Ethische Erklärung: Die Studie wurde gemäß den institutionellen Richtlinien und den ethischen Grundsätzen der Deklaration von Helsinki durchgeführt. Die ethische Genehmigung wurde vom Ethikkomitee der Bisha-Universität (UBCOM-RELOC) mit der Genehmigungsnummer H-06-BH-087/(0802.23) erteilt. Die Teilnahme war freiwillig, und vor der Einschreibung wurde bei allen Teilnehmenden eine schriftliche, informierte Einwilligung eingeholt. Die in der Studie verwendeten Materialien, Geräte und analytischen Verfahren sind in der Tabelle der Materialien zusammengefasst.
Studienaufbau und Untersuchungsumfeld
Eine retrospektive Querschnittsstudie wurde zwischen Dezember 2022 und Mai 2023 im Maternity and Children’s Hospital in Bisha, Saudi-Arabien, durchgeführt, um den Eisenstatus zu bewerten und Faktoren zu untersuchen, die mit Eisenmangel bei schwangeren Frauen in der nördlichen Region Asir assoziiert sind.
Studienpopulation und Stichprobenmethode
Insgesamt wurden 200 Teilnehmerinnen rekrutiert, darunter 135 schwangere Frauen, die reguläre pränatale Sprechstunden besuchten, sowie 65 altersgematchte nicht schwangere Frauen, die als Kontrollgruppe dienten. Die Teilnehmerinnen wurden während des Studienzeitraums mittels Convenience-Stichprobe aus ambulanten Sprechstunden rekrutiert. Vorliegende berechtigte Frauen wurden während der Sprechstundenstunden nacheinander angesprochen, und die Rekrutierung wurde fortgesetzt, bis die angestrebte Stichprobengröße erreicht war. Um mögliche Selektionsbias innerhalb dieses Rahmens zu verringern, wurden die Kontrollpersonen altersgematcht durch einfache Zufallsstichprobe aus berechtigten nicht schwangeren Sprechstundenteilnehmerinnen ausgewählt.
Schwangere Frauen waren für die Aufnahme berechtigt, wenn sie 18 Jahre oder älter waren und eine Schwangerschaft mit einer Schwangerschaftsdauer zwischen 12 und 36 Wochen hatten. Berechtigte Teilnehmerinnen wurden unabhängig von ihrem Eisenstatus eingeschlossen und anschließend basierend auf Laborbefunden als schwanger mit Eisenmangelanämie (IDA) oder ohne IDA klassifiziert. Gemäß den WHO-Kriterien wurde Anämie in der Schwangerschaft definiert als Hämoglobin (Hb)-Konzentrationen < 11,0 g/dL im ersten und dritten Trimester sowie < 10,5 g/dL im zweiten Trimester. Eine IDA wurde bei Frauen diagnostiziert, die die schwangerschaftsspezifische Hb-Schwelle erfüllten und Hinweise auf Eisenmangel aufwiesen, einschließlich Serumferritin < 15 ng/mL, Serumeisen < 10 µmol/L und Gesamteisenbindungskapazität (TIBC) ≥ 68 µmol/L17,18. Schwangere Frauen, die diese diagnostischen Kriterien nicht erfüllten, wurden als Gruppe der Schwangeren ohne IDA klassifiziert. Nichtschwangere Frauen im gebärfähigen Alter ohne aktuelle Schwangerschaft und ohne bekannte hämatologische Erkrankungen dienten als Kontrollgruppe. Ausschlusskriterien für beide Gruppen umfassten dokumentierte Vorerkrankungen chronischer oder systemischer Erkrankungen, die mit einer veränderten Eisenstoffwechsellage oder entzündlichen Zuständen assoziiert sind, wie chronische Nierenerkrankung, Autoimmunerkrankungen, Malignome, Reizdarmsyndrom, chronische Lebererkrankung oder hereditäre Eisenstoffwechselerkrankungen (z. B. Hämochromatose). Frauen mit akuten Infektionen zum Zeitpunkt der Probenentnahme, solche, die innerhalb der letzten drei Monate eine intravenöse Eisentherapie oder Bluttransfusion erhalten hatten, sowie Frauen unter langfristiger immunsuppressiver Therapie wurden ebenfalls ausgeschlossen. Der Body-Mass-Index (BMI) und die ethnische Zugehörigkeit wurden bei allen Teilnehmerinnen erfasst; diese Variablen wurden jedoch nicht als Ausschlusskriterien verwendet, sondern stattdessen als mögliche Kovariaten in der Analyse berücksichtigt.
