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Männliche Faktoren tragen wesentlich zur Unfruchtbarkeit bei und machen etwa die Hälfte aller unfruchtbaren Paare aus, wobei Auffälligkeiten in Spermienzahl und -beweglichkeit zu den häufigsten klinischen Befunden gehören 1,2. Oligoasthenozoospermie, gekennzeichnet durch eine verminderte Spermienkonzentration und eine beeinträchtigte Beweglichkeit, ist eine der häufigsten Formen männlicher Fortpflanzungsstörungen 3,4. Trotz der Verfügbarkeit von assistierten Fortpflanzungstechniken und empirischen medizinischen Therapien bleiben wirksame Strategien zur Verbesserung der Samenqualität begrenzt, was die Notwendigkeit weiter präklinischer Untersuchungenunterstreicht 5,6,7. Diese klinischen und translationalen Bedürfnisse motivieren die Entwicklung reproduzierbarer experimenteller Arbeitsabläufe zur Untersuchung männlicher Fortpflanzungsstörungen unter kontrollierten Bedingungen.
Akupunkturinterventionen wurden sowohl in klinischen als auch experimentellen Kontexten auf Samenauffälligkeiten und männliche Unfruchtbarkeit untersucht8. Obwohl klinische Studien potenzielle Vorteile für bestimmte Samenparameter andeuten, variieren deren Designs, Interventionsprotokolle und Ergebnismaße stark9. Die Elektroakupunktur (EA) eignet sich besonders für die Laborforschung, da sie kontrollierte Stimulationsparameter und eine gleichmäßigere Regulation als manuelle Akupunktur bietet, was die Bewertung behandlungsbedingter Veränderungen messbarer reproduktiver Ergebnisse erleichtert 10,11,12. Dieser prozedurale Vorteil macht EA gut geeignet für strukturierte präklinische Arbeitsabläufe in der männlichen Fortpflanzungsforschung.
Tiermodelle sind zentral für diese Bewertung, aber die Modellauswahl bleibt ein zentrales methodisches Thema in der Oligoasthenozoospermieforschung. Eine kürzlich durchgeführte systematische Übersichtsarbeit stellte fest, dass busulfan-induzierte Modellierungsmethoden umstritten sind und erhebliche Heterogenität in den Bewertungsindizes aufweisen, was die Notwendigkeit klarerer Verfahren und konsistenterer Werte hervorhebt13. Adeninbasierte Modelle bieten einen praktischen experimentellen Ansatz, da Adenin-Gavage bei Ratten eine Fortpflanzungsstörung auslösen kann, einschließlich reduzierter spermienbezogener Endpunkte und histologischer Schäden im Hodengewebe14,15. In unseren vorherigen Arbeiten wurde ein Adenin-induziertes Oligoasthenozoospermie-Rattenmodell mit EA an einem Shu-Mu-Gehirn-Nieren-Akupunkt-Set (Epangsanxian, BL23, GB25 und KI3) behandelt, zusammen mit Nicht-Akupunktur- und positiven Medikamentenkontrollbedingungen, mit erweiterten Endpunkten, die Organkoeffizienten und Serumhormonspiegel umfassten, die durch ELISA16 quantifiziert wurden. Aufbauend auf dieser experimentellen Grundlage und unter Berücksichtigung der Heterogenität bei Akupunktur-Auswahl, Kontrolldesign, Stimulationsparametern und Ergebnismaßen in bestehenden EA-Studien wurde das vorliegende Protokoll entwickelt, um den methodischen Arbeitsablauf für eine stabile EA-Gabe zu verfeinern und zu erweitern.
Dementsprechend konzentriert sich das aktuelle Protokoll auf die Abgabe und adressiert zwei praktische Variablen, die für wiederholte EA-Sitzungen bei Nagetieren entscheidend sind. Zunächst beschreiben wir zur Verhinderung von Nadelverschiebungen und intermittierendem Elektrodenkontakt durch Tierbewegung und Drahtzug, ein isofluran-erhaltenes Verfahren, das die Positionierung während der Stimulation stabilisiert und einen zuverlässigen Elektrodenkontakt während der Sitzungen gewährleistet; Dies ist besonders wichtig, wenn man Bauchmittellinienpunkte mit Hintergliedmaßen kombiniert. Zweitens wählten wir auf Grundlage früherer Übersichten und Akupunktur-Verschreibungsanalysen 9,17, die CV4, SP6, ST36 und CV3 als häufige Reproduktionsakupunkte in Unfruchtbarkeits- und Samenabnormitätsprotokollen identifizierten, CV3, CV4, ST36 und SP6 und wandten gepaarte Stimulation auf CV3-CV4 und ST36-SP6 an. Diese Konfiguration, die die Mittellinie des Bauchs und die Hintergliedmaßen kombiniert, standardisiert Elektrodenverbindungen, minimiert die Variabilität durch instabile Bleianhaftung und unterstützt reproduzierbare EA-Abgabe über wiederholte Behandlungssitzungen. Um einen protokollorientierten Umfang aufrechtzuerhalten und zuvor gemeldete endokrine, mechanistische oder positive Kontrollmodule zu vermeiden, ist die Ergebnisverifizierung auf einen primären Samen- und Hodenauswertsatz beschränkt. Dieser Satz umfasst computergestützte Spermienanalyse und Hoden-HE-Färbung, die ausreichen, um eine erfolgreiche Phänotyp-Induktion und behandlungsassoziierte Veränderungen in diesem Workflow zu bestätigen.