter Phänotypen. Trotz des umfangreichen Einsatzes von Drosophila melanogaster in der Molekulargenetik und Neurowissenschaft bleiben standardisierte multimodale Verhaltensrahmen, die gleichzeitig die Bewegungsleistung, Entscheidungsstruktur und Verhaltensvariabilität erfassen, begrenzt.

Modellorganismen sind unerlässlich, um die Mechanismen zugrunde liegender stressbedingter und neuropsychiatrischer Phänotypen zu untersuchen, da kontrollierte experimentelle Manipulation beim Menschen oft unmöglich ist. Stressbedingte Verhaltenssyndrome treten bei vielen Taxa, einschließlich Insekten, auf und betreffen konservierte neuromodulatorische Systeme wie Serotonin und Dopamin sowie metabolische Signalwege. Die Fruchtfliege hat sich daher als mächtiges System etabliert, um molekulare Dysfunktion mit Verhaltensergebnissen auf Organismusebene zu verknüpfen, bedingt durch ihre kurze Generationszeit, genetische Bewältigbarkeit und den Erhalt krankheitsrelevanter Signalwege ^1,2.

Gleichzeitig werden viele Verhaltenstests bei Drosophila typischerweise isoliert durchgeführt, was es erschwert, zwischen allgemeinen Krankheitseffekten, motorischen Beeinträchtigungen, motivationalen Veränderungen und Verhaltensänderungen auf Entscheidungsebene zu unterscheiden. Zudem können allein mittlere Verhaltensmaße biologisch bedeutsame Phänotypen verschleieren, da neuromodulatorische und entwicklungsbedingte Störungen oft die Verhaltensvariabilität statt des durchschnittlichen Verhaltensoutputs verändern. Ein multimodaler Verhaltensansatz, der lokomotorische, explorative, sensorische und Entscheidungstests kombiniert, ist daher notwendig, um robuste phänotypische Signaturen auf Organismusebene zu erzeugen³.

Hier wird eine multimodale Verhaltenspipeline präsentiert, die erzwungene Schwimmexposition ^4,5, Y-Labyrinth-Drehverhalten und Händlichkeit ^6,7,8,9, Phototaxis und Aktivitätsbewertung mit dem FlyVac-System^10,11, Erkundung im offenen Feld¹² sowie Langzeit-Lokomotorüberwachung mit dem Drosophila Activity Monitor ^5,13 integriert (Abbildung 1). Jeder Assay in diesem Rahmen erfasst eine spezifische Verhaltensdimension, die für stressbedingte Phänotypen relevant ist. Der erzwungene Schwimmtest misst passives Bewältigungsverhalten, bei dem ein früherer Übergang zur Unbeweglichkeit eine verminderte Motivation zur Aufrechterhaltung von Fluchtreaktionen widerspiegelt. Die offenen Feld- und DAM-Assays quantifizieren die allgemeine Bewegungsaktivität und zirkadiane Struktur und liefern Basismessungen für motorische Leistung und Erregung. Der Y-Maze-Assay erfasst die Entscheidungsstruktur durch Sequenzen von Links-Rechts-Entscheidungen und ermöglicht die Schätzung sowohl des Drehbias (Lateralisation) als auch der Verhaltensvariabilität als Maß für die Vorhersehbarkeit. Schließlich bewertet der FlyVac-Test sensorisch gesteuerte Entscheidungsfindung und Annäherungs-Vermeidungsverhalten anhand wiederholter phototaktischer Entscheidungen. Zusammen liefern diese Assays ergänzende Anzeigen, die Veränderungen in Aktivität, Motivation und Entscheidungsverhalten unterscheiden.

Dieses Protokoll erfasst komplementäre Aspekte von motorischer Leistung, Motivation, Entscheidungsstruktur und Verhaltensvariabilität und bietet einen skalierbaren Rahmen zur Erkennung von stress-, metabolisch- und neurodegenerationsbezogenen Verhaltensphänotypen bei D. melanogaster¹⁴. Das Hauptziel dieser Studie ist es, ein multimodales verhaltensbezogenes Phänotypisierungsrahmen zu etablieren, das komplementäre Tests integriert, um mehrere Dimensionen stressbedingter Verhaltensänderungen zu erfassen. Das Stressparadigma wird hier als standardisierte Störung verwendet, um die Sensibilität und Anwendbarkeit des Rahmens zu demonstrieren.

