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Forschungsartikel

MicroRNA- und Nährstoffwechselprotein-Signaturen beim polyzystischen Ovarsyndrom und deren Verbindungen zu Insulinresistenz und Entzündungen

72 Aufrufe

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DOI:

10.3791/71928

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8. September 2026

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In diesem Artikel

Zusammenfassung

Diese retrospektive Fall-Kontroll-Studie untersuchte das Serum-MiR-146a, miR-642a, miR-2861 und metabolische Marker bei Frauen mit polyzystischem Ovarialsyndrom. Es wurden koordinierte Veränderungen in miRNAs, Adipokinen, Insulinresistenz, Entzündung und Testosteron beobachtet, während ein kombiniertes Biomarker-Modell eine stärkere Unterscheidungsleistung zeigte als einzelne Marker.

Zusammenfassung

Das polyzystische Ovarialsyndrom (PCOS) ist eine häufige endokrine und Stoffwechselstörung bei Frauen im gebärfähigen Alter, doch die Beziehungen zwischen zirkulierenden microRNAs (miRNAs) und ernährungsbedingten Proteinen sind noch unvollständig verstanden. Diese Studie untersuchte die Assoziationen von serumgebundenen miR-146a, miR-642a und miR-2861 mit metabolischen und entzündlichen Markern bei PCOS. Die Studie umfasste 62 Frauen mit PCOS und 71 gesunde Kontrollpersonen. Die serumgebundenen miR-146a, miR-642a und miR-2861 wurden mittels quantitativer Echtzeit-PCR gemessen, während Adiponektin (ADPN), Leptin (LEP), Retinol-bindendes Protein 4 (RBP4), die Insulinresistenz nach dem Homeostasemodell (HOMA-IR), Interleukin-6 (IL-6) und Testosteron (T) ebenfalls bestimmt wurden. Die methodologische Validierung bewertete die Probenaufbereitungsbedingungen, die Präzision der Assays sowie die Übereinstimmung zwischen analytischen Methoden. Im Vergleich zu den Kontrollen wiesen Frauen mit PCOS eine erhöhte Expression von miR-146a sowie verminderte Expressionen von miR-642a und miR-2861 auf. Die ADPN-Spiegel waren erniedrigt, während die Konzentrationen von LEP, RBP4, HOMA-IR, IL-6 und T erhöht waren. miR-146a korrelierte negativ mit ADPN und positiv mit LEP, RBP4, HOMA-IR, IL-6 und T. miR-642a korrelierte negativ mit RBP4, HOMA-IR und IL-6, während miR-2861 positiv mit ADPN korrelierte. Die methodologische Validierung zeigte eine akzeptable Stabilität des Assays, Präzision und Übereinstimmung zwischen den Methoden. Das Modell, das die drei miRNAs mit ADPN, LEP, RBP4, HOMA-IR, IL-6 und T kombinierte, erreichte eine Fläche unter der Kurve von 0,929 mit einer Sensitivität von 82,26 % und einer Spezifität von 94,37 %. Diese Ergebnisse zeigen koordinierte Veränderungen zirkulierender miRNAs und metabolischer Marker bei PCOS und stützen die weitere Evaluierung ihres kombinierten diagnostischen Potenzials.

Einleitung

PCOS ist die häufigste endokrine und metabolische Erkrankung bei Frauen im gebärfähigen Alter. Die geschätzte globale Prävalenz liegt zwischen 6 % und 20 %. Bei etwa 70 % der betroffenen Frauen liegt eine Insulinresistenz vor, und mehr als die Hälfte weist Übergewicht oder Adipositas auf1. PCOS kann zu ovulatorischen Funktionsstörungen, Unfruchtbarkeit, Typ-2-Diabetes, kardiovaskulären Erkrankungen und weiteren Langzeitkomplikationen führen und beeinträchtigt dadurch die reproduktive Gesundheit und die Lebensqualität erheblich2. Obwohl die Pathogenese noch nicht vollständig aufgeklärt ist, wird allgemein angenommen, dass bei PCOS multiple Faktoren eine Rolle spielen, darunter genetische Anfälligkeit, chronische Entzündungen in niedrigem Ausmaß, Störungen in den Insulin-Signalwegen sowie eine Beeinträchtigung des lokalen ovariellen Mikromilieus. Vor diesem Hintergrund ist die Identifizierung spezifischer molekularer Marker, die den Krankheitsverlauf widerspiegeln, für eine frühzeitige Diagnose und eine gezielte Intervention bei PCOS von erheblichem Wert3,4.