Bestimmung der Stichprobengröße
Die Stichprobengröße wurde mithilfe einer Software zur epidemiologischen Berechnung der Stichprobengröße19 berechnet, basierend auf einer erwarteten Prävalenz von Eisenmangelanämie (IDA) bei schwangeren Frauen in Saudi-Arabien von 40 %6, einem Konfidenzniveau von 95 % und einer Fehlermarge von 5 %. Die minimal erforderliche Stichprobengröße wurde auf 182 Teilnehmer geschätzt; daher wurden insgesamt 200 Teilnehmer rekrutiert, um die statistische Genauigkeit zu erhöhen.
Datenerhebung
Fragebogen
Die Datenerhebung erfolgte mithilfe eines strukturierten und validierten Fragebogens. Der Fragebogen wurde nach einer umfassenden Literaturrecherche entwickelt und von einem Gremium aus Fachexperten, darunter Geburtshelfer, Ernährungswissenschaftler und Epidemiologen, hinsichtlich seiner Inhaltsvalidität überprüft. Eine Vorstudie mit 20 Teilnehmenden, die nicht in die endgültige Analyse einbezogen wurden, wurde durchgeführt, um Klarheit, Zuverlässigkeit und Durchführbarkeit zu bewerten. Die innere Konsistenz des Fragebogens war akzeptabel, mit einem Cronbachs Alpha von 0,81.
Der endgültige Fragebogen bestand aus drei Abschnitten mit insgesamt 35 Items (Supplementary File 1):
Abschnitt 1 (soziodemografische Daten, 10 Elemente): Alter, Bildungsniveau, Beruf, Wohnort, Nationalität und familiäre Anamnese einer Anämie.
Abschnitt 2 (Ernährungsgewohnheiten, 12 Items): Häufigkeit des Verzehrs eisenreicher Lebensmittel (Rotes Fleisch, weißes Fleisch, Fisch, Gemüse und angereicherte Getreideprodukte), Aufnahme von Tee und Kaffee sowie Ernährungsform. Die Ernährungsvariablen wurden a priori basierend auf ihrer etablierten Relevanz für die Eisenaufnahme, die Eisenbioverfügbarkeit und ernährungsbedingte Faktoren, die die Eisenabsorption beeinflussen können, ausgewählt. Der Fragebogen beinhaltete wichtige diätetische Eisenquellen wie rotes Fleisch, Geflügel, Fisch, grünes Blattgemüse und angereicherte Getreideprodukte. Ebenso wurden vitamin-C-reiche Lebensmittel, insbesondere Zitrusfrüchte, erfasst, da Vitamin C die Aufnahme von Nicht-Häm-Eisen verbessern kann. Im Gegensatz dazu wurde der Konsum von Tee und Kaffee erhoben, da diätetische Polyphenole die Aufnahme von Nicht-Häm-Eisen hemmen können, wenn sie zusammen mit Mahlzeiten oder zeitlich nahe dazu konsumiert werden. Auch die Ernährungsform und der Verzehr von Fast Food wurden erfasst, um allgemeine Ernährungsmuster und die Ernährungsqualität zu beurteilen. Die ausgewählten Ernährungsparameter basierten auf der Literaturrecherche während der Entwicklung des Fragebogens und wurden anschließend von Experten aus den Bereichen Geburtshilfe, Ernährungswissenschaft und Epidemiologie hinsichtlich ihrer inhaltlichen Validität überprüft.