Protokoll

Der erzwungene Schwimmtest wurde gemäß den Prinzipien der 3Rs (Ersatz, Reduktion und Verfeinerung) durchgeführt. Der Ersatz wurde durch die Verwendung von Drosophila melanogaster als Modell für wirbellose Tiere erreicht, wodurch Paradigmen des erzwungenen Schwimmens von Wirbeltieren vermieden wurden, die aus ethischen Gründen zunehmend eingeschränkt werden. Die Reduzierung wurde durch die hohe Durchsatznatur des Tests unterstützt, der robuste Verhaltensschlussfolgerungen aus relativ kleinen Kohorten ermöglicht und gleichzeitig die Nutzung von Tieren minimiert. Die Verfeinerung wurde durch die Begrenzung der Schwimmexposition auf 2 Minuten erreicht, eine Dauer, die Erschöpfung oder Ertrinken verhindert und eine vollständige Wiederherstellung des normalen Bewegungsverhaltens unmittelbar nach den Tests ermöglicht. Zusammen stellen diese Überlegungen sicher, dass der Test aussagekräftige Verhaltensdaten liefert, während potenzielle Belastungen minimiert und ethische Akzeptanz, auch in Bildungseinrichtungen, maximiert wird.

1. Induktion eines depressionsähnlichen Zustands bei Drosophila (Schwingungsstressprotokoll)

1. Männliche D. melanogaster innerhalb von 24 Stunden nach der Eclosie unter leichter CO₂-Anästhesie einnehmen. Alle Details sind in der Materialtabelle aufgeführt.
2. Fliegen in Gruppen von 10 in Polypropylen- oder Acrylphiolen (95 mm lang × 25 mm Innendurchmesser), die mit Baumwollstopfen versiegelt sind.
3. Fliegen werden mechanischer Vibration (300 Hz) mit einer Schwingungsplattform ausgesetzt.
4. Wiederholte Zyklen aus 45-minütigen Vibrationen und 15-minütigen Erholung in Fläschchen mit Standardnahrung durchführen.
5. Setzen Sie die Vibrationszyklen insgesamt 6 Stunden pro Tag fort.
6. Wiederhole das Stressprotokoll für drei aufeinanderfolgende Tage.
7. Kontrollfliegen unter identischen Unterhaltungsbedingungen ohne Vibrationsbelastung aufrechterhalten.
   HINWEIS: Im vorliegenden Protokoll wurden nur männliche Fliegen eingesetzt, um die Variabilität im Zusammenhang mit geschlechtsspezifischen physiologischen und verhaltensbezogenen Unterschieden, einschließlich des Fortpflanzungszustands und hormonellen Einflüssen, zu verringern. Diese Standardisierung erleichtert die Erkennung stressbedingter Verhaltenseffekte in einem kontrollierten Umfeld. Das Protokoll ist jedoch vollständig auf weibliche Fliegen anwendbar, und geschlechtsspezifische Reaktionen stellen ein wichtiges Feld für zukünftige Untersuchungen dar. Da die Empfindlichkeit gegenüber stressbedingten und depressionsähnlichen Phänotypen je nach Geschlecht und Alter zwischen Taxa, einschließlich Drosophila, variieren kann, kann die Ausweitung dieses Rahmens auf verschiedene demografische Gruppen zusätzliche biologische Einblicke liefern. Dieses Paradigma basiert auf etablierten unkontrollierbaren Schwingungsstressmodellen, die motivationale und aktivistische Veränderungen bei Fliegen hervorrufen.

2. Erzwungener Schwimmtest in Drosophila melanogaster

VORSICHT: Natriumdodecylsulfat (SDS) ist ein Reizstoff. Tragen Sie geeignete persönliche Schutzausrüstung (z. B. Handschuhe und Augenschutz) bei der Vorbereitung und Handhabung von SDS-Lösungen. Vermeiden Sie Haut- und Blickkontakt. Entsorgung von SDS-haltigen Abfällen gemäß den institutionellen Chemikaliensicherheitsrichtlinien.