miRNAs sind eine Klasse nicht-kodierender RNAs mit einer Länge von etwa 22 Nukleotiden. Diese Moleküle regulieren die Genexpression nach der Transkription, indem sie entweder den Abbau der mRNA fördern oder die Translation hemmen. Daher sind diese Moleküle für zahlreiche zelluläre Prozesse entscheidend, einschließlich Zellwachstum, Differenzierung, Reaktionen auf Entzündungen und metabolische Regulation5,6. Frühere Studien haben eine charakteristische Dysregulation von miR-146a, miR-642a und miR-2861 im Serum von Patientinnen mit PCOS gezeigt. Eine Hochregulation von miR-146a könnte chronische Entzündungsreaktionen durch gezielte Regulation des TLR4/NF-κB-Signalwegs vermitteln7, während eine verminderte Expression von miR-642a und miR-2861 eng mit Insulinresistenz und gestörter Funktion der ovariellen Granulosazellen assoziiert ist8,9. ADPN, LEP und RBP4, Proteine, die mit der Ernährung in Zusammenhang stehen, spielen eine entscheidende Rolle bei der Regulation des metabolischen Gleichgewichts. Veränderungen ihrer Konzentrationen können direkt den Lipidstoffwechsel, die Insulinsensitivität und den Entzündungszustand beeinflussen. Dies wird als ein zentraler Bestandteil der molekularen Grundlage der metabolischen Störungen bei PCOS angesehen10,11. Die meisten veröffentlichten Studien haben jedoch entweder miRNAs oder ernährungsbezogene Proteine getrennt im Hinblick auf PCOS untersucht12,13, und der molekulare Zusammenhang zwischen beiden wurde bisher nicht systematisch geklärt.

In dieser Studie maßen wir die Expressionslevel von drei miRNAs und sechs zentralen Biomarkern bei Patientinnen mit PCOS, analysierten die Korrelationen zwischen diesen Markern sowie deren Zusammenhänge mit klinischen biochemischen Parametern und untersuchten zudem, ob miRNAs über Assoziationen mit ernährungsbezogenen Proteinen am pathologischen Prozess des PCOS beteiligt sein könnten. Die Ergebnisse dieser Studie könnten das derzeitige Verständnis der molekularen Grundlagen des PCOS erweitern, potenzielle Ansatzpunkte für Therapien zur Ernährungs- und Stoffwechselregulation liefern und laborchemische Hinweise für ein frühes Screening, die Wirksamkeitsüberwachung sowie ein individualisiertes Management des PCOS bieten.

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Protokoll

Ethische Erklärung
Die Studie wurde gemäß der Deklaration von Helsinki durchgeführt und von dem Medizinischen Ethikkomitee des Krankenhauses für Traditionelle Chinesische Medizin Ganzhou genehmigt (Genehmigungsnummer: GZSZYYKYLL20240092, Datum: 2024-12-20).

Alle in diesem Protokoll verwendeten Materialien, Reagenzien, Testkits und Geräte sind in der Tabelle der Materialien aufgeführt.

Studienaufbau
Diese retrospektive Fall-Kontroll-Studie umfasste 62 Patientinnen mit PCOS, die zwischen Juni 2024 und August 2025 in der gynäkologischen Ambulanz des Krankenhauses für Traditionelle Chinesische Medizin in Ganzhou diagnostiziert wurden, sowie 71 gesunde Frauen im gebärfähigen Alter, die im gleichen Zeitraum im Gesundheitsmanagementzentrum des Krankenhauses untersucht wurden. Die Kontrollgruppe wurde hinsichtlich des Alters auf Gruppenebene vergleichbar ausgewählt; der BMI wurde nicht als Matchingsvariable verwendet und stattdessen als Basischarakteristikum bewertet.