Abschnitt 3 (Klinische Anamnese und Symptome, 13 Items): Schwangerschaftswoche, Geburtenanamnese, Transfusionsanamnese, Müdigkeit, Schwindel, Fieber und andere Symptome, die häufig mit einer Anämie assoziiert sind.
Biochemische Bewertung
Bei jedem Teilnehmer wurde nach einer nächtlichen Fastenphase eine 5 mL große venöse Blutprobe entnommen. Die Proben wurden 15 Minuten bei 2000 × g zentrifugiert, um das Serum zu gewinnen, das anschließend unverzüglich analysiert wurde. Die Hämoglobinkonzentration wurde mithilfe eines automatisierten Hämatologie-Analysators bestimmt und in Gramm pro Deziliter (g/dL) angegeben. Die Konzentration von Serumferritin wurde mittels einer elektrochemilumineszenten Immunoassay-Methode (ECLIA) auf einem automatisierten Immunoassay-Analysator gemessen und in Nanogramm pro Milliliter (ng/mL) ausgedrückt. Serum-Eisen, die gesamte Eisenbindungskapazität (TIBC) und die ungesättigte Eisenbindungskapazität (UIBC) wurden mit einer kolorimetrischen Methode auf einem automatisierten biochemischen Analysator bestimmt, wobei die Ergebnisse in Mikromol pro Liter (µmol/L) angegeben wurden. Die Transferrinsättigung (TR-SAT) wurde als Verhältnis von Serum-Eisen zu TIBC multipliziert mit 100 berechnet und als Prozentwert angegeben.
Statistik und Datenanalysen
Die Daten wurden mithilfe standardisierter Software für statistische Analysen codiert und ausgewertet. Zur Zusammenfassung der soziodemografischen, Ernährungs-, klinischen und biochemischen Variablen wurden deskriptive Statistiken verwendet, einschließlich Mittelwerte, Standardabweichungen und Prozentangaben. Gruppenvergleiche erfolgten je nach Erfordernis mittels ungepaartem Student’s t-Test oder einfaktorieller Varianzanalyse (ANOVA). Als statistisch signifikant galt ein p < 0,05. Die grafischen Darstellungen wurden mit Hilfe von Grafik- und Statistiksoftware erstellt.
Um unabhängig mit IDA assoziierte Faktoren zu untersuchen, wurde ein multivariates logistisches Regressionsmodell angewandt. Der IDA-Status wurde als binäre abhängige Variable festgelegt (IDA = 1, Nicht-IDA/Kontrolle = 0). Unabhängige Variablen wurden a priori basierend auf biologischer Plausibilität und Evidenz aus früheren Studien ausgewählt und umfassten soziodemografische Merkmale (Wohnort, familiäre Anamnese von Anämie), physiologischen Status (Schwangerschaft) und Ernährungsvariablen (Aufnahme von rotem Fleisch, Geflügel und Zitrusfrüchten).
Kategoriale Variablen wurden mithilfe von Dummy-Variablen kodiert, und Variablen zur Nahrungsaufnahme wurden basierend auf der berichteten Konsumhäufigkeit (≤2 Mal pro Woche gegenüber >2 Mal pro Woche) als niedrig oder ausreichend klassifiziert. Alle ausgewählten Variablen wurden gleichzeitig in das Regressionsmodell eingegeben, um ihre unabhängigen Assoziationen unter Berücksichtigung möglicher störender Faktoren zu schätzen. Angepasste Odds Ratios (ORs) mit 95 %-Konfidenzintervallen (CIs) wurden angegeben, wobei ORs größer als 1 eine höhere Wahrscheinlichkeit für IDA widerspiegeln. Eine visuelle Zusammenfassung der ORs und der entsprechenden 95 %-CIs wurde mithilfe eines Waldplots dargestellt, der mit Tabellenkalkulationssoftware erstellt wurde.