1. Fangen Sie erwachsene Fliegen innerhalb von 24 Stunden nach der Eclosion und halten Sie sie unter konstantem Licht und kontrollierten Umgebungsbedingungen.
2. Bereiten Sie Mehrwellen-Kammer-Objektträger vor und füllen Sie jede Bohrung bei Raumtemperatur mit ~2 mL 0,08 % SDS-Lösung.
3. Transferiere vor der Aufnahme eine einzelne Fliege in jedes Schacht. Eine Narkose ist nicht erforderlich.
4. Zeichnen Sie das Verhalten mit einer Überkopfkamera für 2 Minuten auf, um die Latenz bis zur ersten Immobilie zu quantifizieren.
5. Quantifizieren Sie die Latenz bis zur ersten Immobilität.
6. Entfernen Sie die Fliegen nach der Aufzeichnung und legen Sie sie auf saugfähiges Papier, um die Wiederherstellung der normalen Fortbewegung zu bestätigen.
   HINWEIS: Unbeweglichkeit ist definiert als das Stoppen aktiver Fluchtbewegungen bei Erhaltung der Oberflächenposition. Um zusätzliche Parameter wie die gesamte Immobiliitätsdauer und die Anzahl der Immobilitätsphasen aufzuzeichnen, sind längere Aufzeichnungsdauern (z. B. 3 Minuten) erforderlich. Dieser Test spiegelt passives Bewältigungsverhalten wider; Eine verringerte Latenz zur Immobilie wird als verminderte Motivation interpretiert, Fluchtreaktionen aufrechtzuerhalten. Variabilität in der Latenz bis zur Immobilität / totalen Unbeweglichkeit zwischen den Fliegen. Dieser Test kann vorübergehenden Stress oder Müdigkeit auslösen. Bei Verwendung in Längsvermessungen wird es vor anderen Tests durchgeführt und eine ausreichende Wiederherstellung (z. B. ≥24 Stunden) vor weiteren Tests erlaubt.

3. Langfristige Überwachung der Lokomotorik mit dem Drosophila Activity Monitor (DAM)

1. Betäuben Sie Fruchtfliegen kurzzeitig (5 S) mit CO₂ zur Sortierung.
2. Lege einzelne Fliegen in Glas-DAM-Röhrchen mit Lebensmitteln und Baumwollstöpseln¹⁷.
3. Führe die Schläuche in das Drosophila Activity Monitor System.
4. Erfassen Sie die Bewegungsaktivität kontinuierlich (48 Stunden) unter kontrollierten Temperatur- und Licht-Dunkel-Bedingungen.
5. Store Beam-Break zählt mit Erfassungssoftware.
6. Bin-Aktivitätsdaten in definierte Zeitintervalle (z. B. 1–10 Min.) einbauen.
7. Fliegen werden ausgeschlossen, die sterben oder nach der Akklimatisierung keine Aktivität zeigen.
   HINWEIS: Eine kontinuierliche Lokomotorüberwachung über einen Zeitraum von 48 Stunden reicht aus, um zirkadiane Aktivitätsmuster zu erfassen. DAM: Variabilität in Gesamtdistanz, Geschwindigkeit und Kampfstruktur zwischen den Individuen.