Studienteilnehmer
Einschlusskriterien: Die Einschlusskriterien für die PCOS-Gruppe waren wie folgt: (1) Alter >18 Jahre; (2) Diagnose eines PCOS gemäß den modifizierten Rotterdam-Kriterien, wie sie in der internationalen, evidenzbasierten Leitlinie von 2023 empfohlen werden, wozu mindestens zwei der folgenden drei Merkmale nach Ausschluss verwandter Erkrankungen erforderlich sind: Oligoovulation oder Anovulation, definiert als Menstruationszyklen länger als 35 Tage oder weniger als acht Zyklen pro Jahr; klinische Hyperandrogenie und/oder biochemische Hyperandrogenie, wobei letztere als Konzentration von serumgebundenem Gesamttestosteron oberhalb der assay-spezifischen oberen Referenzgrenze definiert ist; sowie polyzystische Ovarmorphologie, definiert als mindestens 20 Follikel in einem Ovar oder ein Ovarvolumen von mindestens 10 mL, wenn eine vollständige Follikelzählung nicht möglich war14; (3) vollständige elektronische Patientenakten; (4) keine Hormonersatztherapie, keine blutzuckersenkenden Wirkstoffe oder Immunsuppressiva in den letzten drei Monaten vor der Studie; und (5) Vorhandensein einer nüchternen Serumprobe, die bei der Einschreibung entnommen und in der institutionellen Biobank eingelagert wurde.

Die Einchlusskriterien für die Kontrollgruppe waren wie folgt: (1) Teilnahme an einer Gesundheitsuntersuchung im gleichen Zeitraum; (2) regelmäßige Menstruationszyklen; (3) normale ovarielle Morphologie in der transvaginalen Sonographie; (4) keine Vorgeschichte endokriner Störungen, gynäkologischer Erkrankungen, Unfruchtbarkeit oder klinisch bedeutsamer hepatischer oder renaler Funktionsstörungen; und (5) Verfügbarkeit einer nüchternen Serumprobe, die am Tag der Untersuchung entnommen und in der institutionellen Biobank aufbewahrt wurde.

Die Ausschlusskriterien waren wie folgt: (1) Endometriose, Uterusmyome, Ovarialtumore, Beckenentzündung oder andere gynäkologische Erkrankungen; (2) Schilddrüsenfunktionsstörung, Cushing-Syndrom, Hyperprolaktinämie, congenitale Nebennierenrindenhyperplasie oder andere endokrine Erkrankungen, die eine ovulatorische Dysfunktion oder Hyperandrogenie erklären könnten; (3) schwere kardiale, hepatische, renale oder pulmonale Funktionsstörungen, maligne Tumore, Autoimmunerkrankungen oder hämatologische Erkrankungen; (4) Schwangerschaft, Entbindung oder Abtreibung innerhalb der letzten 6 Monate; (5) Einnahme von Glukokortikoiden, oralen Kontrazeptiva oder anderen Medikamenten, die den Glukose- oder Lipidstoffwechsel beeinflussen, innerhalb der letzten 3 Monate; (6) psychiatrische Erkrankungen oder kognitive Beeinträchtigungen; (7) fehlende wesentliche klinische Angaben; und (8) schwere Serumhämolyse, definiert als Hämoglobinkonzentration >2,0 g/L, Lipämie, Ikterus, mehr als ein Gefrier-Tau-Zyklus oder unterbrochene Probenaufbewahrung. Eine Schilddrüsenfunktionsstörung, Hyperprolaktinämie und eine nicht-klassische congenitale Nebennierenrindenhyperplasie wurden mithilfe der Messung von Thyreotropin, Serumprolaktin bzw. 17-Hydroxyprogesteron ausgeschlossen; follikelstimulierendes Hormon wurde gegebenenfalls überprüft, während bei klinischer Indikation ein Cushing-Syndrom oder ein Nebennierentumor abgeklärt wurde. Auf alle klinischen Proben wurde dasselbe präanalytische Verfahren angewandt, und keine Probe, die in die primäre Analyse einging, wurde mehr als einmal gefroren und aufgetaut.

Sammlung und Lagerung von Serumproben
Nüchternes venöses Blut (10 mL) wurde morgens in rohrförmige Behältnisse ohne Antikoagulans gegeben, 30 min bei Raumtemperatur gerinnen lassen und anschließend 15 min bei 4 °C mit 1.505 x g zentrifugiert. Das Serum wurde in Aliquots zu je 200 µL portioniert und bis zur Analyse bei −80 °C gelagert. Bei allen klinischen Proben wurde dasselbe präanalytische Verfahren angewandt, und keine Probe, die in die primäre Analyse eingeschlossen wurde, wurde mehr als einmal aufgetaut und erneut eingefroren.

Vorbereitung der Proben zur methodischen Validierung
Zehn gepoolte Serumproben von gesunden Probanden wurden verwendet, um die Auswirkungen der Zentrifugationsgeschwindigkeit (1.505, 3.000 und 4.000 × g für 15 min), der Einfrier- und Auftauhäufigkeit (0, 1, 3 und 5 Zyklen), der Lagertemperatur (4 °C, −20 °C und −80 °C für 7 Tage), der Lagerdauer (1, 3, 6 und 12 Monate bei −80 °C) sowie der Hämolyse (<0,1, 0,1–0,5 und 0,5–2,0 g/L Hämoglobin) zu bewerten.

Laboruntersuchung
Alle Laboranalysen wurden von derselben geschulten Technikerin unter standardisierten Umweltbedingungen und gemäß vorgegebenen Arbeitsanweisungen durchgeführt. Serum-miRNAs wurden mittels qRT-PCR quantifiziert; ADPN, LEP und RBP4 wurden mittels Sandwich-ELISA bestimmt; T und IL-6 wurden mittels chemilumineszenzbasierter Immunoassays gemessen; und die Parameter des Glukosestoffwechsels wurden mit routinemäßigen automatisierten Laborverfahren ermittelt.

Quantifizierung von serumgebundenen miRNAs mittels qRT-PCR
Gesamt-RNA wurde aus 200 µL Serum unter Verwendung des TRIzol-Reagenz extrahiert. Spektrophotometrische Daten zur RNA-Konzentration und zur Reinheit (A260/A280) lagen für die archivierten serumgebundenen RNA-Präparationen nicht vor. Die Akzeptanz des qRT-PCR-Assays wurde daher anhand eines einzelnen, spezifischen Schmelzkurven-Peaks sowie der Übereinstimmung zwischen drei technischen Wiederholungen beurteilt. Nach Phasentrennung mittels Chloroform, Isopropanolpräzipitation und zwei Waschschritten mit 75 %igem Ethanol wurde das RNA-Pellet in enzymfreiem Wasser resuspendiert. Das 20 µL große Reaktionsgemisch enthielt 4 µL 5x-Puffer, 1 µL Reverse Transkriptase, 1 µL 10 µM Stamm-Schleife-Primer und 5 µL RNA-Template. Die Reaktionsbedingungen betrugen 16 °C für 30 min, 42 °C für 30 min und 85 °C für 5 s. Die revers transkribierten Produkte wurden bei −20 °C gelagert. Die quantitative PCR wurde mit dem TaKaRa SYBR Premix Ex Taq II Kit durchgeführt. Jede 20 µL große Reaktion enthielt 10 µL 2× SYBR-Mastermix, jeweils 0,8 µL Vorwärts- und Rückwärtsprimer (10 µM) sowie 2 µL cDNA-Template. Die Amplifikation erfolgte auf einem Applied Biosystems 7500 Echtzeit-PCR-System unter folgenden Bedingungen: Vor-Denaturierung bei 95 °C für 30 s; 40 Zyklen mit 95 °C für 5 s und 60 °C für 30 s; anschließend wurde eine Schmelzkurvenanalyse zur Bestätigung der Amplifikationsspezifität durchgeführt. U6 snRNA diente als interner Referenzgen, und die relativen Expressionsniveaus von miR-146a, miR-642a und miR-2861 wurden nach der 2-ΔΔCt-Methode berechnet. Jede Probe wurde dreifach getestet. Die Sequenzen aller in dieser Studie verwendeten Primer sind in Tabelle 1 aufgeführt.