4. Offenfeld-Lokomotor-Assay

1. Kurz (5 Sekunden) betäuben Sie Fruchtfliegen mit CO₂.
2. Übertragen Sie einzelne Fliegen in rechteckige 25 x 75 mm große Arenen (eine Fliege pro Arena).
3. Erlauben Sie den Fliegen, sich (20 Minuten) an die Arenaumgebung zu gewöhnen, bevor sie unter konstantem, diffusem weißem Licht mit geringer Intensität aufgenommen werden.
4. Verhalten unter konstanter Beleuchtung mit einem automatisierten Videotracking-System aufzeichnen.
5. Analysieren Sie Trajektorien mit Tracking-Software, um Folgendes zu extrahieren:
   Gesamtbewegte Entfernung
   Durchschnittliche Lokomotor-Drehzahl
   Beschleunigungs- und Kurvenmetriken
   HINWEIS: Dieser Test liefert eine Grundlage zur Interpretation stressbedingter Verhaltensänderungen. Die Eingewöhnungsphase minimiert den durch die Handhabung verursachten Stress und ermöglicht es den Fliegen, sich an die Arena zu gewöhnen, sodass die aufgezeichnete Bewegungsaktivität das Ausgangsverhalten widerspiegelt. Konstante Beleuchtung wurde eingesetzt, um die Variabilität zirkadianer Schwankungen zu verringern und einheitliche Verhaltensbedingungen in den Studien zu gewährleisten. Trajektorien können je nach Verfügbarkeit und Benutzerpräferenz mit automatisierter Tracking-Software wie EthoVision XT (Noldus Information Technology) oder mit Open-Source-Alternativen wie Ctrax, idTracker und TrackMate (ImageJ/Fiji) extrahiert werden. Open-Field-Assay: Variabilität in Gesamtdistanz, Geschwindigkeit und Kampfstruktur zwischen Individuen. Um Ordnungseffekte zu reduzieren, standardisieren Sie die Akklimatisierung und Lichtbedingungen über die Sitzungen hinweg. Wenn mehrere Tests an denselben Individuen durchgeführt werden, sollten die Expositionsdauern der Arena konstant bleiben.

5. Y-Labyrinth-Drehverhalten und Verhaltensvariabilitätstest

1. Betäuben Sie kurzzeitig (5 s) Fruchtfliegen mit CO₂.
2. Platzieren Sie einzelne Fliegen in Y-Labyrinthkammern ^8,9. Labyrinthe wurden mit einem Lasergravur in 1,6 mm dickes schwarzes Acryl geschnitten. Wir platzierten Fliegen in einer Reihe von 95 einzelnen Labyrinthen, von denen jedes aus drei symmetrischen Armen bestand (12 mm lang und 3,3 mm breit).
3. Fliegen können für längere Aufzeichnungsperioden frei erkunden (20 Min).
4. Rekord-Kurvenentscheidungen (links oder rechts) während der Erkundungsbewegung (1 H).
5. Berechnen Sie den individuellen Drehbias als den Anteil der Rechtskurven. Berechnen Sie relevante Kennzahlen wie Geschwindigkeit, Beschleunigung, Bewegung ohne Bewegung, zeitbasierte Variationen der Aktivität^12,15.
6. Quantifizieren Sie die Verhaltensvariabilität zwischen Fliegen mithilfe des medianen absoluten Abweichungs (MAD) des Drehungsbias.
   HINWEIS: Dieser Test misst die Bewegungshandigkeit und die Vorhersehbarkeit des Verhaltens, unabhängig vom Gesamtaktivitätsniveau. Drehsequenzen erfassen die Entscheidungsstruktur; Der Turning-Bias spiegelt eine Lateralisierung wider, während die Variabilität zwischen den Individuen die Verhaltensvorhersehbarkeit widerspiegelt. Bias = Anteil der Rechtskurven (pro Fliegen) Variabilität = Dispersion (MADn) von Verzerrung über Fliegen hinweg. Für wiederholte Tests sollte man die Assay-Reihenfolge zwischen Individuen oder Kohorten ausgleichen, um die Sequenzeffekte zu kontrollieren.

6. Phototaktische Optionen: Aktivitätsüberwachung im FlyVac-Gerät

1. Laden Sie einzelne Fliegen in die FlyVac-Kammern ^6,11 ohne CO-2-Anästhesie.
2. Lassen Sie die Akklimatisierung (10 Minuten) vor Beginn der Versuche zu.
3. Geben Sie jeder Fliege wiederholt binäre Licht-Dunkel-Entscheidungen vor.
4. Zeichnen Sie Entscheidungen über 40 Studien mit automatisierter Erkennung auf.
5. Berechnen Sie die Lichtwahlwahrscheinlichkeit pro Flug und die durchschnittliche Zeit zwischen Lichtwahlen als Maß für die Aktivität.
6. Quantifizieren Sie die Verhaltensvariabilität zwischen Personen, die MAD nutzen.
   HINWEIS: Das FlyVac-System ermöglicht eine gleichzeitige Bewertung von mittlerer Entscheidungsverzerrung und interindividueller Variabilität. Die in diesem Protokoll beschriebenen Verhaltenstests sind modular und können je nach Versuchsdesign in unterschiedlichen Reihenfolgen durchgeführt werden. Um mögliche Übertragungseffekte zu minimieren, wird jedoch empfohlen, den erzwungenen Schwimmtest vor anderen Tests durchzuführen. Um Ordnungseffekte zu reduzieren, standardisieren Sie die Akklimatisierung und Lichtbedingungen über die Sitzungen hinweg.