Nachweis von Serumproteinkennzeichen
Die Konzentrationen von ADPN, LEP und RBP4 im Serum wurden mittels Doppelantikörper-Sandwich-ELISA unter Verwendung des Human Total ADPN/Acrp30 Quantikine ELISA Kit (analytische Empfindlichkeit: 0,891 ng/mL; Messbereich: 3,9–250 ng/mL), des Human Leptin Quantikine ELISA Kit (analytische Empfindlichkeit: 7,8 pg/mL; Messbereich: 15,6–1.000 pg/mL) bzw. des Human RBP4 Quantikine ELISA Kit (analytische Empfindlichkeit: 0,628 ng/mL; Messbereich: 1,56–100 ng/mL) bestimmt. Jeder Assay war spezifisch für das entsprechende humane Analyt, und die Serumproben wurden gemäß den Herstelleranweisungen verdünnt. Die Extinktion wurde bei 450 nm gemessen, und die Konzentrationen wurden anhand von Standardkurven mit vierparametrischer logistischer Regression berechnet. Die Variationskoeffizienten innerhalb oder zwischen den Assays betrugen für ADPN 2,5 % bzw. 3,2 %, für LEP 2,7 % bzw. 3,4 % und für RBP4 2,6 % bzw. 3,3 %.

T-Messung
Das serumseitige T wurde mittels Elektrochemilumineszenz-Immunoassay unter Verwendung eines automatisierten Immunoassay-Analysators Roche Cobas e601 gemessen.

Glukosemetabolische und entzündliche Messungen
Werte für nüchternes Plasma-Glukose, nüchternes Insulin und HbA1c wurden aus klinischen Routine-Laborbefunden desselben Tages entnommen, nicht aus den archivierten Serumaliquote, die für die miRNA- und metabolischen Proteinanalysen verwendet wurden. Die Konzentration von nüchternem Plasma-Glukose wurde mittels der Glukose-Oxidase-Methode bestimmt, nüchternes Insulin durch Immuntrübungsmessung und HbA1c durch Hochleistungs-Flüssigkeits-Chromatographie. Der HOMA-IR-Wert wurde berechnet als [nüchternes Plasma-Glukose (mmol/L) × nüchternes Insulin (mIU/L)]/22,5. Serum-IL-6 wurde mittels chemilumineszenzbasiertem Immunoassay gemessen.

Methodologische Validierung
Die Vergleiche mit alternativen Methoden wurden durchgeführt, um zu ermitteln, ob die primären Messungen gegenüber der verwendeten Testplattform robust waren, und dienten nicht der Erzeugung der wesentlichen Ergebnisse zwischen den Gruppen. Die Expressionslevel der drei miRNAs und der fünf biochemischen Marker wurden unter den oben beschriebenen unterschiedlichen Aufarbeitungsbedingungen bestimmt, und der Variationskoeffizient für jeden Indikator wurde berechnet als CV = (Standardabweichung/Mittelwert) × 100 %. Eine CV <15 % wurden als akzeptabel angesehen, um die Stabilität der Testergebnisse unter verschiedenen Bedingungen der Probenverarbeitung und -lagerung zu bewerten. Die Präzision innerhalb eines Tages wurde durch zehnfache Wiederholungsmessung derselben gepoolten Serumprobe an einem einzigen Tag ermittelt, während die Präzision zwischen den Tagen anhand von einmal täglich durchgeführten Messungen über fünf aufeinanderfolgende Tage bestimmt wurde. Für jeden Parameter wurden der Mittelwert, die Standardabweichung und der entsprechende Variationskoeffizient (CV) berechnet. Zur Überprüfung der analytischen Übereinstimmung wurden fünf biochemische Analyten – ADPN, LEP, RBP4, IL-6 und T – in den Validierungsproben mittels des primären Assays und einer Roche-Chemilumineszenz-basierten Immunoassay-Plattform gemessen. Zur Berechnung der Übereinstimmungsgrenzen mit 95 % wurde die Bland-Altman-Analyse verwendet. Der primäre qRT-PCR-Assay wurde für alle klinischen miRNA-Messungen eingesetzt, während das miScript SYBR Green PCR Kit lediglich als orthogonale Methode im analytischen Übereinstimmungsexperiment verwendet wurde; zwischen den beiden qRT-PCR-Systemen wurden Pearson-Korrelationskoeffizienten berechnet.

Statistische Analyse
Die Datenanalyse wurde mit statistischer Software durchgeführt. Alle stetigen Variablen wurden zunächst mit dem Shapiro-Wilk-Test auf Normalverteilung überprüft. Normalverteilte Daten werden als Mittelwert angegeben ± Standardabweichung. Der Vergleich zwischen zwei Gruppen erfolgte mittels des t-Tests für unabhängige Stichproben, während der Vergleich mehrerer Gruppen mittels einfaktorieller Varianzanalyse (ANOVA) durchgeführt wurde, gefolgt vom LSD-t-Test für paarweise Vergleiche. Daten, die keiner Normalverteilung folgten, werden als Median (Interquartilbereich) [M (P25, P75)] angegeben. Der Vergleich zwischen zwei Gruppen wurde dann mit dem Mann-Whitney-U-Test und der Vergleich mehrerer Gruppen mit dem Kruskal-Wallis-H-Test durchgeführt. Kategoriale Daten wurden als Häufigkeiten und Prozentangaben dargestellt. Wir verwendeten den χ2 Test oder Fishers exakter Test zum Vergleich der Gruppen. Die Korrelationen zwischen den Variablen wurden je nach Datenverteilung mittels Pearson-Korrelationsanalyse oder Spearman-Rangkorrelationsanalyse untersucht. In einer explorativen Analyse wurden die Pearson-Korrelationen zwischen jedem miRNA und den sechs metabolischen Markern innerhalb der nicht adipösen (BMI <28 kg/m²2) und adipös (BMI ≥28 kg/m²2) PCOS-Subgruppen. Die Korrelationskoeffizienten wurden mittels Fishers r-zu-z-Transformation verglichen, und die sich ergebenden Unterschiede zwischen den Subgruppen p Die Werte wurden mithilfe des Benjamini-Hochberg-Verfahrens zur Kontrolle der falschen Entdeckungsrate angepasst. Die diagnostische Aussagekraft wurde anhand von Receiver-Operating-Characteristic-(ROC)-Kurven und der Fläche unter der Kurve (AUC) bewertet. Zusätzlich wurde die kombinierte Detektion mittels eines logistischen Regressionsmodells analysiert. Alle Tests waren zweiseitig, und p < Ein Wert von 0,05 galt als statistisch signifikant.

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Ergebnisse

Grundlegende Merkmale der Studienpopulation
In diese Studie wurden insgesamt 62 Patientinnen mit PCOS und 71 gesunde Kontrollpersonen eingeschlossen. Die beiden Gruppen waren hinsichtlich Alter, ethnischer Zusammensetzung und anderer Basismerkmale vergleichbar (p > 0,05). Im Gegensatz dazu waren die Menstruationszyklen in der PCOS-Gruppe signifikant länger als in der Kontrollgruppe (p < 0,001), was mit dem typischen klinischen Erscheinungsbild des PCOS übereinstimmt (

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Diskussion

Mithilfe standardisierter serumbiochemischer Assays und der qRT-PCR wurden in dieser Studie Serumproben von 62 Patientinnen mit PCOS und 71 gesunden Kontrollpersonen analysiert. Es zeigte sich ein charakteristisches Muster dysregulierter miRNA- und ernährungsbezogener Proteinexpression bei PCOS sowie signifikante posttranskriptionelle Assoziationen zwischen beiden. Alle Experimente durchliefen eine sorgfältige methodische Validierung. Die Präzision, Stabilität und Übereinstimmung zwischen den Methoden des Nachweissystems...