7. Datenanalyse

HINWEIS: Verhaltensanalysen wurden unter Verwendung einzelner Fliegen als Schlusseinheit durchgeführt, sofern nicht anders angegeben.

1. Erzwungener Schwimmtest: Analysieren Sie die Videoaufnahmen manuell oder verwenden Sie Verhaltensbewertungssoftware.
   HINWEIS: Unbeweglichkeit wurde definiert als das Fehlen aktiver Fluchtbewegungen, während die Fliege schwimmend blieb. Folgende Parameter wurden pro Flug extrahiert: Latenz bis zur ersten Immobilie (s). Gruppenvergleiche wurden mit nichtparametrischen statistischen Tests durchgeführt, da die Verhaltensmaße nicht normal verteilt sind.
2. Langzeit-Lokomotorik (DAM): Rekord-Beam-Break-Zählungen durch den Drosophila Activity Monitor. Exportiere und sortiere sie in 10-Minuten-Intervallen.
   HINWEIS: Für jede Fliege wurden Gesamtaktivitätszahlen und zirkadiane Aktivitätsmuster berechnet. Diese Muster können in R, Python oder Excel berechnet werden – je nachdem, was verfügbar ist. Fliegen, die aufgrund von Sterblichkeit oder technischen Artefakten Inaktivität zeigten, wurden vor der Analyse ausgeschlossen. Der Test dauerte 48 Stunden.
3. Offenfeld-Lokomotor-Assay: Verarbeiten Sie die Video-Tracking-Daten mit automatisierter Tracking-Software. Importiere die Videodateien in EthoVision XT. Führen Sie das Tracking mit automatisierter Erkennung mit kontrastbasierter Schwellenwerte durch.
   HINWEIS: Die Trajektorien wurden mit dem Standard-Filteralgorithmus geglättet. Die Lokomotorparameter pro Flug (Entfernung, Geschwindigkeit, Beschleunigung) wurden als CSV-Dateien für die nachgelagerte Analyse exportiert. Die Lokomotorparameter pro Flug umfassten: bewegte Gesamtstrecke (mm), Beschleunigungen (mm/^{s 2}). Zusammenfassende Statistiken wurden auf individueller Ebene vor dem Gruppenvergleich berechnet. Die Dauer dieses Tests betrug für jede Gruppe 1 Stunde.
4. Y-Labyrinth-Drehverhalten: Extrahiere die Drehentscheidungen aus aufgezeichneten Trajektorien, klassifiziere sie als links oder rechts und exportiere als binäre Sequenzen (links/rechts) für jede Person.
   HINWEIS: Für jede Fliege wurde der Drehbias als Anteil der Rechtskurven über alle aufgezeichneten Entscheidungen berechnet. Die Verhaltensvariabilität zwischen den Fliegen wurde mithilfe der skalierten mittleren absoluten Abweichung (MAD_n = 1,4826 × MAD) des Drehbias quantifiziert. Die Dauer dieses Tests betrug für jede Gruppe 1 Stunde.
5. FlyVac-Phototaktik-Entscheidungen: Zeichnen Sie binäre Licht-Dunkel-Entscheidungen automatisch auf. Für jede Fliege berechnet man die Lichtwahlwahrscheinlichkeit (LCP) als Anteil der Versuche, in denen der leichte Arm ausgewählt wurde. Man drückt die phototaktische Verzerrung als Mittelwert der binären Studienergebnisse aus (hell = +1, dunkel = −1).
   HINWEIS: Die Variabilität zwischen den Fliegen wurde mit MAD_n der einzelnen Phototaxis-Indizes quantifiziert.
6. Statistische Analyse: Bewerten Sie die Gruppenunterschiede in Verhaltensmaßen mittels permutationsbasierter Tests mit 10.000 Label-Randomisierungen.
   HINWEIS: Um die Variabilität zu vergleichen, wurden Permutationstests zu den absoluten Unterschieden im MAD_n zwischen den Gruppen durchgeführt. Konfidenzintervalle für_{MAD-n-Schätzungen} wurden mittels Bootstrap-Resampling ermittelt. Ein zweischwänziger, ungepaarter T-Test wurde verwendet, um die von Fliegen bewegte Distanz (mm) und maximale Beschleunigung (mm/^{s 2}) zu vergleichen. Für die Datenvisualisierung wurden Violindiagramme (hauptsächlich zur Darstellung von Dichte, Konzentration und Verrägung), Boxdiagramme und Spaltendiagramme verwendet. Die statistische Signifikanz wurde bei α = 0,05 bewertet.