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Offenlegungen

Die Autoren geben keine Interessenkonflikte an.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
-80 °C Ultra-TiefkühlschrankThermo Fisher (USA)Forma 900Langzeitlagerung von Serumproben bei niedriger Temperatur
Adiponektin (ADPN)-ELISA-KitR&D Systems (USA)DY1065Quantitativer Nachweis der ADPN-Konzentration im Serum
Automatischer biochemischer AnalysatorBeckman Coulter (USA)AU5800Nachweis von nüchternem Blutzucker, Insulin und glykiertem Hämoglobin
Automatischer MikroplattenreaderTecan (Schweiz)Infinite M200 ProAbsorptionsmessung bei 450 nm für ELISA-Experimente
BlutzuckermesskitBeckman Coulter (USA)A11A01Nachweis des nüchternen Serumglukosespiegels nach der Glukose-Oxidase-Methode
Cobas e601 Chemilumineszenz-Immunoassay-AnalysatorRoche (Deutschland)Cobas e601Elektrochemilumineszenz-Nachweis von Testosteron und IL-6 im Serum
Enzymfreies KryoröhrchenAxygen (USA)MCT-150-CAufteilung von Serumproben, Lagerung bei -80 °C in Ultra-Tiefkühlschrank
Eppendorf Research plus PipetteEppendorf (Deutschland)Research plus 0,5–1.000 μLAspiration von Serum, Pipettieren von RNA/Reagenzien, Probenaufteilung
Glykiertes Hämoglobin (HbA1c)-KitBeckman Coulter (USA)A11A03Nachweis von HbA1c im Serum mittels Hochleistungsflüssigkeitschromatographie
IL-6-NachweiskitRoche (Deutschland)5200057190Quantifizierung von Interleukin-6 im Serum
Insulin-NachweiskitBeckman Coulter (USA)A11A02Nachweis von nüchternem Insulin im Serum mittels Immuntrübungsmetrie
Leptin (LEP)-ELISA-KitR&D Systems (USA)DY398Quantitativer Nachweis der LEP-Konzentration im Serum
Niedertemperatur-Zentrifuge mit hoher DrehzahlXiangyi Instrument (China)TDZ5-WSZentrifugation von Proben bei angegebenen Zentrifugalkräften
miScript SYBR Green PCR KitQiagen (Deutschland)218073Überprüfung der methodischen Konsistenz beim miRNA-Nachweis
PrimeScript RT Reverse TranskriptionskitTaKaRa (Japan)RR036AReverse Transkription von miRNA zur cDNA-Synthese
Echtzeit-Fluoreszenz-PCR-GerätApplied Biosystems (USA)7500Verstärfung und Fluoreszenznachweis von miRNA mittels qRT-PCR
Retinolbindungsprotein 4 (RBP4)-ELISA-KitR&D Systems (USA)DY6005Quantitativer Nachweis der RBP4-Konzentration im Serum
SPSS-StatistiksoftwareIBM (USA)25Test auf Daten-Normalverteilung, Gruppenvergleiche, Korrelations- und ROC-Analyse
SYBR Premix Ex Taq II KitTaKaRa (Japan)RR420AFluoreszenz-basierte quantitative PCR-Amplifikation von miRNA
Testosteron (T)-NachweiskitRoche (Deutschland)5200067190Quantifizierung der Testosteronspiegel im Serum
TRIzol-Gesamt-RNA-ExtraktionsreagenzInvitrogen (USA)15596026Gesamt-RNA-Extraktion aus Serumproben
Vakuum-Blutentnahmeröhrchen ohne AntikoagulansBD Biosciences (USA)367812Entnahme von nüchternem Venenblut aus der Ellenbeuge zur Serumtrennung

Referenzen

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