Ergebnisse

Die Anwendung des Vibrations-Stress-Protokolls führte zu messbaren Verhaltensänderungen über mehrere Tests hinweg (Abbildung 1), die darauf ausgelegt sind, Aktivität, Bewältigungsverhalten und Entscheidungsfindung bei D. melanogaster zu erfassen.

Depressionsähnliche Induktion

Fliegen, die wiederholten mechanischen Schwingungen ausgesetzt waren (Abbildung 1A), zeigten im Vergleich z...

Diskussion

Das vorliegende Protokoll demonstriert einen multimodalen Ansatz zur Induzierung und Quantifizierung depressionähnlicher Verhaltenszustände bei D. melanogaster. Mit einem vibrationsbasierten Stressparadigma in Kombination mit komplementären Verhaltenstests zeigt diese Studie, dass depressionsähnliche Induktion über Maße wie Bewältigungsverhalten, Lokomotorik, explorative Dynamik, Entscheidungsfindung und Verhaltensvariabilität¹⁶ nachgewiesen werden kann. ...

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Anästhesiegeräte: z.B. Benchtop Flowbuddy, Komplettes System mit Ultimate Flypad	Genesis Scientific, El Cajon, CA, USA	59-122BCU
BioSan MSV-3500 Multigeschwindigkeits-Vortex	Biosan SIA, Riga, Lettland	BS-010210-TAH	Mit allen Plattformen
Baumwollverschlüsse für schmale Fläschchen	Flystuff von Genesee Scientific, El Cajon, CA 92020 USA	Katalognummer: 51-101
Drosophila-Aktivitätsmonitor (DAM2)	TriKinetics Inc, Waltham, MA, USA	DAM2; RRID: nicht verfügbar	32 Röhrchen
Drosophila melanogaster (Oregon-R-modENCODE)	Drosophila melanogaster (Oregon-R-modENCODE)	BDSC:25211; RRID:BDSC_25211
GraphPad Prism	GraphPad Software, Boston, MA, USA;	Katalogname: GraphPad Prism, RRID:SCR_002798	Version 11.0.1
Logitech C920 HD Pro Webcam, HD 1080p ObjektivKatalogname: HD Pro Webcam C920	Logitech Europe S.A., Lausanne, Schweiz	RRID: nicht verfügbar	Die Overhead-Aufnahmekamera, die für FST verwendet wird
Schmales Fliegenglas, Polypropylen	Flystuff von Genesee Scientific, El Cajon, CA 92020 USA	Katalognummer: 32-120BF
Noldus EthoVision XT	Noldus Information Technology, Wageningen, Niederlande	RRID: SCR_000441	v. 15.0
Natriumdodecylsulfat (SDS, ≥99%)	Merck KGaA (Sigma-Aldrich), Darmstadt, Deutschland	Katalogname: Natriumdodecylsulfat (ACS-Reagenz, ≥99% Reinheit); RRID: nicht verfügbar
ZEISS Stemi 508 Stereomikroskop	Carl Zeiss AG, Oberkochen, Baden-Württemberg, Deutschland	15634448